Н. А. АСЕЕВ, Е. С. НИКИТИН, П. М. БАЛАБАН
Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, Москва
РАЗРАБОТКА МЕТОДА БИОЛИСТИЧЕСКОЙ ДОСТАВКИ
ПОТЕНЦИАЛ-ЗАВИСИМЫХ КРАСИТЕЛЕЙ В КЛЕТКИ ЖИВОГО МОЗГА МЛЕКОПИТАЮЩИХ ДЛЯ ОПТИЧЕСКОЙ
РЕГИСТРАЦИИ НЕЙРОННОЙ АКТИВНОСТИ
В экспериментах на мозге млекопитающих в последнее время все чаще используют зонды — мономолекулярные красители, позволяющие следить за электрической активностью нейронов в реальном масштабе времени. Существующие на сегодняшний день способы доставки красителей в нервную ткань имеют серьезные ограничения, сильно сужающие область их применения (нерастворимость в воде, ядовитость других растворителей и самих ПЗК в высоких концентрациях для живой ткани). В нашей работе мы разработали новый метод доставки ПЗК путем выстреливания микрочастиц золота покрытых красителем в переживающие срезы коры больших полушарий мозга. Трёхмерная реконструкция флуоресцентного свечения нервной ткани на сканирующем конфокальном микроскопе показала, что при таком способе доставки краситель распространяется по клеточной мембране, полностью окрашивая клетку-мишень с отростками и не распространяясь на окружающие клетки по межклетнику или через клеточные контакты. Разработанный инновационный метод окрашивания нейронов может быть применен для дистанционного считывания оптической аппаратурой информации об электрической активности отдельных нейронов и распространении электрического потенциала по компартментам возбудимых клеток (аксонов и дендритов) как на переживающих срезах, так и в интактном мозге животного.
