УТВЕРЖДЕНА «УТВЕРЖДАЮ»

Приказом Росздравнадзора

от _________ 2011г. № ______

Руководитель организации-заявителя

________________

«___»______________ 2011 г.

М. П.

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

набора реагентов для определения мочевой кислоты ферментативным методом

Назначение

Область применения – клиническая медицина, клиническая лабораторная диагностика.

Набор реактивов предназначен для определения концентрации мочевой кислоты в биологических жидкостях (плазме, сыворотке крови и моче) ферментативным методом.

Характеристики набора

Принцип метода

Мочевая кислота окисляется кислородом при каталитическом действии фермента уриказы с образованием перекиси водорода и аллантоина. Образующаяся перекись водорода под действием пероксидазы окисляет субстрат с образованием окрашенного продукта, определяемого фотометрически.

Состав набора

1. Буферный раствор, рН 7,8 - 2 флакона по 50 мл

2. Реагент ферментный - 2 флакона на 50 мл разведения каждый.

3. Калибровочный раствор мочевой кислоты 357 мкмоль/л (6 мг/100 мл)

- 1 флакон – 2 мл.

Аналитические и диагностические величины

Линейная область определения до 1200 мкмоль/л.

Набор рассчитан на 100 определений (1 мл ферментного раствора на одно определение).

Меры предосторожности

• Использовать только для диагностики in vitro.

Оборудование и материалы

Для определения содержания мочевой кислоты в биологических жидкостях можно использовать фотоэлектроколориметры, спектрофотометры, автоматические биохимические анализаторы.

Анализируемые образцы

Определение концентрации мочевой кислоты проводят в сыворотке крови, плазме крови (в качестве антикоагулянта можно использовать соли гепарина или ЭДТА) и моче. Мочу перед анализом разводят дистиллированной водой в соотношении 1: 9 и результат умножают на коэффициент разведения (10).

Проведение анализа, регистрация результатов

Приготовление рабочего раствора

За 60 минут до проведения анализа содержимое флакона 2 тщательно растворяют в 50 мл буферного раствора из флакона 1. Раствор стабилен в течение 3 недель при 2 – 8 ˚С (без доступа света). Необходимо плотно закрывать флакон с рабочим раствором непосредственно после использования. Розовая окраска рабочего раствора является нормальной. Флакон 3 содержит готовый к использованию раствор. После вскрытия флакона 3 раствор хранится при 2 – 8 ˚С не менее 6 месяцев.

Методика анализа

Длина волны 500 – 520 нм (490 нм, ФЭК), кювета 0,5 см (1,0 см).

Для проведения анализа отбирают компоненты в количествах, согласно таблице:

Таблица. Соотношение компонентов в реакционной смеси.

Отмерить (мл)

Опытная

проба

Калибровочная

проба

Холостая

проба

Сыворотка, плазма

крови или

разведенная моча

0,025

-

-

Калибровочный

раствор

-

0,025

-

Рабочий реагент

1

1

1

Реакционную смесь перемешивают и инкубируют 10 минут при температуре 37 ˚С. Измеряют оптическую плотность опытной пробы (Апр) и калибровочной пробы (Акл ) против холостой пробы. Стабильность окраски 15 минут.

Расчет

Концентрацию мочевой кислоты в исследуемой жидкости (Спр) в мкмоль/л определяют по формуле:

Спр=Скл∙Апр/Акл,

где - Скл - концентрация калибровочного раствора мочевой кислоты, которой соответствует оптическая плотность Акл.

Нормальные величины:

в сыворотке: - женщины - мкмоль/л;

- мужчины - мкмоль/л;

в моче - 1,5 - 4,5 ммоль/24 часа

Условия хранения и срок годности

Набор реактивов хранить при 2 – 8 ˚С.

Срок годности – 1 год.

Начальник производства __________________

(подпись)

____________________________________________________________________________/________________Должность руководителя ЛПУ, (подпись, печать) (ФИО)

проводившего медицинские

испытания