КЛИНИЧЕСКИ ЗНАЧИМЫЕ ДИСГЕМОГЛОБИНЫ. МЕТГЕМОГЛОБИН
, к. м.н., доцент кафедры биохимии РМАПО, г. Москва
Основной функцией содержащегося в эритроцитах гемопротеина – гемоглобина, является транспорт кислорода к клеткам тканей. В нормальных условиях в крови содержатся незначительные количества дериватов гемоглобина, не способных переносить кислород, так называемые дисгемоглобины: карбоксигемоглобин, метгемоглобин и сульфгемоглобин. При увеличении содержания дисгемоглобинов существенно страдает кислородотранспортная функция крови. Наиболее часто в клинической практике встречаются такие дисгемоглобины, как карбоксигемоглобин (СОНb) и метгемоглобин (MetHb).
ЭНДОГЕННЫЕ И ЭКЗОГЕННЫЕ ИСТОЧНИКИ МЕТГЕМОГЛОБИНА
Метгемоглобин постоянно образуется в результате нормального метаболизма клеток организма. Существует эндогенный механизм регуляции уровня метгемоглобина в крови, позволяющий поддерживать долю этой фракции не выше 1,0-1,5% от общего Hb. В отличие от карбоксигемоглобина, образованного в результате включения моноксида углерода в состав молекулы гемоглобина, метгемоглобин отличается от гемоглобина только наличием в геме окисленного трехвалентного железа Fe+++ вместо железа двухвалентного Fe++. В природе присутствует множество соединений, способных окислить Fe++ в Fe+++ в молекуле гемоглобина. Помимо внешних, известны и эндогенные воздействия, а также врожденные нарушения механизмов регуляции уровня метгемоглобина (Табл.1)
ПРИЧИНЫ МЕТГЕМОГЛОБИНЕМИИ
[m1]
Виды | Причины |
Врожденные |
|
Приобретенные (медикаментозные воздействия) |
|
Приобретенные (химические агенты) |
|
Эндогенные причины (характерные для новорожденных и детей первого года жизни) |
|
Окисляющие вещества способны вызвать метгемоглобинемию либо прямым окислением железа гемоглобина, либо вследствие образования свободных радикалов. В дополнение к воздействию метгемоглобинобразующих лекарственных препаратов дети 1 года жизни предрасположены к развитию метгемоглобинемии при приеме продуктов и питьевой воды с высоким содержанием нитратов. Кишечная флора, преобразующая нитраты в нитриты, также способствует увеличению образования метгемоглобина в детском возрасте. Кроме того, только к 4 месяцам жизни ребенка цитохром-b5-редуктаза достигает уровня активности взрослого индивидуума. Следует также отметить, что фетальный гемоглобин, характерный для новорожденных, легче подвергается окислению по сравнению с гемоглобином взрослых.
Новорожденные чаще подвержены диарее, которая может привести к развитию метаболического ацидоза. Известно, что в условиях метаболического ацидоза ферментная система восстановления гемоглобина способна терять до 50% своей активности. Метгемоглобинемия, связанная с диареей, вызывается комбинацией факторов даже при отсутствии системного ацидоза. В этом случае играет роль конвертация нитратов в нитриты грам-отрицательными бактериями, идиопатическая гиперчувствительная реакция на определенные протеины, содержащиеся в питательных смесях и др.
МЕХАНИЗМЫ РЕГУЛЯЦИИ УРОВНЯ МЕТГЕМОГЛОБИНА
Основная система защиты от окисляющих агентов, позволяющая поддерживать фракцию метгемоглобина у здоровых субъектов на уровне 1,0-1,5%, включает в себя три компонента: восстановленный никотинамид динуклеотид (НАД-Н), гемсодержащий гемопротеин цитохром b5 и фермент цитохром - b5-редуктаза. Донором электронов является продукт гликолиза НАД-Н. [m2] Электрон передается от НАД-Н на цитохром b5 и в конечном счете на метгемоглобин. Транспорт электрона катализируется ферментом цитохром - b5-редуктазой. Этот механизм отвечает за восстановление 99% гемоглобина из метгемоглобина. Другой путь восстановления гемоглобина, связанный с активностью НАДФ-метгемоглобинредуктазы, в нормальных условиях оказывает незначительное влияние. Его роль повышается в случае дефицита цитохром - b5-редуктазы. Также этот альтернативный путь имеет значение для терапевтического воздействия основного антидота, применяемого при приобретенной метгемоглобинемии – метиленового синего. Наконец, восстанавливающим гемоглобин эффектом обладают такие антиоксиданты, как восстановленный глютатион и аскорбиновая кислота.
ВРОЖДЕННЫЕ МЕТГЕМОГЛОБИНЕМИИ
Наследственная метгемоглобинемия является редкой генетической патологией, связанной с мутацией 22q13 хромосомы, на которой обнаружена цитохром- b5-редуктаза. Заболевание наследуется по аутосомно-рецессивному типу и проявляется цианозом и высоким уровнем метгемоглобина в крови вскоре после рождения. Так как фермент цитохром - b5-редуктаза представлен как в свободной форме, так и фиксированным на митохондриальной мембране и эндоплазматическом ретикулюме, существуют два типа гомозиготных метгемоглобинемий. При 1-ом типе, связанном с дефицитом фермента только в свободной форме, заболевание проявляется только цианозом. При 2-ом типе, связанном с дефицитом фермента во всех клетках, течение болезни более тяжелое (отставание в умственном развитии, неврологические нарушения).
Клинические симптомы при гетерозиготной метгемоглобинемии могут появиться только в условиях так называемого «окислительного стресса».
Гемоглобин-М (HbM) представляет группу аномальных гемоглобинов с мутациями в глобиновой цепи, которые фиксируют железо гема в окисленной форме. Замена гистидина тирозином в альфа и бета цепях определяет основные характеристики HbM. Врожденная патология, связанная с образованием гемоглобина-М, наследуется по аутосомно-доминантному типу. Вследствие этого гомозиготы при данной патологии нежизнеспособны.
Важно отметить то, что структурные изменения гема в HbM приводят к тому, что спектр поглощения HbM при проведении абсорбционной спектрофотометрии [m3] отличается от спектра обычного метгемоглобина. Это создает проблемы при проведении ко-оксиметрии, когда отмечаются ложно-нормальные значения FmetHb, а анализатор выдает ложно-повышенные значения FCOHb или FSHb. В такой ситуации необходимо проведение исследования с цианидом калия, либо использованием метода газовой хроматографии. Окончательно определить вид HbM позволяет ДНК-исследование?? ПЦР или др. (и ПЦР и др. методы).
КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ МЕТГМОГЛОБИНЕМИИ
Клинические проявления метгемоглобинемии достаточно отчетливо коррелируют с фракцией метгемоглобина в крови, измеряемой с помощью много-волнового ко-оксиметра. Современные ко-оксиметры, входящие в состав анализаторов газов крови и кислотно-основного баланса, позволяют провести анализ методом абсорбционной спектрофотометрии по 128 длинам волн с шагом в 1,5 нм. Примером может служить анализатор газов крови ABL800 Flex производства компании “Radiometer Medical ApS” (Дания). Взаимосвязь клинических симптомов с долей фракции метгемоглобина в крови представлена в таблице 2.
FMetHb | Симптоматика |
< 3% | Отсутствие клинических проявлений |
3-15% | Сероватый оттенок кожных покровов |
15-30% | Цианоз. Шоколадно-коричневое окрашивание крови |
30-50% | Диспноэ. Головная боль. Слабость. Головокружение. Обмороки. Показатель пульсоксиметра SpO2 около 85% |
50-70% | Тахипноэ. Метаболический ацидоз. Аритмии. Судороги. Угнетение ЦНС вплоть до комы. |
> 70% | Выраженная клиника гипоксии. Смерть. |
При оценке клинической симптоматики метгемоглобинемии следует учитывать значительную ранимость детей раннего возраста. Дети до 6 месяцев достаточно часто переносят диарею различной этиологии. Также следует учитывать возможное воздействие таких окисляющих агентов, как поверхностные анестетики или зубные гели, сульфаниламиды, нафталин-содержащие шарики и т. д. Рядом авторов отмечено отсутствие цианоза у детей с выраженной метгемоглобинемией на фоне диареи. Другие авторы отмечают специфическую непереносимость протеинов питательных смесей, как основную причину клинически значимой метгемоглобинемии.
ДИАГНОСТИКА МЕТГЕМОГЛОБИНЕМИИ
В диагностике метгемоглобинемии, несомненно, основным тестом является измерение фракции MetHb на современном ко-оксиметре. Интерпретация данных пульсоксиметрии и анализа газов крови может быть обманчивой при наличии MetHb. Пульсоксиметрия определяет [m4] доли деокси - и оксигемоглобина измерением отношения абсорбции в красном и инфракрасном спектре методом эмиссионной спектрометрии. При отсутствии дисгемоглобинов пик абсорбции деокси - и оксигемоглобина отмечается на волнах 660 и 940 нм с соотношением 0.43, соответствующим 100% сатурации. Метгемоглобин абсорбируется на обеих волнах в равной степени, то есть метгемоглобинемия создает соотношение 1.0, соответствующее сатурации 85%. Таким образом, при метгемоглобинемии свыше 30% данные пульсоксиметрии будут составлять плато 82-85%, независимо от роста уровня метгемоглобинемии, и соответственно, степени выраженности гипоксии. Результаты стандартного анализа газов крови также не позволят диагностировать метгемоглобинемию, так как анализаторы вычисляют сатурацию SaO2%, учитывая paO2, pH, ctHb и предполагая нормальное положение кривой диссоциации оксигемоглобина. Достаточно редко встречается так называемая «псевдогемоглобинемия», когда сульфгемоглобин ко-оксиметром идентифицируется как MetHb. «Золотым стандартом» диагностики в подобных случаях является газовая хроматография.
Цианоз является наиболее частым симптомом метгемоглобинемии и служит причиной проведения дифференциальной диагностики с заболеваниями сердечно-сосудистой и дыхательной систем. Для метгемоглобинемии характерно несоответствие выраженности цианоза и степени гипоксемии. Заболевания, сопровождающиеся выраженным цианозом, например, тромбоэмболия легочной артерии, проявляются отчетливым снижением paO2, которое не наблюдается при метгемоглобинеии и paO2 может быть выше 150 мм Hg. Другим диагностическим тестом является ингаляция кислорода, которая не приводит к уменьшению степени цианоза при метгемоглобинемии.
Артериальная кровь при метгемоглобинемии, бывает настолько темной, что при пункции артерии специалист может заподозрить попадание в венозный сосуд. В этом случае могут быть полезны самозаполняющиеся шприцы для забора артериальной крови, (например, PICO70 производства компании “Radiometer Medical ApS”, Дания). Пульсирующее поступление крови в самозаполняющийся шприц подтверждает попадание в артериальный сосуд, так как давление около 10 мм Hg в венах недостаточно для поступления крови «самотеком». А этот абзац можно отнести к диагностике? Думаю, да.
ЛЕЧЕНИЕ МЕТГЕМОГЛОБИНЕМИИ
Лечение метгмоглобинемии базируется на восстановлении окисленного трехвалентного железа до двухвалентного. Методом выбора является внутривенное введение метиленового синего в дозе 1-2 мг/кг в течение 3-5 минут. Метиленовый синий рекомендован для введения пациентам с FmetHb 20% при наличии клинической симптоматики, при отсутствии симптомов – при уровне FmetHb 30%. Улучшение обычно наступает в течение 1 часа. При отсутствии улучшения допустимо повторное введение метиленового синего в дозе 1 мг/кг. Необходимо помнить, что метиленовый синий сам по себе является окисляющим агентом и может вызвать развитие гемолитической анемии, особенно при превышении его дозы свыше 4 мг/кг или у пациентов с дефицитом глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. При сопутствующем наличии метгемоглобинемии и дефицита глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы терапия метиленовым синим может быть неэффективна, так как у этих пациентов имеется недостаточность НАДФ-кофактора. Альтернативным методом лечения этих больных является обменная гемотрансфузия. Также применяется введение N-ацетилцистеина, как предшественника глютатиона или глюкозы, как кофактора синтеза НАДФ. Полезным также оказывается внутривенное введение такого антиоксиданта, как аскорбиновая кислота в дозе 1-2 г.
В заключение следует отметить, что активное внедрение в практику работы отделений интенсивной терапии современных ко-оксиметров позволяет выяснить причину развития гипоксических состояний и определить степень дисгемоглобинемии, в частности метгемоглобинемии, во многих ургентных ситуациях, ранее остававшихся в области “terra incognita”.
Список использованной литературы:
, , Случай тяжелой метгемоглобинемии у недоношенного новорожденного ребенка. Вестник интенсивной терапии, 2002, №2, с.18-21. Клинически значимые дисгмоглобины. Карбоксигемоглобин. Лаборатория, 2007, №1, с.17-18. Kyle A. Nelson, Mark A. Hostetler An Infant with Methemoglobinemia. Hospital Physician, 2003, February, pp. 31-38. Shannon Haymond, Rohit Cariappa, Charles S. Eby, Mitchell Scott Laboratory Assessment of Oxygenation in Methemoglobinemia. Clinical Chemistry, 2005, pp. 434-444. Chris Higgins Causes and clinical significance of increased methemoglobin. HYPERLINK “http://www. bloodgas. org, 2006, October.[m1]Надо вставить название колонок в таблице
[m2]Может лучше дать схему? Думаю, схема усложнит понимание.
[m3]Т. е. соответствует норме?. Нет, объяснение в последующих строках.
[m4]Наличие? Долю?
