АК

 

Антиоксидантная функция вит С Прооксидантная функция вит С

(при дефиците токоферола ↑ на 2 порядка )

АК

О2 + О2 + 2Н+ О2 + Н2О2

дАК

ОН, НО2

АК

ROO ROOH

дАК

АК

Витамин Е Витамин Е-ОН

дАК

Фолиевая к-та АК ТГФК

Защита скваленсинтетазы, карнитина

Транспорт электронов (1V комплекс)

О2 ОН

Защита Se и Fe2+ от окисления

Hb трансферрин цит. Р450

Синтез коллагена., обезвреживание ксенобиотиков

ТЕМА 1.12. ИССЛЕДОВАНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ ПЕРЕВАРИВАНИЯ ЛИПИДОВ.

ВОЗМОЖНЫЕ НАРУШЕНИЯ ПЕРЕВАРИВАНИЯ ЛИПИДОВ И

ТРАНСПОРТА В КРОВИ ЭКЗОГЕННЫХ ЛИПИДОВ

Актуальность темы

Переваривание липидов в желудочно-кишечном тракте – сложный биохимический процесс. Для создания физиологических условий гидролиза липидов в кишечнике необходимо полноценное функционирование нескольких органов: печени, поджелудочной железы, тонкого кишечника. Следовательно, переваривание и всасывание липидов в кишечнике - это результат интеграции работы вышеперечисленных органов. Дефект участия этих органов в усвоении пищевых липидов организмом приводит к различным заболеваниям, нарушению обмена жиров. Так, снижение синтеза желчных кислот в печени, патология желчеобразования и желчевыделения приводит к развитию стеатореи (жировой стул), создает препятствие для всасывания продуктов гидролиза жиров, способствует развитию гиповитаминоза группы жирорастворимых витаминов. Поэтому знание механизма переваривания и всасывания липидов необходимо будущим врачам-лечебникам, педиатрам, врачам гигиенического профиля. Эти знания потребуются при изучении патологической физиологии, фармакологии. внутренних болезней, хирургических болезней.

НЕ нашли? Не то? Что вы ищете?

Теперь ознакомьтесь с целями занятия.

Общая цель

Уметь интерпретировать особенности переваривания липидов в кишечнике в норме и при патологии для последующего использования в клинике внутренних болезней.

Конкретные цели : Цели исходного уровня:

Уметь:

1.Анализировать результаты определения активности панкреатической липазы во времени методом титрования.

1.Интерпретировать принципы титрования жирных кислот (кафедра медицинской и фармацевтической химии).

2. Интерпретировать влияние желчных кислот на процесс эмульгирования жиров и на активность панкреатической липазы.

2.Интерпретировать структуру желчных кислот и механизм действия эмульгаторов (кафедра медицинской и фармацевтической химии).

3. Интерпретировать патологические состояния, связанные с нарушением условий переваривания и всасывания липидов

3.Интерпретировать структуры триацилглицеридов и продуктов их гидролиза (кафедра медицинской и фармацевтической химии).

4. Анализировать изменения в системе циркуляторных транспортных липидов – хиломикронов, ЛПОНП при патологии, интерпретировать их функциональное значение

4. Интерпретировать гидрофобные и амфифильные свойства липидов (кафедра медицинской и фармацевтической химии

Для проверки исходного уровня Вам предлагается выполнить ряд заданий.

Задания для самопроверки и самокоррекции исходного уровня

Задание 1. В колбу налили молоко, добавили экстракт поджелудочной железы, содержащий липазу, индикатор фенолфталеин. Образовались жирные кислоты, которые оттитровали едким натром до образования слаборозовой окраски раствора. В каких единицах выражают результаты титрования?

А. В ммолях/л

В. В мкмолях/л

С. В миллилитрах

D. В граммах

Е. В мкмолях/(ч х мл).

Задание 2. В раствор, содержащий выделенные из касторового масла жирные кислоты, добавили 3 капли бромной воды, что привело к его обесцвечиванию. Что доказывает данная проба?

А. Наличие в масле непредельных жирных кислот

В. Наличие в масле предельных жирных кислот

С. Наличие в масле жирных кислот с четным количеством углеродных атомов

D. Наличие в масле жирных кислот с нечетным количеством углеродных атомов

Е. Наличие в масле натриевых и калиевых солей жирных кислот.

Задание 3. При добавлении к 1 капле неэмульгированного жира солей желчных кислот образовалось 1012 мелких капель жира. Каким свойством желчных кислот можно объяснить их эмульгирующее действие?

А. Амфифильностью

В. Растворимостью только в воде

С. Растворимостью только в неполярных растворителях

D. Нерастворимостью в воде

Е. Нерастворимостью в органических растворителях.

Задание 4. Желчные кислоты, участвуя в переваривании жиров, способствуют их эмульгированию. Какое из нижеперечисленных соединений обладает наиболее выраженными поверхностноактивными свойствами?

А. Холевая кислота

В. Гликохолевая кислота

С. Таурохолевая кислота

D. Хенодезоксихолевая кислота

Е. Натриевая соль гликохолевой кислоты.

Задание 5. С пищей животного происхождения в желудочно-кишечный тракт человека поступил триацилглицерид, где произошел его ферментативный гидролиз. Какой конечный продукт образовался в результате этого процесса?

А. Холестерин

В. Желчная кислота

С. Сфингозин

D. Жирная кислота

Е. Холин

Задание 6. В растворе с помощью специфических реакций определены следующие продукты гидролиза: глицерин и жирные кислоты. Какое вещество было подвергнуто гидролизу?

А. Холестерин

В. Триглицерид

С. Фосфатидилхолин

D. Холевая кислота

Е. Сфингозин.

Задание 7. Мицелла представлена гидрофобным ядром и амфифильной оболочкой. Какие липиды могут входить в состав ядра?

А. Триацилглицериды

В. Эфиры холестерина

С. Фосфолипиды

D. Холестерин

Е. Моноацилглицериды

Правильность решения проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.

Эталоны ответов к решению заданий для самопроверки и самоконтроля исходного уровня

3 - А; 5 - D.

Информацию для восполнения исходного уровня можно найти в следующей литературе:

1.,Бауков химия. М.: Медицина, 1991. – С. 457-469, 483-489

2., , Коваленко практикум по органической химии. - Харьков.: Золотые страницы, 2002. – С.401-406

3.Лекции по биоорганической химии

Содержание обучения

Содержание обучения должно обеспечивать достижение целей обучения, чему способствует граф логической структуры изучаемой темы (Приложение 1).

Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:

1. Механизм переваривания триацилглицеридов, фосфолипидов, эфиров холестерина

2. Всасывание продуктов гидролиза триацилглицеридов, фосфолипидов и

холестерине

3. Структура, свойства желчных кислот и их роль в переваривании липидов и всасывании продуктов гидролиза

4. Ресинтез триглицеридов и фосфолипидов в стенке кишечника

5. Транспорт экзогенных липидов кровью. Понятие о хиломикронах и ЛПОНП

6. Заболевания, связанные с нарушением перваривания липидов в желудочно-кишечном тракте и транспорта экзогенных липидов кровью (стеаторея, гиперхиломикронемия).

Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников.

Обязательная литература

1. І. Біологічна хімія. – Київ – Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 190-194, 224-228, 389, 396-398

2. Практикум з біологічної хімії/ За ред. проф. – Київ: Здоров ‘ я, 2002. – С.130-133, 136-139

3. Тестовые задания по биологической химии/ Под ред. Б.Г. Борзенко.-Донецк,2000.-С. 104-147

4. Лекции по биохимии

5. Граф логической структуры (Приложение 1)

6. Инструкция к практическому занятию.

Дополнительная литература

1., Коровкин химия.-М.: Медицина, 1998.-С.363-370

2., Коровкин химия.-М.: Медицина,1990.-С.276-291

3.Николаев химия. - М.: информационное агентство», 1998. - С. 279-283, 284-286, 292-295

4. Пустовалова по биохимии.- Ростов-на-Дону.: “Феникс”, 1999.-С.148-161

После изучения вышеперечисленных вопросов для самопроверки усвоения материала по изучаемой теме Вам предлагается выполнить целевые обучающие задачи. Правильность решения задач можно проверить, сопоставив их с эталонами ответов.

Целевые обучающие задачи

Задача 1. В колбу налили молоко, добавили экстракт поджелудочной железы, содержащий липазу, индикатор фенолфталеин. В другую колбу, кроме вышеперечисленного, добавили желчь. Образовавшиеся жирные кислоты оттитровали едким натром. На титрование второй пробы пошло большее количество щелочи. По какой причине?

А..Желчные кислоты активируют липазу

В. Желчные кислоты ингибируют липазу

С. Желчные кислоты эмульгируют жиры молока

D. Желчные кислоты титруются едким натром

Е. Желчные кислоты меняют действие индикатора

Задача 2. Кал больного желчекаменной болезнью содержит нерасщепленный жир и имеет серовато-белый цвет. Укажите возможную причину этого явления.

А. Нарушение поступления желчи в кишечник

В. Нарушение всасывания жирорастворимых витаминов

С. Снижение активности панкреатической липазы

D. Отсутствие панкреатической липазы

Е. Нарушение поступления в кишечник бикарбонатов

Задача 3. У больного, страдающего желчекаменной болезнью развилась обтурация желчного протока, в кале содержится много нерасщепленного жира. Чем можно обряснить нарушение переваривания жира у этого больного?

А. Отсутствием панкреатических фосфолипаз

В. Отсутствием эмульгирующего действия солей желчных кислот на гидрофобные жиры

С. Отсутствием панкреатической липазы

D. Невозможностью образования смешанных мицелл в кишечнике

Е. Наличием в мицеллах желчи большого количества холестерина

Задача 4. В эксперименте показано, что образование парных желчных кислот усиливает их способность эмульгировать жиры. Назовите кислоту, которая обладает наиболее сильным эмульгирующим действием.

А. Холевая

В. Дезоксихолевая

С. Гликохолевая

D. Хенодезоксихолевая

Е. Литохолевая

Задача 5. У больного панкреатитом в кале обнаружено большое количество непереваренного жира. Чем можно объяснить нарушение процесса переваривания жира у этого больного?

А. Уменьшением поступления желчи в кишечник

В. Увеличением поступления панкреатических фосфолипаз в кишечник

С. Уменьшением поступления панкреатической липазы в кишечник

D. Невозможностью образования смешанных мицелл в кишечнике

Е. Нарушением всасывания длинноцепочных жирных кислот в кишечнике.

Задача 6. Пищевые жиры в ЖКТ подвергаются ферментативному гидролизу. В каком отделе ЖКТ происходит расщепление этих веществ у взрослых людей?

А. Ротовой полости

В. Толстом кишечнике

С. Желудке

D. Тонком кишечнике

Е. Пищеводе

Задача 7. У больного хроническим гепатитом выявлено значительное снижение синтеза и секреции желчи. Переваривание и всасывание каких веществ в кишечнике будет нарушено у этого больного?

А. Белков

В. Жиров

С. Углеводов

D. Водорастворимых витаминов

Е. Нуклеопротеинов

Правильность решения проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.

Эталоны ответов к решению целевых обучающих задач:

1 – А, 7 – В

Краткие методические рекомендации к проведению занятия

В начале занятия проводятся тестовый контроль исходного уровня знаний студентов и его коррекция. Затем студенты приступают к выполнению лабораторной работы, используя при этом инструкцию.

После выполнения лабораторной работы оформляется протокол, делаются выводы к работе, которые проверяет и контролирует преподаватель. Проводится анализ самостоятельной работы студентов и коррекция.

В конце занятия проходит итоговый контроль, подводятся итоги занятия.

Инструкция к практическому занятию «Кинетика действия панкреатической липазы»

Принцип работы: скорость действия липазы в отдельных порциях молока определяется по количеству жирных кислот, образующихся при гидролизе жира молока за определнный промежуток времени. Количество жирных кислот определяют титрованием щелочью.

Материальное обеспечение: молоко, вытяжка из поджелудочной железы, 0,5 % раствор фенолфталеина, 0,05н. раствор едкого натра, стаканы, колбы пипетки, пробирки, бюретки, штативы.

Ход работы :В два стакана наливают по 10 мл молока и по 1 мл вытяжки из поджелудочной железы. В один стакан приливают 1 мл воды, а в другой – 1мл желчи. Жидкость в стаканах быстро перемешивают. Из каждого стакана отбирают по 1мл смеси в колбу, добавляют 1-2 капли 0,5 % раствора фенолфталеина и титруют 0,05н. раствором едкого натра до слаборозовой окраски, не исчезающей в течение 30 секунд. Затем оба стакана с оставшейся смесью помещают в термостат при 37 град. С. Через каждые 10 минут из стакана отбирают по 1 мл смеси и титруют 0,05н. раствором едкого натра в присутствии фенолфталеина до слаборозовой окраски. Проводят 5-6 таких определений и на основании полученных данных строят две кривые, отражающие процесс гидролиза жира под действием фермента липазы во времени и в зависимости от наличия или отсутствия желчи.

Результаты заносят в таблицу и представляют графически.

Время инкубации в минутах

Количество мл 0,05н. NаОН, пошедшего на титрование

Проба с желчью

Проба без желчи

Всего на пробу

Нейтрализовано

жирными кислотами

Всего на пробу

Нейтрализовано

жирными кислотами

0

10

20

30

40

50

График действия липазы во времени

Количество

мл 0,05 н NаОН,

пошедшего на 5

титрование

4

3

2

1

время в минутах

0

ВЫВОДЫ:

Подпись преподавателя:

Приложение 1

Граф логической структуры

ТЕМА 1.13. ИССЛЕДОВАНИЕ ОБМЕНА ЖИРНЫХ КИСЛОТ И КЕТОНОВЫХ ТЕЛ. БЕТА-ОКИСЛЕНИЕ ЖИРНЫХ КИСЛОТ. БИОСИНТЕЗ И ТРАНСФОРМАЦИЯ ХОЛЕСТЕРОЛА

Актуальность темы

Холестерин широко распространен в природе и является частью пищи человека. В организме человека он выполняет ряд важных функций: структурную, служит предшественником в синтезе стероидных гормонов, витамина Д, желчных кислот. С нарушением обмена холестерина связаны такие болезни века, как атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, желчекаменная болезнь. Поэтому понимание метаболизма, транспорта и регуляции обмена холестерина актуально при изучении этих заболеваний.

Одним из важных показателей жирового обмена является содержание кетоновых тел в крови, которые образуются в больших количествах при усиленном распаде триглицеридов. Их концентрация в крови повышается при сахарном диабете, голодании, приводя к развитию коматозного состояния.

В связи с вышеизложенным, определение кетоновых тел и холестерина в крови имеет большое значение для диагностики заболеваний, связанных с нарушением обмена триглицеридов и холестерина.

Теперь ознакомьтесь с целями занятия.

Общая цель

Уметь интерпретировать результаты определения концентрации холестерина в крови и кетоновых тел в моче для оценки состояния промежуточного обмена липидов с целью использования на клинических кафедрах при изучении заболевании, вызванных нарушениями метаболизма липидов.

Конкретные цели: Цели исходного уровня:

Уметь:

1.Интерпретировать энергетическую функцию липидов

1. Интерпретировать структуру триацилглицеридов как соединений, высоконасыщенных атомами водорода (кафедра медицинской и фармацевтической химии).

2.Анализировать наличие кетоновых тел в моче.

2 Интерпретировать свойства кетоновых тел как кислот (кафедра медицинской и фармацевтической химии).

3.Анализировать количественное содержание холестерина в крови.

3.Интерпретировать структуру холестерина как вторичного спирта - производного циклопентанпергидрофенантрена (кафедра медицинской и фармацевтической химии).

4. Интерпретировать патологические состояния, связанные с нарушениями метаболизма холестерина и кетоновых тел.

Для проверки исходного уровня Вам предлагается выполнить ряд заданий.

Задания для самопроверки и самокоррекции исходного уровня

Задание 1. Исследуемое вещество подвергли гидролизу и с помощью качественных реакций определили в гидролизате жирные кислоты и глицерин. Какое вещество исследовалось?

А. Холевая кислота

В. Триглицерид

С. Эфир холестерина

D. Фосфатидилхолин

Е. Холестерол

Задание 2. При гидролизе вещества образовались соединения, максимально насыщенные атомами водорода.. Какое вещество исследовалось?

А. Нуклеиновые кислоты

В. Триглицериды

С. Простые белки

D. Гликоген

Е. Крахмал

Задание 3. В исследуемой моче определили выраженную кислую реакцию за счет вещества, обладающего свойствами кетонов. Какое из перечисленных веществ может обусловить такое изменение рН мочи?

А. Ацетон

В. Янтарная кислота

С. Угольная кислота

D. Ацетоуксусная кислота

Е. Уксусная кислота

Задание 4. Какое из перечисленных соединений имеет в структуре кольцо циклопентанпергидрофенантрена?

А. Пирpол

В. Пиримидин

С. Холестерин

D. Пурин

Е. Тиазол

Задание 5. В моче больного с выраженной кислой реакцией определили содержание b-гидроксибутирата. Из какого предшественника он может образоваться?

А. Из ацетона

В. Из ацетоуксусной кислоты

С. Из масляной кислоты

D. Из янтарной кислоты

Е. Из гамма-оксимасляной кислоты

Правильность решения проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.

Эталоны ответов к решению заданий для самопроверки и самоконтроля исходного уровня

1 - В, 4 - С.

Информацию для восполнения исходного уровня можно найти в следующей литературе:

1.,Бауков химия. М.: Медицина, 1991. – С. 486-488, 181-183.

2., , Коваленко практикум по органической химии. Харьков: Золотые страницы, 2002. – С.271-297, 401-406.

3.Лекции по биоорганической химии.

Содержание обучения.

Содержанию обучения должно обеспечивать достижение целей обучения, чему способствует граф логической структуры изучаемой темы (Приложение 1).

Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:

1. Внутриклеточный липолиз триацилглицеринов и его регуляция.

2. β-Окисление жирных кислот и подсчет энергетического баланса.

3. Окисление глицерина и подсчет энергетического баланса.

4. Метаболизм кетоновых тел.

5. Причины и механизм развития кетонемии и кетонурии.

6. Синтез холестерина и его регуляция, транспорт холестерина.

7. Роль ЛПНП и ЛПВП в развитии атеросклероза.

8. Методика количественного определения холестерина в крови и кетоновых тел в моче. Клиническое значение этих исследований.

Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников.

Обязательная литература

1. І. Біологічна хімія. – Київ – Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 190-200

2. Практикум з біологічної хімії/ За ред. проф. – Київ: Здоров ‘ я, 2002. –

С.

3.Тестовые задания по биологической химии/ Под ред. Б.Г. Борзенко.-Донецк,2000.-С.114-120.

4.Лекции по биохимии.

5.Граф логической структуры (Приложение 1).

6.Инструкция к практическому занятию.

Дополнительная литература

1., Коровкин химия.-М.: Медицина,1998.-С. .370-380, 390-402, 404-405, 574-576

2., Коровкин химия.-М.: Медицина, 1990.-С. 292-300, 309-312

3.Николаев химия. - М.: информационное агентство», 1998. - С. 271 – 276; 284 – 286; 289 – 292;

4. Пустовалова по биохимии.- Ростов-на-Дону: Феникс, 1999.-С.176-182, 195-196.

После изучения вышеперечисленных вопросов для самопроверки усвоения материала по изучаемой теме Вам предлагается выполнить целевые обучающие задачи. Правильность решения задач можно проверить, сопоставив их с эталонами ответов.

Целевые обучающие задачи

Задача 1. В результате эксперимента установлено, что при интенсивной физической работе активируется мобилизация нейтральных жиров из депо. Какой фермент катализирует этот процесс?

А. Пепсин

В. Триглицеридлипаза

С. Липопротеинлипаза

D. Эндопептидаза

Е. Фосфолипаза

Задача 2. У крыс в результате длительного голодания обнаружена активация внутриклеточного липолиза с участием триглицеридлипазы. Каким гормоном активируется этот фермент?

А. Инсулином

В. Глюкагоном

С. Кальцитонином

D. Окситоцином

Е. Холекальциферолом

Задача 3. У экспериментального животного, не получавшего с пищей некоторые витамины, обнаружено нарушение распада ВЖК в печени. При отсутствии какого витамина в пище может нарушиться этот процесс?

А. Тиамина

В. Рибофлавина

С. Пиридоксина

D. Фолиевой кислоты

Е. Кобаламина

Задача 4. В качестве энергетического материала пальмитат используется во многих тканях. Сколько молекул АТФ образуется при полном окислении этой кислоты?

А. 2 молекулы

В. 38 молекул

С. 130 молекул

D. 145 молекул

Е. 128 молекул

Задача 5. β-окисление - специфический для жирных кислот путь распада. В чем заключается его сущность?

А. ВЖК декарбоксилируется

В. Углеродная цепь ВЖК уменьшается на один углеродный атом

С. Молекула ВЖК окисляется до молекул ацетил-Коа

D. Молекула ВЖК окисляется до молекул пирувата

Е. ВЖК превращается в кетоновые тела

Задача 6. У экспериментального животного, получавшего с пищей избыток углеводов, обнаружено снижение активности ацилкарнитинтрансферазы и скорости β-окисления ВЖК в печени. Назовите ингибитор этого фермента.

А. Ацетил КоА

В. Малат

С. Малонил - КоА

D. Оксалоацетат

Е. АДФ

Задача 7. Использование ингибитора тканевого дыхания антимицина в эксперименте у крыс приводит к нарушению β-окисления жирних кислот. Какой метаболит этого окисления является субстратом тканевого дыхания?

А. β-оксиацил-КоА

В. β-кетоацил-КоА

С. Ацетоацетил-КоА

D. Ацетил-КоА

Е. Еноил-КоА

Задача 8. Из организма человека ежедневно выводится около 1 грамма холестерина. Каким образом выводится этот продукт?

А. С помощью хиломикронов

В. В виде солей желчных кислот

С. С мочой в свободном виде

D. В виде стероидных гормонов

Е. Расщепляется до ацетил-SКоА

Задача 9. Хроническое воспаление печени и желчного пузыря у пациента, в рационе которого преобладала пища животного происхождения, привело к развитию желчнокаменной болезни. С какой целью для лечения этой болезни врач назначил хенодезоксихолевую кислоту?

А. Для растворения желчных камней

В. Для увеличения растворимости в желчи билирубина

С. Для ускорения мобилизации жира

D. Для активации образования ЛПОНП

Е. Для снижения синтеза эндогенного холестерина

Задача 10. У пациента, перенесшего инфаркт миокарда, уровень холестерина в плазме крови составил 12,6 ммоль/л. Каково нормальное содержание этого вещества в плазме крови?

А. 1,9-3,7 ммоль/л

В. 6,4-8,3 ммоль/л

С. 3,9-6,5 ммоль/л

D. 0,5-1,5 ммоль/л

Е. 9,6-14,3 ммоль/л

Правильность решений проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.

Эталоны ответов к решению целевых обучающих задач: 1 – В, 10 - С

Кракие методтческие указания к проведению занятия

На занятии проводится тестовый контроль исходного уровня знаний студентов и его коррекция. Проверяется выполнение домашнего задания. Затем студенты приступают к выполнению лабораторной работы, используя при этом инструкцию.

После выполнения лабораторной работы необходимо оформить протокол, сделать выводы к работе, которые проверяет и контролирует преподаватель.

В конце занятия проходит итоговый контроль, подводятся итоги занятия.

Инструкция к практическому занятию: «Количественное определение холестерина в крови и кетоновых тел в моче»

Работа 1. Реакция Либерманна – Бурхардта на холестерин

Принцип работы основан на способности раствора холестерина в хлороформе давать с уксусным ангидридом и концентрированной серной кислотой зеленое окрашивание.

Материальное обеспечение: экстракт холестерина, уксусный ангидрид, концентрированная серная кислота, пипетки, пробирки.

Ход работы: к 1 мл хлороформного экстракта холестерина добавляют 10 капель уксусного ангидрида и 2 капли конц. серной кислоты, хорошо перемешивают и наблюдают зеленое окрашивание.

Работа 2. Определение общего холестерина в сыворотке крови по методу Илька

Принцип работы основан на реакции Либерманна – Бурхардта (см. выше).

Материальное обеспечение: сыворотка крови, уксусный ангидрид, концентрированная серная кислота, пипетки, пробирки, мерные цилиндры, термостат, ФЭК, кюветы.

Ход работы: на дно сухой мерной пробирки вносят 0,1 мл сыворотки крови. Отмеривают цилиндром 2,1 мл реактива 1 (смесь ледяной уксусной кислоты, уксусного ангидрида и концентрированной серной кислоты) и переливают в пробирку с сывороткой, перемешивают, встряхивают и помещают в термостат при температуре 37 град. С на 20 минут (или при комнатной температуре). При этом развивается зеленое окрашивание. Затем фотометрируют на ФЭКе в кювете на 5 мм против воды при красном светофильтре. Для определения содержания холестерина по найденной оптической плотности пользуются готовым калибровочным графиком. Найденную концентрацию холестерина умножают на 1000, т. к. сыворотки в опыт берется 0,1 мл. Коэффициент пересчета в единицы СИ (ммоль/л) равен 0,0258.

Норма – 2,97 – 8,79 ммоль/л холестерина в сыворотке крови

Клинико-диагностическое значение.

Гиперхолестеринемия наблюдается при атеросклерозе, сахарном диабете, гипотиреозе, механической желтухе. Гипохолестеринемия наблюдается при голодании, туберкулезе, гипертиреозе.

Работа 3. Качественные реакции на ацетон и ацетоуксусную кислоту

Проба Люголя на ацетон

Принцип работы. Ацетон и ацетоуксусная кислота в щелочной среде образуют с нитропруссидом натрия оранжево-красное окрашивание.

Материальное обеспечение: моча, 10% раствор щелочи, нитропруссид натрия, ледяная уксусная кислота, пробирки, пипетки.

Ход работы. В пробирку наливают 5 капель мочи, 5 капель 10% раствора щелочи и 5 капель свежеприготовленного нитропруссида натрия. Появляется оранжево-красное окрашивание, которое после добавления 10 капель ледяной уксусной кислоты переходит в вишнево – красное окрашивание.

Реакция Герхардта на ацетоуксусную кислоту

Принцип работы Ацетоацетат с хлорным железом при кипячении образует раствор вишнево-красного цвета.

Материальное обеспечение: моча, 5% раствор хлорного железа, пробирки, пипетки

Ход работы К 5 каплям мочи прибавляют по каплям 5% раствор хлорного железа. При этом выпадает осадок – сульфат фосфорно-кислого железа. При наличии ацетатоацетата от дальнейщего прибавления хлорного железа появится вишнево – красное окрашивание. При кипячении процесс протекает быстро.

Клинико-диагностическое значение.

Гиперкетонемия и кетонурия наблюдаются при сахарном диабете, голодании, гиперпродукции гормонов – антагонистов инсулина.

ВЫВОДЫ:

Подпись преподавателя:

Приложение 1

Граф логической структуры

ТЕМА 1.14. ИССЛЕДОВАНИЕ БИОСИНТЕЗА ЖИРНЫХ КИСЛОТ, ТРИАЦИЛГЛИЦЕРИДОВ И ФОСФОЛИПИДОВ. НАРУШЕНИЯ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА: ОЖИРЕНИЕ, ЖИРОВАЯ ИНФИЛЬТРАЦИЯ ПЕЧЕНИ

Актуальность темы

Липиды организма, выполняющие различные функции, постоянно включаются в метаболические превращения, регулируемые гормонами. Тесная взаимосвязь крови со всеми тканями организма позволяет выявить изменения в обмене липидов через специфические компоненты крови - плазменные липопротеиды. В плазме крови их обнаружено несколько классов. Найдено, что при ряде заболеваний липопротеидный спектр сыворотки крови может изменяться. Для врача наблюдения за липопротеидным спектром сыворотки крови позволяет судить о динамике патологического процесса, а также эффективности терапевтических мероприятий.

Общая цель

Уметь интерпретировать липопротеидный спектр сыворотки крови в зависимости от состояния липидного обмена организма для использования на клинических кафедрах при объяснении нарушений метаболизма и их клинических проявлений.

Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:

1.  Механизм синтеза жирных кислот.

Синтез и депонирование нейтральных жиров. Синтез фосфолипидов, его отличие от синтеза триацилглицеридов. Взаимосвязь углеводного и липидного обменов. Регуляция жирового обмена. Липопротеины сыворотки крови. Нарушения липидного обмена:

а) ожирение

б) жировая инфильтрация печени.

Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников.

Обязательная литература.

1. І. Біологічна хімія. – Київ – Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С.201-213, 231-233

2. Тестовые задания по биологической химии/ Под ред. Б.Г. Борзенко.-Донецк,2000.-С. 104-147.

3. Лекции по биохимии.

4. Граф логической структуры (Приложение 1).

5. Инструкция к практическому занятию.

Дополнительная литература

1., Коровкин химия.- М.: Медицина,1998.-С. 392-398, 403-404, 381-387

2., Коровкин химия.- М.: Медицина,1990.-С. 300-309, 313-316, 443-445

3.Николаев химия. - М.: информационное агентство», 1998.-С. , ,

4. , Ивченко к лабораторным занятиям по биологической химии. – М.: Медицина, 1983. – С.

Инструкция к практическому занятию «Определение общих липидов в сыворотке крови»

Принцип работы: продукты распада ненасыщенных липидов образуют с реактивом, состоящим из серной, фосфорной кислоты и ванилина, окрашенное соединение. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию общих липидов в сыворотке крови.

Материальное обеспечение: сыворотка крови, фосфорнованилиновая смесь, пипетки, пробирки, ФЭК, кюветы.

Ход работы: в пробирку наливают 1 мл сыворотки крови и прибавляют 1 мл фосфорнованилиновой смеси. Тщательно перемешивают и оставляют на 5 минут при комнатной температуре. Интенсивность окраски определяется на ФЭКе с зеленым светофильтром. По калибровочному графику находят содержание общих липидов в пробе и затем рассчитывают их концентрацию в г/л. Нормальное содержание общих липидов в сыворотке крови 3,5-8 г/л.

 

ВЫВОДЫ:

Подпись преподавателя:

Приложение 1

Граф логической структуры

 

ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОПРОВЕРКИ И САМОКОРРЕКЦИИ СОДЕРЖАТЕЛЬНОГО МОДУЛЯ «МЕТАБОЛИЗМ ЛИПИДОВ И ЕГО РЕГУЛЯЦИЯ»

Задача 1. В эксперименте показано, что амфифильные свойства фосфолипидов определяют их важную роль в построении биомембран. Какой компонент обусловливает их гидрофильность?

А. Ненасыщеные жирные кислоты

B. Глицерин

С. Этаноламин

D. Насыщенные жирные кислоты

E. Сфингозин

Задача 2. При скармливании животным избытка холестерина, содержащего меченый углерод, большая часть его обнаруживалась в ЛПНП не только в холестерине, но и в холестеридах. Какой компонент холестеридов не содержит метки?

A. Спирты

B. Жирные кислоты

C. Аминокислоты

D. Амины

E. Углеводы

Задача 3. У пациента, страдающего хроническим панкреатитом, развилась стеаторея. Какая причина привела к этому?

A.  Гипохлоргидрия

B.  Гиперхлоргидрия

C. Авитаминоз жирорастворимых витаминов

D. Нарушение синтеза протеолитических ферментов

E. Нарушение синтеза липазы

Задача 4. Пациенту был назначен препарат желчи для улучшения переваривания жирной пищи. Какие компоненты желчи участвуют в этом процессе?

A. Высшие жирные насыщенные кислоты

B. Холестерин и его эфиры

C. Соли желчных кислот

D. Билирубинглюкурониды

E. Муцин

Задача 5. Расчеты показывают, что при полном окислении глюкозы образуется меньше молекул АТФ, чем при полном окислении высших жирных кислот. Докажите это, определив точно во сколько раз больше образуется молекул АТФ при окислении стеариновой кислоты по сравнению с окислением глюкозы.

А. В 1.5 раза

B. В 2 раза

C. В 3 раза

D. В 4 раза

E. В 5 раз

Задача 6. При исследовании состава миелиновых оболочек нервных волокон крыс были обнаружены цереброзиды. К какому классу липидов они относятся?

A. К глицерофосфолипидам

B. К гликосфинголипидам

C. К триацилглицеридам

D. К стероидам

E. К алифатическим спиртам

Задача 7. Животному ввели глюкозу, меченую по углероду и водороду. Через некоторое время метку обнаружили в пальмитиновой кислоте. Какой метаболит гликолитического распада и в каком количестве используется для образования углеродной цепи этой кислоты?

A. 6 молекул пирувата

B. 4 молекулы сукцинил КоА

C. 5 молекул пирувата

D. 8 молекул ацетил - КоА

E. 10 молекул ацетил КоА

Задача 8. При добавлении в пищу крысам глицерина, содержащего 14С, метка обнаруживается в составе жиров и глицерофосфолипидов, так как в синтезе этих веществ есть общие метаболиты. Назовите их.

A. 1,2-дифосфоглицерид

B. Холин

C. ЦДФ - этаноламин

D. Фосфатидная кислота

E. Метионин

Задача 9. При исследовании липидограммы крови установлено, что у пациента значительно повышено содержание ЛПОНП и ЛПНП. Содержание ЛПВП в норме. Каков прогноз такого анализа для пациента?

A. Предрасположенность к кетозу

B. Угроза жировой дистрофии печени

C. Предрасположенность к ожирению

D. Угроза атеросклероза

E. Возможность развития желчекаменной болезни

Задача 10. При приеме эстрогенов в крови возрастает уровень ЛПВП, что ведет к снижению риска заболевания атеросклерозом. Каков механизм антиатерогенного действия этих липопротеинов?

A. Способствуют всасыванию холестерина в кишечнике

B. Активируют превращение холестерина в желчные кислоты

C. Поставляют тканям холестерин

Д. Извлекают холестерин из тканей

Е. Участвуют в распаде холестерина

Эталоны ответов: 1 – С; 3 - Е; 6 – В; 9 – D

СОДЕРЖАТЕЛЬНЫЙ МОДУЛЬ 5 «МЕТАБОЛИЗМ АМИНОКИСЛОТ. ЭНЗИМОПАТИИ АМИНОКИСЛОТНОГО ОБМЕНА»

Актуальность темы. Белковый обмен занимает особое место в многообразных превращениях веществ, характерных для всех живых организмов. Белки являются основными структурными компонентами органов и тканей, проявляют ферментативную активность, участвуют в регуляции метаболизма, процессах сокращения мышц, транспорте газов и различных биологических веществ, а также в реакциях, обеспечивающих высшим организмам защиту от болезнетворных агентов.

Белки определяют макро - и микроструктуру отдельных субклеточных образований, специфичность клеток, органов и целостного организма, а также динамическое состояние между организмом и окружающей его средой. Белки являются материальным носителем жизни. В основе сохранения постоянства строения и функций организма на протяжении жизни лежит непрерывное самообновление белковых веществ за счет совершения двух противоположных процессов - анаболизма и катаболизма.

Общая цель содержательного модуля «Обмен аминокислот. Энзимопатии аминокислотного обмена»: уметь интерпретировать процессы метаболизма белков в норме и при патологии для последующего использования этих данных в клинике внутренних болезней.

Конкретные цели: Цели исходного уровня:

Уметь:

1. Интерпретировать особенности пере-варивания белков в норме и его возможные нарушения

Интерпретировать строение тканей человека (кафедра гистологии)

2. Интерпретировать общие пути ката-болизма аминокислот

Интерпретировать данные о строении, свойствах и методах исследования аминокислот (кафедра медицинской и фармацевтической химии)

3. Интерпретировать пути образования, транспорта и обезвреживания аммиака в норме и их возможные нарушения

4. Интерпретировать специфические пу-ти обмена аминокислот и их возможные нарушения

ТЕМА 1.15. ИССЛЕДОВАНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ЖЕЛУДОЧНОГО СОКА.

ОСОБЕННОСТИ ПЕРЕВАРИВАНИЯ БЕЛКОВ

Актуальность темы

Поступившие с пищей белки подвергаются перевариванию в желудочно-кишечном тракте с образованием аминокислот, которые всасываются в кровь. На долю аминокислот приходится более 95% всего азота организма.

Значение аминокислот для организма определяется прежде всего тем, что они используются для синтеза белков и пептидов. Кроме того, из аминокислот образуется большое количество веществ непептидной природы.

Знание особенностей процесса переваривания белков, участия в нем протеолитических ферментов желудочно-кишечного тракта необходимо для понимания патогенеза и диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта. В клинической практике для диагностики и контроля лечения многих гастроэнтерологических заболеваний используется анализ желудочного сока. При различных заболеваниях может изменяться количество образующегося желудочного сока, активность его протеолитических ферментов, а также его химический состав и концентрация в нем соляной кислоты.

Теперь ознакомьтесь с целями занятия.

Общая цель

Уметь интерпретировать особенности переваривания белков в желудочно-кишечном тракте в норме и при патологии для последующего использования в клинике внутренних болезней.

Конкретные цели: Цели исходного уровня:

Уметь:

1. Интерпретировать этапы гидроли - тического расщепления белков в желудочно-кишечном тракте в норме

Интерпретировать строение тканей человека (кафедра гистологии)

2. Интерпретировать механизм активации протеолитических ферментов желудочно-кишечного тракта

Интерпретировать принцип метода титрования кислот (кафедра медицин-ской и фармацевтической химии)

3. Интерпретировать патологические состояния, связанные с нарушениями белкового питания и переваривания белков в желудочно-кишечном тракте

Для проверки исходного уровня Вам предлагается выполнить ряд заданий.

Задания для самопроверки и самокоррекции исходного уровня

Задание 1. При цитологическом исследовании слизистой оболочки желудка были выявлены дегенеративные изменения ее главных клеток. Синтез какого вещества будет нарушен?

А. Пепсиногена

B. Соляной кислоты

C. Пепсина

D. Молочной кислоты

E. Цианкобаламина

Задание 2. Студент проводил определение рН раствора и применил индикатор фенолфталеин. При каком значении рН изменяется окраска этого индикатора?

А. 2

В. 11

С. 7

D. 4

Е. 6

Задание 3.Для определения рН раствора студент использовал диметиламиноазобензол, который в кислой среде изменяет свою окраску. При каком значении рН окраска индикатора изменяется от розовой до желтой?

А. 0

В. 5

С. 2

D. 8

Е. 11

Правильность решений проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.

Эталоны ответов к решению заданий для самопроверки и самоконтроля исходного уровня:

1  – А; 3 – В.

Информацию для восполнения исходного уровня можно найти в следующей литературе:

1., Бауков химия. - М.: Медицина, 1991. – С.313-360

2.Лекции по биоорганической химии

3. Лекции по гистологии

Содержание обучения

Содержание обучения должно обеспечивать достижение целей обучения, чему способствует граф логической структуры изучаемой темы (Приложение 1).

Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:

1. Роль белков в питании человека. Понятие пищевой ценности белков. Азотистый баланс

2. Переваривание белков в желудочно-кишечном тракте:

2.1. Роль желудочного сока на начальном этапе переваривания белков

2.2. Протеолитические ферменты желудочно-кишечного тракта, их активация, механизм действия (эндопептидазы, экзопептидазы)

3. Нарушения переваривания белков и всасывания аминокислот. Квашиоркор

4. Гниение белков в толстом кишечнике. Образование крезола, фенола, скатола и индола

Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников:

Обязательная литература

І. Біологічна хімія. – Київ – Вінниця: НОВА КНИГА, 2007. – С. 470; 474 – 477; 575

2. Практикум з біологічної хімії/ За ред. проф. – Київ: Здоров ‘ я, 2002. –

С.

3. Тестовые задания по биологической химии/ Под ред. Б.Г. Борзенко. - Донецк, 2000.-С. 148-

202

4. Лекции по биохимии

5. Граф логической структуры (Приложение 1)

6. Инструкция к практическому занятию

Дополнительная литература

1. І. Біологічна хімія. – Київ – Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С.

2., Коровкин химия. - М.: Медицина, 1998. - С.409 – 431; 465

3., Коровкин химия. - М.: Медицина, 1990. - С. 318-337; 365

4.Николаев химия. - М.: информационное агентство», 1998. - С. 303-308

5. , Мартынова пособие по клиническим лабораторным методам исследования (с элементами программирования). – Москва: Медицина, 1975. – С.

После изучения вышеперечисленных вопросов для самопроверки усвоения материала по изучаемой теме Вам предлагается выполнить целевые обучающие задачи. Правильность решений задач можно проверить, сопоставив их с эталонами ответов.

Целевые обучающие задачи

Задача 1. Пациенту в гастроэнтерологическом отделении проведено исследование секреторной деятельности желудка для уточнения диагноза ахилии. Какой патологический компонент желудочного сока может определяться в данном случае?

А. Пепсин

В. Внутренний фактор Касла

С. Соляная кислота

D. Лактат

Е. Реннин

Задача 2. В онкологическом диспансере у пациента была исследована секреторная функция желудка. В желудочном соке был обнаружен компонент, наличие которого позволило предположить опухолевый процесс желудка. Выберите этот компонент.

А. Соляная кислота

В. Пепсин

С. Молочная кислота

D. Реннин

Е. Внутренний фактор Кастла

Задача 3. Пациенту после исследования секреторной деятельности желудка был поставлен диагноз: ахилия. Объясните этот термин.

А. Отсутствие НСI в желудочном соке

В. Отсутствие НСI и пепсина в желудочном соке

С. Гиперацидное состояние

D. Гипоацидное состояние

Е. Повышение содержания пепсина

Задача 4. Пациенту после обследования поставлен диагноз: гиперацидный гастрит. Чему будет соответствовать общая кислотность при данном диагнозе?

А.50 ммоль/л

В. 25 ммоль/л

С. 70 ммоль/л

D. 0

Е. 5 ммоль/л

Задача 5. При взятии желудочного сока для усиления секреторной деятельности желудка используется гистамин. Концентрация какого компонента желудочного сока будет изменяться в данном случае?

А. Липазы

В. Лактата

С. Желчных кислот

D. Трипсина

Е. Соляной кислоты

Правильность решения проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.

Эталоны ответов к решению целевых обучающих задач:

1  – D, 3 – В, 5 – Е

Краткие методические рекомендации к проведению занятия

В начале занятия проводятся контроль исходного уровня знаний студентов и его коррекция. Затем студенты приступают к выполнению лабораторной работы и заданий для самостоятельной работы, используя при этом инструкцию.

После выполнения лабораторной работы необходимо оформить протокол, сделать выводы к работе, которые проверяет и контролирует преподаватель. Проводится анализ самостоятельной работы студентов и коррекция.

В конце занятия проходит текущий контроль, подводятся итоги занятия.

Задания для самостоятельной аудиторной работы

В основе обеспечения всех функций организма и регуляции всех процессов обмена веществ лежат структурные белки, ферменты, а также такие функционально активные белки как гемоглобин, цитохромы, миозин и другие. Кроме того, аминокислоты, входящие в состав белков, вносят свой вклад в глюконеогенез, липогенез, в образование энергии. Аминокислоты необходимы для синтеза гормонов белково-пептидной природы, креатина, гормонов-производных аминокислот, для образования порфиринового кольца гема и синтеза азотистых оснований нуклеотидов.

Обратите внимание на то, что потребность организма в белке складывается из потребности в общем азоте и незаменимых аминокислотах.

Продумайте ответы на вопросы

Какие факторы влияют на потребность организма в белках? От чего зависит пищевая ценность белков?

При ответе на последний вопрос не забудьте о том, что немаловажным критерием пищевой ценности белков является доступность аминокислот для всасывания из кишечника в кровь. Так, аминокислоты большинства животных белков полностью высвобождаются в процессе переваривания и практически полностью всасываются.

Из за большого объема эта статья размещена на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6