На правах рукописи
Особенности механизмов регуляции инотропии сердца крыс в постнатальном онтогенезе
03.03.01-физиология
Автореферат
диссертации на соискание учёной степени
кандидата биологических наук
Казань – 2010
Работа выполнена на кафедре анатомии и физиологии государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Татарский государственный гуманитарно-педагогический университет»
Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор
доктор медицинских наук, профессор
Ведущая организация: ГОУ ВПО «Московский государственный университет имени », биологический факультет (г. Москва)
Защита состоится «14» сентября 2010 г. в 14.00 часов на заседании Диссертационного совета Д 212.078.02. при ГОУ ВПО «Татарский государственный гуманитарно-педагогический университет» г. Казань, ул. Татарстан, 2.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Татарский государственный гуманитарно-педагогический университет» по адресу:
г. Казань, ул. Татарстан, 2.
Автореферат разослан «05» июля 2010 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета
д. м.н., профессор
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследования.
Механизмы регуляции деятельности сердца на протяжении нескольких последних столетий привлекают внимание отечественных и зарубежных исследователей (, 1883; , 1966; , 1975; , 1998; Weber., 1846; Mangoni M. E., Nargeot J., 2008; van Borren M. M. et al., 2010; Stavrakis S. et al., 2010). В основе нервной регуляции деятельности сердца лежит взаимодействие между симпатическим и парасимпатическим отделами вегетативной нервной системы, которые реализуют свои влияния через адренорецепторы и холинорецепторы клеток сердца (, 1987; , 1995; , 2005; Robinson R. B. et al., 2003; Choate J. K., Feldman., 2003; Barbuti et al., 2009). В настоящее время доказанной является гетерогенность популяции адренорецепторов и мускариновых холинорецепторов. В организме млекопитающих и амфибий идентифицированы пять подтипов мускариновых холинорецепторов (Brodde O. E., Michel M. C., 1999). Детально изучены молекулярные и фармакологические свойства этих рецепторов, описана их хромосомная локализация у человека.
В течение многих лет изучались механизмы определяющие возрастные изменения работы сердца на разных этапах пренатального и постнатального онтогенеза (, 1971; , 1982; , 2003; , 2004; Cribs L. L. et al., 2001; Protas L. et al., 2001; Nouchi H. et al., 2007). Долгое время считалось, что в основе возрастной брадикардии лежит усиление парасимпатических и ослабление симпатических влияний на сердце (, 1982). Однако позднее было показано, что симпатическая иннервация в сердце млекопитающих развивается существенно позже, чем парасимпатическая (, 1992; Robinson R. B., 1996). В настоящее время большинство исследователей считает, что в основе возрастных особенностей механизмов регуляции сердечной деятельности лежат изменения состава, локализации и активности рецепторов клеток сердца, особенности работы ионных каналов и систем вторичных посредников в интракардиальных нейронах, атипичных и рабочих кардиомиоцитах (Christoffels V. M. et al. 2010). Особый интерес к изучению данной научной проблемы основан на различных, а иногда, и противоречивых экспериментальных результатах, полученных разными авторами в опытах по изучению симпатических и парасимпатических регуляторных влияний на сердце. Так, достаточно давно известно, что стимуляция блуждающего нерва способна вызывать как брадикардию, так и тахикардию (, , 1977). Некоторые исследователи считают, что хронотропный эффект блуждающего нерва можно разделить на два компонента: тормозной тонический и синхронизирующий (, 2007). Известно, что перерезка блуждающих нервов, а также блокада парасимпатических воздействий атропином способна оказывать различные эффекты на сердце.
В настоящее время большинство исследователей сходятся на мнении, что в основе вегетативной регуляции сердечной деятельности лежат симпато-парасимпатические взаимодействия (Mori T. et al., 2004; Weiergraber M. et al., 2005; Bucchi A. et al., 2007; Stavrakis S. et al., 2010). Различают несколько видов этих взаимодействий – антагонизм, взаимокомпенсация, акцентированный антагонизм (, , 1971; Levy M. N., 1984). Следует отметить, что центральным элементом системы регуляции хронотропии сердца является постганглионарный парасимпатический нейрон, локализованный в сердце и образующий тормозной синапс с мускариновыми холинорецепторами атипичных кардиомиоцитов. Эти нейроны интегрируют экстра - и интракардиальные регуляторные влияния, ингибируют спонтанную активность пейсмекеров.
В многочисленных работах показано наличие существенных видовых особенностей механизмов регуляции работы сердца. Так, у человека на протяжении всего раннего постнатального онтогенеза наблюдается возрастная брадикардия. У крыс, наиболее распространенных в настоящее время лабораторных млекопитающих, частота сердцебиений увеличивается на протяжении всего молочного периода развития (, 1999). У крыс же ставятся под сомнение само наличие тонуса вагуса (, 1980). В то же время электрическая стимуляция блуждающих нервов у данного вида животных приводит к выраженной брадикардии, которая полностью блокируется введением атропина, поэтому весьма актуальным является изучение молекулярных механизмов регулирующих формирование потенциала действия в сердечных клетках (, 1983; Chen H., 2005). Согласно классическим представлениям активация парасимпатикуса ингибирует не только хронотропию, но и инотропию сердца. Однако множество исследователей получили результаты противоположные данной точке зрения. Показано, что активация М-ХР может вызывать как положительный, так и отрицательный инотропный эффект (Cui X. L. et al., 2007; Houchi H. et al., 2007; Hussain R. I. et al., 2009; Kitazawa T. et al., 2009). Существует предположение, что в основе особенностей регуляции сократительной активности миокарда лежит взаимодействие АХ с разными подтипами М-ХР, активации систем вторичных посредников и модуляции деятельности различных эффекторов (Anger T. et al., 2007; Ganzinelli S. et al., 2007; Myslivecek J. et al., 2008; Vieira C. et al., 2009; Hang P. Z. et al., 2009; Hussain R. I. et al., 2009; van Borren M. M. et al., 2010). Таким образом, весьма актуальным является изучение влияния селективной блокады разных подтипов М-ХР на инотропию миокарда после введения карбахолина.
В последние годы активно развивается изучение роли токов, активируемых гиперполяризацией в регуляции сердечного ритма (, 2001; и др., 2007; DiFrancesco D. et al., 2009; Barbuti. et al. 2009; Maher MP. et al., 2009; Verkerk AO. et al., 2009). В то же время малоизученной остается роль данных токов в регуляции инотропии сердца. Имеются данные о том, что стимуляция М-ХР может ингибировать активность токов, активируемые гиперполяризацией путем генерации NO (Lang N. et al., 2007). Именно поэтому изучение влияния блокады разных подтипов М-ХР и If является крайне актуальным.
Цель исследования:
Целью настоящего исследования является изучение in vitro роли разных подтипов мускариновых холинорецептров, а также токов, активируемых гиперполяризацией в регуляции инотропии сердца крыс на разных этапах постнатального развития.
Задачи исследования:
1. Определить дозозависимое влияние карбахолина на сократимость миокарда предсердий и желудочков крыс 1-но, 3-х, 6-ти, 8-ми и 20-ти недельного возраста.
2. Определить дозозависимое влияние атропина на сократимость миокарда предсердий и желудочков крыс 1-но, 3-х, 6-ти, 8-ми и 20-ти недельного возраста.
3. Изучить влияние неселективной блокады М-ХР атропином на эффект действия карбахолина у крыс 1-но, 3-х, 6-ти, 8-ми и 20-ти недельного возраста.
4. Исследовать влияние селективной блокады М1-ХР пирензипином на эффект действия карбахолина у крыс 1-но, 3-х, 6-ти, 8-ми и 20-ти недельного возраста.
5. Определить влияние селективной блокады М2-ХР галламином на эффект действия карбахолина у крыс 1-но, 3-х, 6-ти, 8-ми и 20-ти недельного возраста.
6. Оценить влияние селективной блокады М3-ХР 4-DAMP на эффект действия карбахолина у крыс 1-но, 3-х, 6-ти, 8-ми и 20-ти недельного возраста.
7. Изучить влияние блокады токов, активируемых при гиперполяризации селективным блокатором ZD 7288 на силу сокращений изолированного миокарда у крыс 1-но, 3-х, 6-ти, 8-ми и 20-ти недельного возраста.
Научная новизна
Впервые выявлены возрастные особенности влияния блокады токов, активируемых при гиперполяризации на сократительную активность миокарда предсердий и желудочков крыс. Показано, что блокада If вызывает увеличение силы сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 1-но, 6-ти, 8-ми и 20-ти недельного возраста. Блокада токов, активируемых при гиперполяризации вызывает уменьшение силы сокращения миокарда предсердий и желудочков 3-х недельных животных. Впервые установлено отсутствие отрицательного инотропного эффекта карбахолина на сократимость миокарда предсердий новорожденных крысят. Впервые выявлено наличие собственного действия атропина в высоких концентрациях на сократительную активность миокарда предсердий и желудочков крыс на важнейших этапах постнатального онтогенеза. Приоритетными являются данные о том, что отрицательный инотропный эффект карбахолина не снимается селективной блокадой М1, М2 и М3 холинорецепторов.
Научно-практическая значимость
Полученные результаты расширяют представления о роли парасимпатического отдела вегетативной нервной системы в регуляции инотропии сердца крыс на разных этапах постнатального онтогенеза. Результаты экспериментов свидетельствуют о существенном значении токов, активируемых при гиперполяризации в регуляции сократительной активности миокарда предсердий и желудочков крыс. Результаты экспериментов с блокадой If на 3-х недельных животных свидетельствуют о наличии особенностей механизмов регуляции сократительной активности сердца на данном этапе постнатального онтогенеза. Полученные данные необходимо использовать для правильной трактовки результатов фармакологических и физиологических исследований на сердечно-сосудистой системе крыс в зависимости от их возраста.
Полученные нами результаты представляют безусловный интерес для фармакологов, изучающих влияние различных мускариновых холиноблокаторов на сердечную деятельность с использованием крыс в качестве экспериментальных животных. Материал исследований представляет интерес для специалистов по возрастной и нормальной физиологии, фармакологии и кардиологии.
Основные положения, выносимые на защиту
1.Селективная и неселективная блокада М-ХР не предотвращает уменьшение сократительной активности миокарда крыс под влиянием карбахолина.
2.Блокада If оказывает разнонаправленное влияние на инотропию сердца крыс, ингибирует – у 3-х недельных животных и увеличивает силу сокращений во всех остальных возрастных группах.
Апробация работы
Материалы диссертации представлены на итоговых научных конференциях молодых ученых и преподавателей Татарского государственного гуманитарно-педагогического университета (); V всероссийской конференции с международным участием “Механизмы функционирования висцеральных систем”, Санкт-Петербург, 2007; четвёртой всероссийской школе-конференции по физиологии кровообращения, Москва, 2008; IХ всероссийской конференции «Физиологические механизмы адаптации растущего организма», посвященной юбилею проф. , Казань-Яльчик, 2008; всероссийской научно-практической конференции «Инновационные подходы к естественнонаучным исследованиям и образованию», посвященной юбилею ЕГФ, Казань, 2009; международной конференции, посвященной 65-юбилею института возрастной физиологии, Москва, 2009; VII всероссийской конференции с международным участием «Механизмы функционирования висцеральных систем», посвященной 160-летию со дня рождения , Санкт-Петербург, 2009.
Публикации
Автором опубликовано 25 печатных научных работ, в том числе 1 статья в рецензируемом журнале (из списка ВАК).
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 172 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора научной литературы, описания методов исследования, результатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 301 наименование, в том числе 81 отечественных и 220 зарубежных литературных источника. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 17 рисунками.
Список используемых сокращений
Ах – ацетилхолин, g – грамм, n – количество животных, нед. – неделя, М-ХР – М-холинорецепторы, М1-ХР –М1–холинорецепторы, М2–ХР -М2– холинорецепторы, М3-ХР – М3-холинорецепторы.
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Эксперименты проводились на 342 белых беспородных крысах в возрасте 1-й, 3-х, 6-ти, 8-ми и 20-ти недель. В качестве наркоза использовали 25% раствор уретана, в дозе 1000 мг/кг массы животного. Сократительную активность миокарда в эксперименте in vitro изучали на полосках миокарда из правого предсердия и правого желудочка длиной 2-3 мм и диаметром 0,8-1,0 мм на установке Power Lab (AD Instruments, Австралия). Препарат помещали вертикально в резервуар V = 20 мл, оксигенированный карбогеном (97% O2 и 3% CO2) рабочий раствор при комнатной температуре, в состав которого входили: NaСl - 8 гр; KCl - 0,3гр; CaCl2 - 0,38 гр; MgSO4 - 0,125 гр; NaHPO4 - 0,04 гр; Глюкоза - 2 г; Trizma base - 0.25 г/л ( Sigma). Препарат стимулировался электрическим сигналом через 2 серебряных электрода (с помощью стимулятора ЭСЛ – 2 (Россия) с частотой 6 и 10 стимулов в минуту. По окончанию проработки 5 минут регистрировались исходные параметры сокращения, затем 21 минуту с добавлением в рабочий раствор специфических блокаторов: агонист холинорецепторов карбахолин, неселективный блокатор М-ХР атропин; селективные блокаторы М1-ХР пирензипин; М2-ХР галламин; М3-ХР 4-DAMP; If-каналов ZD7288. Рассчитывали реакцию силы сокращения в ответ на действие фармакологических веществ в процентах от исходного. Статистическая обработка проводилась с применением пакета программ Statgraphics, определение достоверности различий результатов исследований по критерию Стьюдента и Вулькоксона осуществлялось в редакторе Microsoft Excel.
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Дозозависимое действие карбахолина на силу сокращения миокарда крыс в постнатальном онтогенезе.
Достоверные изменения сократимости миокарда предсердий и желудочков крыс 20-ти недельного возраста наблюдались лишь при действии карбахолина в концентрации 10-5 М. Сила сокращения миокарда предсердий уменьшалась с 0,280757±0,069024 g до 0,218338±0,053804 g (р<0,05), миокарда желудочков с 0,276514±0,058016g до 0,195407±0,048672 g (р<0,001) (табл. 1).
У животных 8-ми недельного возраста реакция сократимости полосок миокарда предсердий и желудочков зависела от концентрации. Карбахолин в концентрациях 10-6 М и 10-9 М не вызывал достоверных изменений сократимости миокарда предсердий. Карбахолин в концентрации 10-5 М уменьшал силу сокращений миокарда предсердий с 0,233642±0,112475 g до 0,161583±0,085385 g (р<0,05) (табл. 1), в концентрации 10-8 М с 1,055127±0,164174 g до 1,018986±0,163328 g (р<0,01). Карбахолин в концентрации 10-7 М, напротив, увеличивал силу сокращения изолированных полосок миокарда правого предсердия с 1,09567±0,174225 g до 1,130292±0,180159 g (р<0,05).
Сила сокращения изолированных полосок миокарда правого желудочка уменьшалась при введении карбахолина в концентрации 10-5 М с 0,122236±0,036964 g до 0,076398±0,026005g (р<0,01). Карбахолин в концентрации 10-9 М достоверно увеличивал силу сокращения изолированных полосок миокарда желудочков с 0,220650±0,03779 g до 0,241263±0,043179 g (р <0,05).
Сила сокращения полосок миокарда желудочков крыс 6-ти недельного возраста изменялась при введении карбахолина в концентрации 10-5 М и 10-8 М. Карбахолин в концентрации 10-5 М уменьшал силу сокращения миокарда желудочков с 0,154928±0,024818 g до 0,103097±0,016064 g (р<0,001), в концентрации 10-8 М с 0,375943±0,002084 g до 0,367106±0,000807 g (р<0,01). Сила сокращений миокарда правого предсердия уменьшалась при действии карбахолина в концентрации 10-5 М с 0,23992±0,072524 g до 0,17086± 0,066585 g (р<0,001) (табл. 1).
Сила сокращения миокарда предсердий животных 3-х недельного возраста уменьшалась при введении карбахолина в концентрации 10-5 М с 0,184734±0,05854 g до 0,121994± 0,041111 g (р<0,01), в концентрации 10-6 М с 0,154557±0,047939 g до 0,148159±0,046955 g (р<0,01). Достоверное уменьшение сократимости миокарда желудочков наблюдалось при введении карабахолина в концентрации 10-5 М с 0,121646±0,024323 g до 0,07615± 0,016482 g (р<0,01) (табл. 1).
У крыс 1-но недельного возраста не наблюдалось изменение сократимости миокарда предсердий при введении всех изученных концентраций карбахолина. Сила сокращения миокарда желудочков уменьшалась с 0,126922±0,038668 g до 0,111338±0,034314 g (р <0,01) (табл.1).
Таблица 1
Влияние карбахолина (10-5 М) на силу сокращения (g) полосок миокарда предсердий крыс
Возраст (нед) | Исходная | 1 мин | 7 мин | 14 мин | 21 мин |
1 (n=10) | 0,067249±0,024253 | 0,067248±0,02445 | 0,068674±0,025204 | 0,067581±0,024835 | 0,065602±0,024059 |
3 (n=10) | 0,184734±0,05854 | 0,174185±0,05641 | 0,15011±0,052016 ** | 0,139117±0,049869 ** | 0,121994±0,041111 ** |
6 (n=10) | 0,23992±0,072524 | 0,233968±0,076819 | 0,194845±0,070196 *** | 0,181727±0,069004 ** | 0,17086±0,066585 *** |
8 (n=10) | 0,233642±0,112475 | 0,220874±0,108752 * | 0,193678±0,096452 * | 0,176226±0,089392 * | 0,161583±0,085385 * |
20 (n=10) | 0,280757±0,069024 | 0,264817±0,070905 | 0,226664±0,060598 ** | 0,222947±0,055694 ** | 0,218338±0,053804 * |
Влияние карбахолина (10-5 М) на силу сокращения (g) полосок миокарда желудочков крыс
Возраст (неделя) | Исходная | 1 мин | 7 мин | 14 мин | 21 мин |
1 (n=10) | 0,126922±0,038668 | 0,124476±0,037722 | 0,118778±0,035925 ** | 0,114709±0,035047 ** | 0,111338±0,034314 ** |
3 (n=10) | 0,121646±0,024323 | 0,110932±0,022875 | 0,096634±0,02109 ** | 0,084288±0,018526 ** | 0,07615±0,016482 ** |
6 (n=10) | 0,154928±0,024818 | 0,150114±0,025178 * | 0,120197±0,020471 *** | 0,10996±0,018651 *** | 0,103097±0,016064 *** |
8 (n=10) | 0,122236±0,036964 | 0,118003±0,03512 | 0,107229±0,032826 | 0,090343±0,029463 ** | 0,076398±0,026005 ** |
20 (n=10) | 0,276514±0,058016 | 0,269531±0,055655 | 0,222493±0,048771 *** | 0,202729±0,047518 *** | 0,195407±0,048672 *** |
Примечание: Р≤0,05(*), Р≤0,01(**), Р≤0,001(***).
Влияние введения карбахолина на фоне атропина на сократимость миокарда крыс в постнатальном онтогенезе.
Блокатор М-ХР атропин в концентрации 10-6 М не изменял силу сокращения изолированных полосок миокарда предсердий и желудочков 20-ти недельных крыс. На фоне этого блокатора М-ХР карбахолин (10-5 М) уменьшал силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,591281±0,098292 g до 0,481265±0,068327 g (р<0,01), миокарда желудочков с 0,670468±0,185259 g до 0,607654±0,184281 g.
Атропин в концентрации 10-5 М не влиял на силу сокращения изолированных полосок миокарда предсердий и желудочков взрослых крыс. Добавленный после него карбахолин снижал силу сокращения миокарда предсердий с 0,15488±0,073533 g до 0,136723±0,064238 g (р<0,05), миокарда желудочков с 0,352542±0,188225 g до 0,267756±0,151213 g (р<0,05).
Блокатор М-ХР атропин в концентрации 10-4 М не изменял значение силы сокращения изолированных полосок миокарда предсердий и желудочков крыс 20-ти недельного возраста. Карбахолин на этом фоне снижал силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,387257±0,056479 g до 0,339671±0,046588 g (р<0,01), миокарда желудочков с 0,474923±0,135582 g до 0,344748±0,096749 g (р<0,01).
У животных 20-ти недель блокатор М-ХР атропин в концентрации 10-3 М увеличивал значение силы сокращения изолированных полосок миокарда предсердий с 0,300026±0,138659 g до 0,42685± 0,212457 g (р<0,01), миокарда желудочков с 0,230376±0,124368 g до 0,372058±0,19097 g (р<0,01). На фоне блокады атропином этой концентрации карбахолин уменьшил силу сокращения полосок миокарда предсердий до 0,189969±0,108107 g (р<0,05), полосок миокарда желудочков до 0,190969±0,105045 g (р<0,05).
Введение в рабочий раствор блокатора М-ХР атропина в концентрации 10-6 М не изменяло значения силы сокращения изолированных полосок миокарда предсердий и желудочков крыс 8-ми недельного возраста. На фоне блокады атропином карбахолин уменьшил силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,494317±0,176441 g до 0,255467±0,128533 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,491617±0,175386 g до 0,241783±0,128193 g (p<0,05).
Атропин в концентрации 10-5 М не влиял на значение силы сокращения полосок миокарда предсердий и желудочков 8-ми недельных крыс. На фоне блокады М-ХР карбахолин уменьшил силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,310142±0,18029 g до 0,221095±0,141474 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,175932±0,021657 g до 0,142295±0,027917 g (р<0,05).
Атропин в концентрации 10-4 М не изменял силы сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 8-ми недельного возраста. На фоне блокады атропином карбахолин в концентрации 10-5 М значительно уменьшал силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,54656±0,2294 g до 0,352217±0,182927 g (p<0,01), миокарда желудочков с 0,257073±0,116276 g до 0,157544±0,084377 g (р<0,05).
При введении в рабочий раствор блокатора М-ХР атропина в концентрации 10-3 М сила сокращения изолированных полосок миокарда предсердий животных 8-ми недель увеличивалась с 0,217604±0,099303 g до 0,365983±0,163563 g (p<0,01), миокарда желудочков с 0,433804±0,19508 g до 0,679248±0,304425 g (p<0,01). На фоне блокады атропином карбахолин уменьшал силу сокращения полосок миокарда предсердий до 0,167762±0,100099 g (p<0,01), миокарда желудочков до 0,337929±0,259492 g (p<0,01).
Атропин в концентрации 10-6 М не изменял амплитуды сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 6-ти недельного возраста. На фоне блокады атропином карбахолин уменьшал силу сокращения изолированных полосок миокарда предсердий с 0,60371±0,201075 g до 0,487725±0,159423 g (p<0,01), миокарда желудочков с 0,778942±0,176257 g до 0,675222±0,156759 g (p<0,01).
Введение в рабочий раствор блокатора М-ХР атропина в концентрации 10-5 М не влияло на значение силы сокращения полосок миокарда предсердий и желудочков 6-ти недельных крыс. На фоне блокады М-ХР карбахолин уменьшал силу сокращения изолированных полосок миокарда предсердий с 0,486635±0,259879 g до 0,398456±0,23118 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,27233±0,091576 g до 0,21285± 0,081631 g (р<0,05).
Атропин в концентрации 10-4 М достоверно увеличивал силу сокращения миокарда предсердий с 0,642692±0,138308 g до 0,689685±0,153139 g (p<0,05) и не изменял силу сокращения полосок миокарда желудочков 6-ти недельных крыс. На фоне блокады атропином карбахолин в концентрации 10-5 М снижал амплитуду сокращений миокарда предсердий с 0,689685±0,153139 g до 0,574051±0,138997 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,648728±0,179455 g до 0,533931±0,156084 g (р<0,05).
У животных 6-ти недельного возраста блокатор М-ХР атропин в концентрации 10-3 М увеличивал значение силы сокращения изолированных полосок миокарда предсердий с 0,515242±0,128222 g до 0,844583±0,208516 g (p<0,01), миокарда желудочков с 0,616121±0,141313 g до 0,982457±0,187295 g (p<0,01). На фоне блокады атропином карбахолин уменьшал силу сокращения полосок миокарда предсердий до 0,507186±0,109078 g (p<0,05), миокарда желудочков до 0,626772±0,132036 g (p<0,01).
У крыс 3-х недельного возраста блокатор М-ХР атропин в концентрации 10-6 М не изменял значение силы сокращения изолированных полосок миокарда предсердий и достоверно уменьшал силу сокращений миокарда желудочков с 0,151935±0,029743 g до 0,143103±0,027474 g (p<0,05). На фоне блокады атропином карбахолин уменьшал силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,272173±0,085161 g до 0,104679±0,039993 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,143103±0,027474 g до 0,061659±0,008303 g (p<0,01).
Введение в рабочий раствор блокатора М-ХР атропина в концентрации 10-5 М не вызывал достоверных изменений значений силы сокращения полосок миокарда предсердий и желудочков 3-х недельных крыс. Введение карбахолина на фоне атропина уменьшало силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,122382±0,039096 g до 0,056489±0,0020998 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,078465±0,021188 g до 0,044876±0,014772 g (р<0,01).
У 3-х недельных крыс атропин в концентрации 10-4 М достоверно увеличивал силу сокращения миокарда предсердий с 0,242413±0,068894 g до 0,276445±0,077491 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,308774±0,11549 g до 0,323469±0,107597 g (p<0,05). На фоне блокады атропином карбахолин в концентрации 10-5 М уменьшал силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,276445±0,077491 g до 0,140452±0,02761 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,323469±0,107597 g до 0,278864±0,112875 g (р<0,01).
У животных 3-х недель блокатор М-ХР атропин в концентрации 10-3 М увеличивал значение силы сокращения изолированных полосок миокарда предсердий с 0,25635±0,051111 g до 0,423548±0,065719 g (p<0,01), миокарда желудочков с 0,110658±0,021066 g до 0,206237±0,015529 g (p<0,01). На фоне блокады атропином карбахолин уменьшал силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,423548±0,065719 g до 0,186805±0,025664 g (p<0,01), миокарда желудочков с 0,206237±0,015529 g до 0,078082±0,012405 g (p<0,01).
Атропин в концентрации 10-6 М не изменял силу сокращения миокарда предсердий и желудочков у 1-но недельных крыс. На фоне блокады атропином карбахолин не изменял силу сокращений полосок миокарда предсердий и уменьшал силу сокращения полосок миокарда желудочков с 0,217233±0,01521 g до 0,200334±0,0195 g(p<0,01).
У 1-но недельных крыс атропин в концентрации 10-5 М не оказывал влияния на миокард предсердий и достоверно увеличивал силу сокращения полосок миокарда желудочков с 0,168393±0,030074 g до 0,174763±0,031638 g (p<0,05). На фоне блокады атропином карбахолин уменьшал силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,130388±0,04082 g до 0,120024± 0,037049 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,162148±0,020776 g до 0,152626g±0,030287 g (р<0,05).
Неселективный блокатор М-ХР атропин в концентрации 10-4 М не вызывал достоверных изменений на силу сокращения миокарда предсердий и желудочков у 1-но недельных крыс. На фоне блокады атропином карбахолин в концентрации 10-5 М не вызывал достоверных изменений значений силы сокращения миокарда предсердий и снижал силу сокращения полосок миокарда желудочков с 0,504141±0,075982 g до 0,486452±0,073347 g (р<0,05).
У новорожденных крысят введение в рабочий раствор блокатора М-ХР атропина в концентрации 10-3 М приводило к увеличению силы сокращения изолированных полосок миокарда предсердий с 0,21532±0,058788g до 0,271368±0,02818 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,072398±0,006176 g до 0,173503±0,008643 g (p<0,01). Карбахолин на фоне действия атропина уменьшал силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,271368±0,02818g до 0,189895±0,050433 g (p<0,05), миокарда желудочков с 0,173503±0,008643 g до 0,121218±0,027742 g (p<0,05).
Влияние введения карбахолина на фоне блокады М1-ХР на сократимость миокарда крыс в постнатальном онтогенезе.
Добавление в перфузируемый раствор блокатора М1-ХР пирензипина в концентрации 10-6 М не приводило к достоверным изменениям силы сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 20-ти недельного возраста. На фоне блокады М1-ХР агонист ХР карбахолин в концентрации 10-5 М снижал силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,34643±0,170603 g до 0,246123±0,125866 g (р<0,05), миокарда желудочков с 0,24554±0,044732 g до 0,156497±0,033526 g (р<0,01).
Пирензипин в концентрации 10-6 М не приводил к достоверным изменениям силы сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 8-ми недельного возраста. Введение в раствор карбахолина на фоне предварительного добавления пирензипина снижало силу сокращения миокарда предсердий с 0,419456±0,191012 g до 0,2473±0,126801 g (р<0,05), миокарда желудочков с 0,120971±0,045191 до 0,071114±0,024152 g (р<0,05).
Введение в рабочий раствор пирензипина в концентрации 10-6 М не меняло значений силы сокращения миокарда предсердий крыс 6-ти недельного возраста и достоверно снижало силу сокращения изолированных полосок миокарда желудочков с 0,107101±0,027821 g до 0,102697±0,026304 g (р<0,05). Введение в раствор карбахолина на фоне предварительного добавления пирензипина уменьшало силу сокращения миокарда предсердий с 0,26106±0,05877 g до 0,15079±0,041515 g (р<0,05), миокарда желудочков с 0,102697±0,026304 g до 0,068639±0,018897 g (р<0,01).
Пирензипин в концентрации 10-6 М не приводил к достоверным изменениям силы сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 3-х недельного возраста. При введении в раствор карбахолина на фоне предварительного добавления пирензипина сила сокращения миокарда предсердий уменьшилась с 0,131824±0,049441 g до 0,082548±0,029064 g (р<0,05), миокарда желудочков с 0,169337±0,080433 g до 0,100427±0,052212 g (р<0,001).
После добавления в рабочий раствор пирензипина в концентрации 10-6 М сила сокращения полосок миокарда предсердий и желудочков крыс 1-но недельного возраста не менялась. Введение в раствор карбахолина на фоне предварительного добавления пирензипина приводило к снижению силы сокращения миокарда предсердий с 0,082281±0,023864 g до 0,074203±0,025631 g (р<0,01), миокарда желудочков с 0,128296±0,024185 g до 0,085966±0,01851g (р<0,01).
Влияние введения карбахолина на фоне блокады М2-ХР на сократимость миокарда крыс в постнатальном онтогенезе.
Добавление в оксигенированный карбогеном рабочий раствор блокатора М2-ХР галламина в концентрации 10-6 М не приводил к изменению силы сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 20-ти недельного возраста. Введение в раствор карбахолина на фоне предварительного добавления галламина уменьшало силу сокращения полосок миокарда предсердий с 0,14076±0,057513 g до 0,113273±0,052832 g (р<0,05), миокарда желудочков с 0,267799±0,05563 g до 0,169296±0,043733 g (р<0,01).
У крыс 8-ми недельного возраста галламин в концентрации 10-6 М не изменял силы сокращения миокарда предсердий и приводил к увеличению силы сокращения миокарда желудочков с 0,414126±0,180917 g до 0,442465±0,18956 g (р<0,05). Карбахолин на фоне предварительного добавления галламина уменьшал силу сокращения миокарда предсердий до 0,071682±0,027815 g (р<0,05), миокарда желудочков до 0,242332±0,115753 g (р<0,05).
Галламин приводил достоверному уменьшению сократимости миокарда предсердий с 0,24355±0,0496737 g до 0,221342±0,043786 g (p<0,05) и не вызывал изменения силы сокращения миокарда желудочков крыс 6-ти недельного возраста. Введение в раствор карбахолина на фоне предварительного добавления галламина вызывало уменьшение силы сокращения миокарда предсердий с 0,221342±0,043786 g до 0,128431±0,031144 g (р<0,05), миокарда желудочков с 0,114382±0,025353 g до 0,079718±0,022177 g (р<0,01).
У 3-х недельных крыс галламин в концентрации 10-6 М не изменял силы сокращения миокарда предсердий и приводил к увеличению силы сокращения миокарда желудочков с 0,158838±0,088684 g до 0,16223±0,08853 g (p<0,05). Карбахолин на фоне предварительного добавления галламина уменьшал силу сокращения миокарда предсердий с 0,116097±0,048024 g до 0,060277±0,020591 g (р<0,05), миокарда желудочков с 0,16223±0,08853 g до 0,098739±0,058684 g (р<0,01).
Добавление в оксигенированный карбогеном рабочий раствор блокатора М2-ХР галламина в концентрации 10-6 М не приводил к изменению силы сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 1-но недельного возраста. Карбахолин на фоне предварительного добавления галламина уменьшал силу сокращения миокарда предсердий с 0,067373±0,0184 g до 0,062665±0,019053 g (р<0,01), миокарда желудочков с 0,132601±0,032545 g до 0,100999±0,028023 g (р<0,01).
Влияние введения карбахолина на фоне блокады М3-ХР на сократимость миокарда крыс в постнатальном онтогенезе.
Добавление в перфузируемый раствор селективного блокатора 4-DAMP (10-6 М) не оказывало влияния на силу сокращения миокарда предсердий и желудочков ни в одной возрастной группе животных. Последующее, через 9 минут, добавление в раствор карбахолина (10-5 М) приводило к уменьшению силы сокращений полосок миокарда предсердий и желудочков животных всех возрастов.
Исследование влияния блокады If на силу сокращения миокарда крыс в постнатальном онтогенезе.
Исследование влияния блокады If на силу сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 20-ти недельного возраста.
Исходная амплитуда сокращения изолированного миокарда правого предсердия до блокады If имела значение 0,15538±0,06318 g. После введения блокатора ZD7288 с дозировкой 0,2 mмоль/л наблюдалось увеличение силы сокращения в течение 21-й минуты. В ходе 1-й минуты после блокады If, сила сокращения возросла до 0,16087±0,06695 g (р£0,05). В ходе 7-й минуты эксперимента сила сокращения полосок миокарда увеличилась до 0,18922±0,08412 g (р£0,05). В течение 14-й минуты сила сокращения изолированных полосок миокарда увеличилась до 0,21409±0,09734 g (р£0,01). К 21-й минуте эксперимента регистрировалось последующее увеличение силы сокращения миокарда предсердий до 0,21872±0,08914 g (р£0,01) (рис. 1).
Исходная сила сокращения изолированного миокарда желудочков до введения блокатора If имела значение 0,263913±0,07362g. После блокады If специфическим блокатором ZD7288 с дозировкой 0,2 mмоль/л наблюдалось значительное увеличение силы сокращения в течение 21-й минуты. В ходе 1-й минуты после блокады токов, активируемых при гиперполяризации, сила сокращения увеличилась до 0,26634±0,07354 g (р£0,05). В течение 7-й минуты опыта сила сокращения возросла до 0,27821±0,07524 g (р£0,01). К 14-й минуте сила сокращения полосок миокарда желудочков повысилась до 0,28885±0,07393 g (р£0,01). В течение заключительной 21-й минуты исследования наблюдался рост силы сокращения до 0,30167±0,07598 g (р£0,01) (рис. 2).
Таким образом, на основании проведенных исследований с блокадой токов, активируемых при гиперполяризации с концентрацией 0,2 mмоль/л можно сделать вывод, что регистрировалось увеличение силы сокращения изолированного миокарда правого предсердия и правого желудочка 20-ти недельных крыс.
Исследование влияния блокады If на силу сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 8-ми недельного возраста.
До момента введения специфического блокатора If ZD7288 с концентрацией 0,2 mмоль/л сила сокращения правого предсердия имела значение 0,2328±0,05197 g. С 1-й минуты по 7-ю включительно наблюдалось постепенное повышение силы сокращения. На 1-й минуте увеличение силы сокращения составило 0,23693±0,05314 g. В ходе 7-й минуты работы препарата регистрировалось дальнейшее увеличение силы сокращения до 0,25753±0,05788 g. К 14-й минуте эксперимента сила сокращения изолированных полосок миокарда возросла до 0,30145±0,06636 g. Сила сокращения на 21-ой минуте эксперимента имела значения 0,2988±0,0698 g (рис. 1).
Исходная сила сокращения изолированного миокарда правого желудочка до введения блокатора If имела значение 0,10738±0,0092 g. Н 1-й минуте после введения специфического блокатора ZD 7288 с дозировкой 0,2 mмоль/л для блокады Н-токов, активируемых при гиперполяризации, наблюдалось повышение силы сокращения до 0,10986±0,00969 g (р£0,05). На 7-й минуте эксперимента сила сокращения изолированных полосок миокарда возросла до 0,11844±0,01161 g (р£0,05). На 14-й минуте эксперимента наблюдался эффект увеличения силы сокращения миокарда желудочков до 0,12529±0,01196 g (р£0,05). Максимальное увеличение силы сокращений наблюдалось на 21-й минуте проведения эксперимента, и равнялось 0,13272±0,0129 g (р£0,05) (рис. 2).
Таким образом, в ходе проведения эксперимента на введение специфического блокатора ZD7288 с концентрацией 0,2 mмоль/л регистрировалось повышение силы сокращения изолированного миокарда предсердий и желудочков 8-ми недельных крыс.
Исследование влияния блокады If на силу сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 6-ти недельного возраста.
Исходные значения изолированных полосок миокарда предсердий до введения специфического блокатора If ZD7288 с концентрацией 0,2 mмоль/л сила сокращения имела значение 0,151803±0,034102 g. На 1-й минуте наблюдения за ходом эксперимента значения силы сокращения полосок миокарда равнялись 0,157949±0,035443 g. К 7-ой минуте значения силы сокращения повысились до 0,164867±0,036319 g. В ходе 14-й минуты эксперимента сила сокращения изолированных полосок миокарда возросла до 0,169901±0,034788 g. На 21-й минуте эксперимента сила сокращения полосок имела значения 0,169924±0,034347 g (рис. 1).
Исходная сила сокращения изолированного миокарда правого желудочка до введения блокатора If имела значение 0,068751±0,026909 g. На 1-й минуте после введения специфического блокатора ZD 7288 с дозировкой 0,2 mмоль/л наблюдалось увеличение силы сокращения до 0,071424±0,02799 g. На 7-й минуте эксперимента сила сокращения изолированных полосок миокарда возросла до 0,0800461±0,031674 g (р£0,05). На 14-й минуте эксперимента наблюдался эффект увеличения силы сокращения миокарда желудочков до 0,08386±0,03275 g (р£0,05). На заключительной 21-й минуте проведения эксперимента сила сокращения полосок миокарда желудочков равнялась 0,085518±0,032945 g (р£0,05).
Таким образом, в ходе проведения эксперимента на введение специфического блокатора ZD7288 с концентрацией 0,2 mмоль/л регистрировалось повышение силы сокращения изолированного миокарда правого предсердия и правого желудочка 6-и недельных крыс (рис.2).
Исследование влияния блокады If на силу сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 3-х недельного возраста.
Исходная сила сокращения изолированного миокарда правого предсердия имела значение 0,25584±0,13657 g. После введения блокатора ZD7288 дозировкой 0,2 mмоль/л наблюдалось постепенное снижение силы сокращения в течение 21-й минуты. В ходе 1-й минуты блокады If сила сокращения изолированных полосок миокарда понизилась до 0,25468±0,13539 g (р£0,01). На 7-й минуте сила сокращения, выраженная в граммах, имела значение 0,24898±0,13295 g (р£0,05). На 14-й минуте эксперимента сила сокращения постепенно снижалась до 0,2397±0,13019 g (р£0,05). В течение 21-й минуты эксперимента наблюдалось понижение силы сокращения 0,22415±0,1298 g (р£0,01) (рис.1).
Исходная величина силы сокращения полосок миокарда имела значение 0,08809±0,01848 g. При введении специфического блокатора If ZD7288 с концентрацией 0,2 mмоль/л на 1-й минуте опыта наблюдалось снижение силы сокращений до 0,08735±0,01831 g. Подобный эффект уменьшения силы сокращения регистрировался на последующих 7-и минутах работы препарата и равнялся 0,08547±0,01733 g. К 14-й минуте наблюдаемое понижение силы сокращения миокарда было равно 0,08025±0,01558 g (р£0,05). В течение 21-й минуты сила сокращения понизилась до 0,07211±0,01363 g. (р£0,01).
Таким образом, в ходе проведения эксперимента на введение специфического блокатора ZD7288 с концентрацией 0,2 mмоль/л регистрировалось понижение силы сокращения изолированного миокарда предсердий и желудочков 3-х недельных крысят (рис. 2).
Исследование влияния блокады If на силу сокращения миокарда предсердий и желудочков крыс 1-но недельного возраста.
При регистрации исходных параметров сокращения изолированного миокарда правого предсердия 1-но недельных крыс, до введения блокатора ZD7288 дозировкой 0,2 mмоль/л, было выявлено следующее значение силы сокращения 0,05705±0,02559 g. На 1-й минуте сила сокращения полосок миокарда повысилась до 0,05879±0,02595 g (р£0,01). На 7-й минуте увеличение эффекта возросло до 0,06825±0,02648 g (р£0,05). Повышение силы сокращения изолированных полосок миокарда наблюдалось на 14-й минуте 0,07396±0,02726 g (р£0,01). К 20-й минуте сила сокращения полосок миокарда была равна 0,08467±0,03032 g (р£0,01) (рис. 1).
До момента введения специфического блокатора Н-каналов ZD7288 с концентрацией 0,2 mмоль/л, исходная сократимость изолированного миокарда правого желудочка имела значение 0,03522±0,00716 g. На 1-й минуте наблюдалось постепенное повышение силы сокращения до 0,03513±0,007 g. На 7-й минуте сила сокращения продолжала повышаться и приобрела значения 0,03616±0,00721 g (р£0,05). В течение 14-й минуты наблюдалось повышение силы сокращения изолированного миокарда правого желудочка до 0,03928±0,00753 g (р£0,01). К последней 21-й минуте сила сокращений полосок миокарда имела значение 0,03953±0,00752 g (р£0,01) (рис. 2).
Таким образом, в ходе проведения эксперимента на введение специфического блокатора ZD7288 с концентрацией 0,2 mмоль/л регистрировалось повышение силы сокращения изолированного миокарда правого предсердия и правого желудочка 7-и дневных крыс.
Рисунок 1. Реакция силы сокращения предсердий при блокаде неселективных ионных токов.
Примечание: * - Р≤0,05, ** - Р≤0,01.
 |
Рисунок 2. Реакция силы сокращения желудочков при блокаде неселективных ионных токов.
Примечание: * - Р≤0,05, ** - Р≤0,01.
ВЫВОДЫ:
1. Карбахолин оказывает отрицательный инотропный эффект на миокард крыс лишь в концентрации 10-5 моль, исключением является миокард предсердия новорожденных крысят.
2. Карбахолин в наибольшей степени ингибирует инотропию миокарда 8-ми недельных животных, а в наименьшей степени у новорожденных крысят
3. Карбахолин в концентрации 10-9 моль оказывает положительный инотропный эффект на миокард желудочков 8-ми недельных животных.
4. Атропин оказывает положительный инотропный эффект во всех возрастных группах в концентрации 10-3 моль. У 3-х недельных крысят атропин оказывает положительный инотропный эффект на миокард желудочков в концентрациях 10-4 моль, 10-6 моль.
5. Атропин не предотвращает отрицательный инотропный эффект карбахолина (10-5 моль) во всех возрастных группах. Атропин (10-3 моль) индуцирует появление отрицательной инотропии миокарда предсердий новорожденных животных на карбахолин (10-5 моль).
6. Пирензепин (10-6 моль) оказывает положительный инотропный эффект на миокард желудочков только у 6-ти недельных животных.
7. Пирензепин (10-6 моль) не препятствует снижению силы сокращений миокарда крыс в ответ на введение карбахолина (10-5 моль).
8. Галламин (10-6 моль) оказывает положительный инотропный эффект на миокард желудочков 3-х и 8-ми недельных животных и миокард предсердий 6-ти недельных животных.
9. Галламин (10-6 моль) не предотвращает отрицательный инотропный эффект карбахолина (10-5 моль) во всех возрастных группах животных.
10. 4-DAMP (10-6 моль) не оказывает влияния на инотропию миокарда крыс всех возрастных групп.
11. 4-DAMP (10-6 моль) не предотвращает развитие отрицательного инотропного эффекта карбахолина (10-5 моль) во всех возрастных группах животных.
12. Блокада If оказывает положительный инотропный эффект на миокард предсердий и желудочков 1-но, 6-ти, 8-ми и 20-ти недельных животных.
13. Положительный инотропный эффект блокады If на миокард предсердий имеет выраженную возрастную зависимость и связан с формированием симпатической иннервации сердца.
14. Блокада If оказывает отрицательный инотропный эффект на миокард предсердий и желудочков животных 3-х недельного возраста.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. , , Зефиров особенности сократительной активности миокарда крыс при блокаде токов, активируемых гиперполяризацией. Бюлл. Эксп. и биол. Мед., 2007, №9, с. 244-248
2. , , Зиятдинова действия блокады If на сердце крыс в раннем постнатальном онтогенезе. V Всероссийская конференция с международным участием “Механизмы функционирования висцеральных систем”, С-Петербург, 2007, с.43
3. Салман М, , Зефиров особенности симпатопарасимпатических взаимодействий в сердце крыс. Четвёртая всероссийская школа-конференция по физиологии кровообращения, Москва, 2008, с. 86
4. , , Зефиров эффект блокады токов активируемых гиперполяризацией на хронотропию и инотропию миокарда крыс. Четвёртая всероссийская школа-конференция по физиологии кровообращения, Москва, 2008, с. 33
5. , , Х., Зефиров регуляция сердца новорожденных крыс. Нейронауки: теоретические и клинические аспекты, 2008, № 1, с.26-27
6. , Х., , Зефиров блокады (if) хронотропную и инотропную функции сердца Нейронауки: теоретические и клинические аспекты, 2008, № 1, с.26
7. , , Зефиров α- и β-адренорецепторов в регуляции сердечной деятельности новорожденных крысят. VI Сибирский физиологический съезд, Барнаул, 2008, с. 14
8. , , Зефиров сократимости миокарда новорожденных крысят при блокаде if препаратом zd 7288. VI Сибирский физиологический съезд, Барнаул, 2008, с. 43
9. , , Х., Зефиров токов активируемых гиперполяризацией (if) изменяет силу и частоту сердечных сокращений. Всероссийская конференция с международным участием «Механизмы нервных и нейроэндокринных регуляций», посвященная 90-летию академика , Москва, 2008, с. 63-64
10. , , Х., , Зефиров сердечной деятельности новорожденных крысят имеет свои особенности. Всероссийская конференция с международным участием «Механизмы нервных и нейроэндокринных регуляций», посвященная 90-летию академика. , Москва, 2008, с. 100-101
11. , Х., , Зефиров и факторы модулирующие регуляцию сердечной деятельности крыс. IХ Всероссийская конференция «Физиологические механизмы адаптации растущего организма», посвященная юбилею проф. ., 2008, с. 53-54
12. , , Х., Зефиров if zd7288 изменяет хронотропную и инотропную функции сердца крыс. IХ Всероссийская конференция «Физиологические механизмы адаптации растущего организма», посвященная юбилею проф. ., 2008, с. 56-57
13. , , Х., , Зефиров карбохолина сократимость полосок миокардапредсердий и желудочков крыс. IХ Всероссийская конференция «Физиологические механизмы адаптации растущего организма», посвященная юбилею проф. ., 2008, с. 56-57
14. Х., , Зефиров -парасимпатические регуляторные взаимодействия в сердце крыс. IХ Всероссийская конференция «Физиологические механизмы адаптации растущего организма», посвящзенная юбилею проф. ., 2008, с. 136
15. , , Зефиров влияния блокады if токов на сердечную деятельность в постнатальном онтогенезе. Всероссийская конференция с международным участием «Механизмы нервных и нейроэндокринных регуляций», посвященная 90-летию ак. , Москва, 2008, с. 63-64
16. , , Х., , Зефиров сердечной деятельности новорожденных крысят имеет свои особенности. Всероссийская конференция с международным участием «Механизмы нервных и нейроэндокринных регуляций», посвященная 90-летию ак. , Москва, 2008, с. 100-101
17. , , Сергеева особенности сократительной активности миокарда крыс при блокаде токов, активируемых гиперполяризацией. Вестник ТГГПУ, 2008, № 4 (15), с. 73-76
18. , КузьменкоА., , Зефиров неселективных катионных входящих токов усиливает сократимость миокарда предсердий и желудочков крыс. Всероссийская научно-практическая конференция «Инновационные подходы к естественнонаучным исследованиям и образованию», посвященная юбилею ЕГФ, 2009, с. 15-16
19. , , Зефиров сократительной функции миокарда новорожденных крысят при блокаде if токов. Всероссийская научно-практическая конференция «Инновационные подходы к естественнонаучным исследованиям и образованию», посвященная юбилею ЕГФ, 2009, с. 17-18
20. Сергеева блокады токов активируемых гиперполяризацией на инотропную функцию сердца крыс пубертатного периода развития. Всероссийская научно-практическая конференция «Инновационные подходы к естественнонаучным исследованиям и образованию», посвященная юбилею ЕГФ, 2009, с. 14-15
21. , , Зефиров влияния блокады if токов на сердечную деятельность в постнатальном онтогенезе. Международная конференция, посвященная 65-юбилею института возрастной физиологии, Москва, 2009, с. 61-62
22. , , Зиятдинова эффект блокады if токов на сократимость миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе. Тезисы сборника посвященные юбилею ФФК. Казань, 2009, с. 49
23. , , Зефиров селективных анатагонистоов разных подтипов М-холинорецепторов на сократимость миокарда предсердий и желудочков взрослых крыс. Тезисы сборника посвященные юбилею ФФК, Казань, 2009, С. 152 Сергеева
24. , , Х., Зиятдинова влияния селективной и неселективной блокады М-холинорецепторов на сердечную деятельность крыс раннего постнатального онтогенеза. VII Всероссийская конференция с международным участием “Механизмы функционирования висцеральных систем”, посвященная 160-летию со дня рождения , Санкт-Петербург, 2009, с.170
25. , , . Возрастные особенности влияния блокады токов активируемых гиперполяризацией (If) на хронотропную и инотропную функции сердца крыс. VII Всероссийская конференция с международным участием “Механизмы функционирования висцеральных систем”, посвященная 160-летию со дня рождения Санкт-Петербург, 2009, с.172
