АНАЛИЗ ЧАСТОТЫ И СПЕКТРА ХРОМОСОМНЫХ АБЕРРАЦИЙ

У ШАХТЕРОВ КЕМЕРОВСКОЙ ОБЛАСТИ

, ,

ФГБОУ ВПО «Кемеровский государственный университет», Кемерово

В Кемеровской области угледобывающая отрасль промышленности является основной, поэтому изучение влияния производственных факторов на здоровье шахтеров относится к одной из приоритетных медико-биологических задач.

В производственных условиях шахтеры подвергаются воздействию комплекса неблагоприятных факторов: угольно-породной пыли, пониженного содержания кислорода, повышенного содержания углекислого газа, метана, сероводорода, оксида азота, оксида углерода, сернистого газа, диоксида кремния, а также шума, вибрации, нервно-психического перенапряжения и др.

Генотоксические эффекты от воздействия неблагоприятных производственных факторов могут отражаться на здоровье не только настоящего, но и будущего поколений, в связи с чем представляется актуальным изучение частоты и спектра хромосомных аберраций у рабочих горнодобывающей промышленности.

Проведено исследование цитогенетических показателей в лимфоцитах периферической крови 23 рабочих шахт Междуреченского и Прокопьевского районов. Средний возраст в анализируемой выборке составил 56,17±1,1 года, все обследованные относятся к группе второго зрелого возраста (44-59 лет). Стаж работы в подземных условиях варьирует от 26 до 30 лет и составляет в среднем 27,67±0,61 года.

Для исследования были взяты образцы метафазных хромосом, выделенные стандартным методом культивирования лимфоцитов периферической крови человека. Кровь помещалась в стерильный вакутейнер с гепарином. В культуральный флакон вносили 4,5 мл среды RPMI 1640 (ПанЭко), 0,01 мл пенициллина со стрептомицином, 1,0 мл сыворотки крупного рогатого скота (ПанЭко), 0,1 мл фитогемагглютинина (ПанЭко), 0,5 мл крови. Длительность культивирования составляла 48 часов. За 2 часа до фиксации в культуры добавляли колхицин в конечной концентрации 60 мкл. По окончанию культивирования клетки обрабатывались гипотоническим раствором 0,55% KCI в течение 10-15 минут при температуре 37 °C. Фиксацию материала проводили в трех сменах охлажденного этанол-уксусного фиксатора (3:1). Клеточную суспензию раскапывали на чистые, охлажденные, смоченные водой предметные стекла. Препараты высушивали вблизи пламени спиртовки (не поджигая), шифровали и окрашивали 2% раствором красителя Гимзы.

Учет хромосомных аберраций проводили без кариотипирования. Отбор метафаз соответствовал общепринятым рекомендациям. Ахроматические пробелы в число аберраций не включали и учитывали отдельно. Анализировали от каждого индивида по 200 клеток.

Все результаты анализа аберраций вносили в единый протокол, где отмечали количество изученных клеток, общую частоту аберраций, количество и локализацию отдельных типов повреждений и их распределение по клеткам.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета программ Statsoft Statistica 6.0. В результате анализа 4000 метафазных пластинок в анализируемой выборке выявлены одиночные фрагменты, парные фрагменты, дицентрические хромосомы с фрагментами, дицентрические хромосомы без фрагментов, атипичные моноцентрики, кольцевые хромосомы. Полученные частоты в сопоставлении с данными общепопуляционной контрольной выборки по Кемеровской области приведены в таблице.

Таблица

Частота и спектр хромосомных аберраций в группах шахтеров

и регионального контроля

Показатель

Шахтеры

Региональный контроль

Всего

Частота

Всего

Частота

Метафазы

4000

-

11200

-

Аберрантные метафазы

64

0,016

314

0,0280

Одиночные фрагменты

22

0,0055

232

0,0207

Парные фрагменты

13

0,00325

98

0,00875

Всего обменов

2

0,0005

9

0,000797

Дицентрики с парным фрагментом

4

0,001

6

0,000531

Дицентрики без парного фрагмента

4

0,001

1

0,000089

Кольцевые хромосомы

1

0,00025

1

0,000089

Атипичные моноцентрики

19

0,00475

0

0

В группу регионального базисного контроля включены индивиды, проживающие в населенных пунктах, не имеющих на своей территории предприятий химической, металлургической или горнодобывающей промышленности, и не контактирующие с какими-либо производственными вредностями [1].

В целом, частота хромосомных аберраций, а также одиночных и парных фрагментов у шахтеров ниже, а дицентрических хромосом и атипичных моноцентриков – выше, чем в группе сравнения. На данном этапе исследования выраженных кластогенных эффектов в лимфоцитах крови обследованных рабочих не установлено.

Повышение частоты дицентрических хромосом и атипичных моноцентриков в лимфоцитах шахтеров с подземным стажем может быть связано с воздействием ионизирующей радиации, однако для подтверждения данного предположения необходимы дополнительные исследования.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1.  Дружинин характеристики частоты хромосомных аббераций в группе жителей крупного промышленного региона Западной Сибири / // Генетика. – 2003. – Т. 39, № 10. – С. .