ХАРАКТЕРИСТИКА ОСОБЕННОСТЕЙ СОСТОЯНИЯ СИСТЕМ ОБЩЕГО И СПЕЦИФИЧЕСКОГО ИММУНИТЕТА АТОПИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ ДЕТЕЙ ПОВОЛЖСКОГО РЕГИОНА.
/ конференция ВОП на базе УЗО, г. Самара, 2001
Известно, что иммунологические показатели практически здоровых людей характеризуются индивидуальностью значений, возрастными изменениями и колебаниями под влиянием биологических ритмов и нагрузочных факторов. В основе процесса формирования атопического статуса организма лежит сопряженные изменения как количественных характеристик, так и функциональной активности клеточного и гуморального звеньев системы иммунитета. Принимая во внимание тот факт, что сезонная экспозиция аллергена играет немаловажную роль при формировании клинической картины специфической сенсибилизации у атопиков можно предположить и наличие сезонной зависимости между уровнями аллергенспецифических IgE к сезонным аллергенам, каковыми являются все аллергены растительного происхождения.
Внедрение современных технологий (иммуноферментной, лазерной проточной цитофлюориметрической, гибридомной) и создание на их основе новых методов лабораторной диагностики, с одной стороны, позволяет с большей чувствительностью определить колебания количественных характеристик интересующих нас компонентов системы общего и специфического иммунитета, а с другой стороны, порождают необходимость установить пределы диагностической информативности используемых в широкой лабораторной практике новых методов иммунодиагностики in vitro, таких как методы оценки состояния клеточного и гуморального звеньев системы общего иммунитета c использованием технологии лазерной проточной цитофлюориметрии и МКАТ и иммуноферментные методы определения уровня аллергенспецифических IgE в сыворотке крови.
Для выполнения данной задачи необходимо более детально исследовать состояние интересующих нас параметров и оценить имеют ли они сезонный характер в группе атопически здоровых людей, что и явилось целью данной работы.
Была обследована группа из 58 детей без атопических проявлений в анамнезе, поло - возрастная структура которой представлена на рис.1-2.
|
|
Характеристика состояния системы общего иммунитета осуществлялась путем определения уровней экспрессии антигенов лимфоцитов CD3, CD8, CD4, CD20, CD16, HLADR с применением МКАТ серии ИКО (“БиоМедСпектр”, Москва) и проточного лазерного цитофлюориметра EPICS XL (“Coulter”, USA) по отработанным ранее рабочим параметрам [, , 1995], уровней иммуноглобулинов (Ig) А, М, G [Manchini, G., et al., 1965] и IgEобщего с использованием ИФТС (“Диаплюс”, Москва). Исследование состояния неспецифической системы резистентности организма оценивали по показателям уровней фагоцитарной активности нейтрофилов (ФП), лизосомально - катионных белков (ЛКБ) в лейкоцитах, НСТ - теста. Активность системы комплемента определяли методом гемолитического титрования.
Оценку состояния специфического иммунитета проводили путем определения в сыворотке крови уровня аллергенспецифических sIgE - антител к 56 аллергенам (20 пищевым: куриного яйца, желтка и белка куриного яйца, молока, говядины, свинины, курицы, утки, хека, сайры, трески, кукурузы, мандарина, лимона, апельсина, ячменной, рисовой, ржаной, гречневой и овсяной круп; 12 бытовым и шерсти животных: домашней и библиотечной пыли, перу подушки, волосу человека, перхоти лошади, морской свинки, собаки, кролика, кошки, овцы, Dermatophagoidas pteronissinus и D. farinae; 26 пыльцевых: амброзии, полыни, лебеды, тимофеевки, ежи, овсянницы, березы, ольхи, лещины, подсолнечника, дуба, микста сорных трав, ржи, микста луговых трав, пырея, костра, циклохена, мятлика, ясеня, одуванчика, клена, полевицы, лисохвоста, конопли, райграсса, микста пыльцы деревьев) с использованием иммуноферментных тест систем (ИФТС) [НПО“Аллерген”, г. Ставрополь].
Статистическая обработка полученных результатов проводилась с помощью ЭВМ IBM 1A 486 с использованием программы Statgraph (USA). Графическое построение распределения частот встречаемости отдельных значений показателей проводили в режиме Statgraph Frequency Тabulation и программы MS EXCEL 95.
Результаты иммунологического обследования, представленные в таблице 1, характеризуют особенности состояния показателей системы общего иммунитета атопически здоровых детей Поволжского региона.
Таблица 1.
Биометрические характеристики иммунологических показателей атопически здоровых детей Поволжского региона.
Показатель | n | Хср. ± s | Ме | Мо | Хmin- Хmax | характер распределения |
CD3,% | 26 | 69.3 ± 1.4 | 68.9 | 68.4 | 5 | правильное |
CD3, x109кл/мл | 14 | 2.1 ± 0.15 | 2.1 | 2.1 | правильное | |
CD4, % | 29 | 41.5 ± 0.8 | 40.5 | 40.5 | 3 | правильное |
CD4, x109кл/мл | 17 | 1.3 ± 0.1 | 1.2 | 1.2 | правильное | |
CD8, % | 29 | 25.0 ± 0.6 | 25.0 | 30.0 | 1 | правильное |
CD8, x109кл/мл | 17 | 0.77 ± 0.05 | 0.7 | 1.0 | 0 | правильное |
CD20, % | 25 | 7.5 ± 0.7 | 6.2 | 4.7 | правильное | |
CD20, x109кл/мл | 13 | 0.3 ± 0.1 | 0.2 | 0.2 | 0 | неправильное |
HLADR, % | 21 | 5.0 ± 0.8 | 3.7 | 2.8 | правильное | |
CD16, % | 18 | 8.9 ± 0.85 | 9.1 | 9.1 | правильное | |
IgA, г/л | 58 | 1.14 ± 0.07 | 1.12 | 1.2 | правильное | |
IgM, г/л | 58 | 1.06 ± 0.09 | 1.13 | 0.0 | правильное | |
IgG, г/л | 58 | 9.9 ± 0.5 | 9.0 | 7.0 | правильное | |
IgE, нг/мл | 58 | 54.4 ± 7.1 | 38.3 | 8.9 | неправильное | |
ФП, % | 53 | 58.3 ± 2.0 | 54.0 | 51.0 | 3 | правильное |
НСТ, % | 23 | 75.6 ± 2.4 | 79.0 | 72.0 | 7 | правильное |
ЛКБ, % | 26 | 1.2 ± 0.02 | 1.2 | 1.2 | правильное | |
Комплем.,% гем | 22 | 50.5 ± 2.6 | 48.9 | 39.0 | 3 | правильное |
С1, % гем. | 22 | 38.6 ± 1.5 | 40.0 | 40.0 | 2 | правильное |
С2, % гем. | 22 | 11.6 ± 0.8 | 10.0 | 10.0 | правильное | |
С3, % гем. | 22 | 26.6 ± 2.2 | 20.0 | 20.0 | 1 | правильное |
С4, % гем. | 22 | 27.0 ± 2.0 | 25.0 | 20.0 | 1 | правильное |
С5, % гем. | 22 | 26.4 ± 1.4 | 30.0 | 30.0 | 2 | правильное |
Примечание: n - объем выборки, Хср. - среднее арифметическое, s - погрешность, Ме - медиана, Мо - мода, Х min - X max - минимальное - максимальное значения.
Анализируя распределение биометрических характеристик показателей системы общего иммунитета по сезонам года нами не было отмечено достоверно значимой сезонной динамики, тогда как распределение оптических плотностей (ОП), полученных в иммуноферментной реакции и отражающих уровни аллергенспецифических IgE к ряду аллергенов, по нашему мнению носило явно сезонный характер (табл.2).
Таблица 2.
Сравнительная характеристика ОП, отражающих уровни аллергенспецифических IgE в сыворотке крови здоровых детей, в разные сезоны года.
Аллерген | зима | весна | лето | осень | ||||
n | Xср ± s | n | Хср ± s | n | Xср ± s | n | Xср ± s | |
куриное яйцо | 8 | 0.46 ± 0.15 | 8 | 0.27 ± 0.07 | 14 | 0.5 ± 0.1 | 7 | 0.5 ± 0.26 |
треска | 8 | 0.23 ± 0.06 | 8 | 0.2 ± 0.08 | 14 | 0.16 ± 0.08 | 7 | 0.33 ± 0.2 |
мандарин | 8 | 0.13 ± 0.05 | 8 | 0.4 ± 0.06 | 14 | 0.35 ± 0.1 | 7 | 0.25 ± 0.1 |
апельсин | 8 | 0.16 ±0.03 | 8 | 0.28 ±0.07 | 14 | 0.2 ± 0.07 | 7 | 0.2 ± 0.06 |
желток к. я. | 8 | 0.34 ±0.13 | 8 | 0.3 ± 0.1 | 14 | 0.36 ±0.14 | 7 | 0.3 ± 0.2 |
белок к. я. | 8 | 0.17 ± 0.1 | 8 | 0.27 ± 0.1 | 14 | 0.22 ± 0.1 | 7 | 0.4 ± 0.16 |
рисовая крупа | 8 | 0.33 ± 0.1 | 8 | 0.35 ± 0.1 | 14 | 0.2 ± 0.07 | 7 | 0.57 ± 0.2 |
гречневая крупа | 8 | 0.5 ± 0.1 | 8 | 0.4 ± 0.1 | 14 | 0.1 ± 0.03 | 7 | 0.52 ± 0.2 |
лебеда | 8 | 0.18 ±0.05 | 8 | 0.3 ± 0.16 | 14 | 0.2 ± 0.1 | 7 | 0.2 ± 0.07 |
дуб | 8 | 0.1 ± 0.04 | 8 | 0.34 ± 0.1 | 14 | 0.28 ± 0.07 | 7 | 0.4 ± 0.16 |
микст луг. трав | 8 | 0.13 ± 0.07 | 8 | 0.13 ± 0.07 | 14 | 0.3 ± 0.07 | 7 | 0.33 ± 0.1 |
мятлик | 8 | 0.3 ± 0.1 | 8 | 0.2 ± 0.1 | 14 | 0.2 ± 0.08 | 7 | 0.35 ± 0.16 |
ясень | 8 | 0.17 ± 0.06 | 8 | 0.15 ± 0.07 | 14 | 0.16 ± 0.05 | 7 | 0.3 ± 0.16 |
лисохвост | 8 | 0.1 ± 0.04 | 8 | 0.075 ± 0.04 | 14 | 0.15 ± 0.05 | 7 | 0.3 ± 0.14 |
рожь | 8 | 0.11 ± 0.05 | 8 | 0.39 ± 0.18 | 14 | 0.14 ± 0.08 | 7 | 0.26 ± 0.1 |
микст пыльцы деревьев | 8 | 0.12 ± 0.04 | 8 | 0.04 ± 0.04 | 14 | 0.13 ± 0.02 | 7 | 0.36 ± 0.17 |
Учитывая рекомендации, приведенные в инструкции к использованию ИФТС по определению аллергенспецифических IgE и калибровочные графики, полученные в ходе их применения можно полагать, что значения оптической плотности до 0,3 соответствуют нулевому и низкому уровню аллергенспецифических IgE в сыворотке исследуемой крови, тогда как значения, превышающие 0,3 - умеренному и высокому уровню содержания специфических антител, способных служить причиной проявления аллергических симптомов непереносимости данного аллергена. Из таблицы 2 видно, что повышенные уровни аллергенспецифических IgE (ОП > 0.3) были выявлены в ходе иммуноферментной реакции к 16 аллергенам, 50% среди которых составили пищевые аллергены и 50% - пыльцевые. Для остальных исследованных аллергенов оптические плотности не превышали 0.3 единицы и практически совпадали по сезонам года.
Кроме того, можно отметить, что имеет место сезонная периодичность в распределении повышенных титров аллергенспецифических IgE к указанным в таблице 2 аллергенам. Что касается пищевых аллергенов, то здесь немаловажным фактором выявленной периодичности могут служить особенности диеты пациента, данными по которой мы не располагаем. Тогда как выявленная нами весенне - осенняя периодичность в распределении повышенных уровней специфических IgE к ряду растительных аллергенов (табл.2) может являться следствием периодов цветения и поллинации данных растений.
Аналогичные результаты были получены и при проведении сравнительного анализа характера распределения процента встречаемости повышенных уровней специфических IgE к аллергенам, указанным в таблице 2 ( ОП > рис
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Анализ гистограмм, представленных на рис, показывает, что максимальные уровни специфических IgE к аллергенам тимофеевки, дуба, ржи и циклохена наблюдаются в весенний период, костра, полыни, микста луговых трав и райграсса - в осенний период, а мятлика и ясеня - в зимне - осенний период.
В результате проведенных исследований было установлено, что при обследовании атопически здоровых детей, показатели общего иммунного статуса которых находились в пределах нормальных физиологических значений, в сыворотке крови выявляются повышенные уровни аллергенспецифических IgE к пищевым и растительным аллергенам, которые характеризуются сезонной динамикой. Можно предположить, что использование более чувствительных методов иммуноферментного анализа позволяют в большем проценте случаев выявить циркулирующие в сыворотке периферической крови аллергенспецифические антитела, вырабатываемые в ответ на экспозицию веществ, обладающих значительной аллергенной активностью, но не сопровождающихся лабораторной и клинической картиной аллекргической непереносимости.
