Липидный состав мозга и эритроцитов крыс с разной стресс-резистентностью при хроническом иммобилизационном стрессе и стресс-лимитирующих воздействиях (стр. 2 )

Значительное увеличение содержания ЛФЛ, сопровождающее уменьшение пула ФХ, в лобных долях животных, подвергшихся воздействию иммобилизационного стресса, по сравнению с контролем, согласуется с литературными данными об активации фосфолипазы А2 и перекисного окисления липидов под влиянием гормонов стресса (, 1993, , 2002).

Таблица 3 - Содержание основных классов фосфолипидов в лобных долях больших полушарий стресс-неустойчивых крыс при длительной повторной иммобилизации (в мкмоль/г, M±m)

Контроль	ЛФЛ	ФС	СМ	ФХ	ФЭА	ФК
13,58±0,81	37,35±1,45	53,29±2,38 ##	150,27±2,70 ###	76,19±2,97	8,08±0,57
Иммобилизация (дни)	5	47,62±3,31 ***	40,30±1,60	32,72±1,71 ***###	54,61±2,87 ***###	39,19±3,66 ***	13,77±0,66 ***##
10	30,92±2,43 ***#	33,01±2,24	40,13±2,42 **###	48,02±2,06 ***###	32,38±3,90 ***	9,65±0,62 #
15	24,39±1,70 ***#	23,72±1,24 ***	43,97±2,40 *###	56,12±3,45 ***###	37,22±2,23 ***##	10,37±0,46 *
20	23,49±0,61 ***###	15,58±0,88 ***###	24,28±1,06 ***###	51,36±3,32 ***###	24,93±1,23 ***##	9,63±0,77
30	27,03±1,90 ***#	13,14±1,09 ***##	16,73±0.84 ***	43,19±3,00 ***###	33,31±1,28 ***	9,25±0,43
45	23,24±1,36 ***#	12,08±0,62 ***###	15,30±1,26 ***	44,89±3,57 ***###	28,03±3,51 ***	9,73±0,63 ##
Иммобилизация +АЛК (дни)	5	19,02±1,84 *#^^^	37,62±2,05	53,17±1,42 ###^^^	88,52±6,62 ***###^^	55,25±4,89 **##^	10,92±0,62 **##^^
10	18,79±1,18 **#^^	30,89±1,65 *	44,91±3,84 ###	71,34±5,01 ***###^^	44,17±2,99 ***^	9,77±0,40 *#
15	23,03±1,56 ***#	25,63±1,41 ***##	39,04±3,48 **###	67,55±5,13 ***###	29,408±1,84 ***###^	9,592±0,91 #
30	25,40±1,77 ***#	12,28±0,98 ***##	17,34±0,74 ***	40,10±2,86 ***###	32,09±1,30 ***	10,82±0,47 **^

Примечания: АЛК - альфа-липоевая кислота; ЛФЛ – лизофосфолипиды; ФС – фосфатидилсерин; СМ – сфингомиелин; ФХ – фосфатидилхолин; ФЭА – фосфатидилэтаноламин; ФК – фосфатидная кислота.* Р<0,05, ** Р<0,01, *** Р<0,001 по сравнению с контролем; # Р<0,05, ## Р<0,01, ### Р<0,01 статистически значимые различия между стресс-устойчивыми и стресс-неустойчивыми животными; ^ Р<0,05, ^^ Р<0,01, ^^^ Р<0,01 статистически значимые различия по сравнению со стрессированными без фармакологической коррекции стресс-неустойчивыми животными

Известно, что ФХ - основная, наиболее представленная в мембранах различных клеток фракция фосфолипидов, нарушения в метаболизме которой могут приводить к системным нарушениям липидного гомеостаза и клеточной гибели ( с соавт., 1999, Z. Cui et al., 2Помимо структурообразующей функции и регуляции биофизических свойств мембран, ФХ служит метаболическим предшественником для сфингомиелина (СМ) и ФЭА, источником различных липидных мессенджеров и холина, необходимого для нормального функционирования клеток мозга, а также является «структурным антиоксидантом» (, 1997, D. Vance et al., 2008). Высокие концентрации ЛФЛ могут деформировать структуру, нарушать целостность мембран, индуцировать клеточную гибель и воздействовать на активность ряда мембранных ферментов, в том числе на Са-АТР-азу, аденилатциклазу, Na, K – ATP-азу (, 1989, Ф. Хухо, 1990, J. Servitja et al., 2000).

Поэтому наблюдаемое при стрессе значительное обеднение ткани мозга ФХ и нарастание концентрации ЛФЛ может отображать глубокие метаболические и функциональные нарушения клеток, способствующие срыву адаптационных возможностей и играющие важную роль в реализации механизмов клеточной гибели (R. Epand, 1997, P. Lipton, 1999). При этом наблюдаемые достоверные различия в содержании данных фракций ФЛ у крыс с разной стресс-резистентностью могут свидетельствовать о большей структурной и функциональной устойчивости нервных клеток СУ животных в условиях хронической повторной иммобилизации.

У всех животных иммобилизация сопровождалась достоверным обеднением ткани мозга СМ (таблица 2, 3). Несмотря на то, что содержание СМ у СН животных c 5-го по 20-й дни эксперимента было достоверно выше, чем у устойчивых, в дальнейшем эти различия нивелировались, а концентрация СМ в ткани мозга СУ и СН крыс на 45-й день стресс-воздействия составила лишь 38,03 и 28,71% от исходного соответственно (таблица 2, 3). В связи с тем, что продуктам метаболизма СМ отводят важную роль в сигнальной трансдукции ( с соавт., 1996, Spiegel S. et al., 2002) не исключено, что уменьшение содержания СМ в лобных долях связано с генерацией ряда вторичных посредников. Таким образом, наблюдаемые различия в содержании СМ в ткани мозга могут отображать и различную выраженность в реализации эффектов метаболитов СМ при стрессе.

Начиная с 10-го дня эксперимента, наблюдалась тенденция к последовательному обеднению ткани мозга ФС (таблица 2, 3), концентрация которого к 45-ому дню стресс-воздействия уменьшалась по сравнению с контролем у СУ и СН крыс в 2,25 и 3,09 раза соответственно (P<0,001). При этом содержание ФС в лобных долях СУ животных в условиях 20-, 30- и 45-дневного стресса было достоверно выше, чем у неустойчивых. Так как, согласно имеющимся данным, ФС является одним из основных активаторов протеинкиназы С и аннулярным пептидом опиоидных рецепторов ( с соавт., 2002), выраженное истощение пула данной фракции ФЛ в ткани мозга может не только свидетельствовать о повреждениях мембран нейронов и нарушениях внутриклеточных регуляторных механизмов, но и оказывать определенное влияние на наблюдаемые при хроническом стрессе изменения активности опиодергических систем (, 1987, M. Fereidoni et al., 2007, B. Land et al., 2008).

Достоверное обеднение ткани мозга ФЭА также может иллюстрировать выраженные повреждающие липотропные эффекты стресс-реакции в условиях срыва адаптационных возможностей организма при хронической повторной иммобилизации. В то же время, динамика изменений содержания данной фракции ФЛ при различных сроках стресс-воздействия у подопытных животных с различной стресс-резистентностью была, в целом, однонаправленной (таблица 2, 3).

В лобных долях больших полушарий фосфатидная кислота (ФК) присутствует обычно в очень низких концентрациях ( с соавт., 1999). Наблюдаемое нами значительное повышение пула ФК при 5-дневной иммобилизации у всех и на 15-й и 20-й дни эксперимента у СУ животных происходило на фоне увеличения концентрации моноацильных форм ФЛ и обеднения ткани мозга ФХ (таблица 2,3). Такую взаимосвязь можно объяснить тем, что ФК способна усиливать гидролиз ФХ за счет «разрыхления» фосфолипидной структуры мембраны и повышения доступности субстрата для фосфолипазы А2 (A. Kinkaid et al., 1998, , 2005). Таким образом, увеличение содержания ФК в ткани мозга также может вносить дополнительный вклад в реализацию повреждающих липотропных эффектов стресс-реакции в условиях хронической повторной иммобилизации.

В качестве стресс-корригирующего фактора нами использовалась АЛК, которая может рассматриваться как витаминоид, синтезирующийся в организме животных и человека. АЛК играет важную роль в энергетическом обмене, поддержании липидного гомеостаза и антиоксидантного статуса на физиологическом уровне (L. Packer et al., 1997, А. Bilska, 2005).

На фоне введения АЛК 5-дневный стресс не приводил к достоверным изменениям в содержании общих ФЛ, ХОЛ и основных фракций ФЛ (кроме СМ) в ткани мозга СУ особей. На 10-й день эксперимента с фармакологической коррекцией концентрация ЛФЛ в лобных долях устойчивых крыс статистически не отличалась от значений, характерных для интактных животных. У СН животных введение АЛК на фоне 5- и 10-дневного стресса также вызывало достоверное ослабление эффекта последнего на обмен ФЛ (таблица 1, 2, 3). При более длительных сроках иммобилизации нейропротекторный эффект АЛК нивелировался.

Таким образом, в ходе реализации липотропных эффектов стресс-реакции наблюдались модификации липидного состава ткани мозга, более выраженные у СН особей.

Исследование содержания основных классов ФЛ в эритроцитах крыс с разной стресс-резистентностью продемонстрировало похожую по ряду параметров динамику их изменения в условиях хронического иммобилизационного стресса (таблица 4, 5).

В эритроцитах СУ животных (как интактных, так и подвергнутых воздействию 5-, 20-, 30- и 45-дневного стресса) концентрация ФХ была достоверно выше по сравнению с эритроцитами СН особей. Уменьшение концентрации ФХ в красных клетках крови при длительной повторной иммобилизации, так же как и в ткани мозга, происходило на фоне увеличения пула ЛФЛ. При этом относительное содержания ЛФЛ в эритроцитах СУ животных было достоверно ниже, чем у неустойчивых, вне зависимости от сроков эксперимента (таблица 4, 5).

Достоверное увеличение эритроцитарного пула СМ, наблюдаемое нами на 45-й день эксперимента (таблица 4, 5) как у устойчивых, так и у СН крыс, согласуется с литературными данными об изменении липидного спектра цельной крови больных психогенными депрессиями в условиях хронического эмоционального стресса (A. Collin et al., 2003, с соавт., 2005).

Таблица 4 - Содержание основных классов фосфолипидов в эритроцитах стресс-устойчивых крыс при длительной повторной иммобилизации (в % от суммарного содержания фосфолипидов, M±m)

Контроль	ЛФЛ	ФС	СМ	ФХ	ФЭА
7,46±0,35	11,87±0,63	18,69±0,57	41,68±0,98 ###	20,31±0,40 ##
Иммобилизация (дни)	5	15,16±0,75 ***##	11,84±0,86	15,46±0,74 **#	30,99±0,57 ***##	26,55±1,01 ***
10	10,73±0,51 ***###	11,22±0,36 ###	15,84±0,60 **	37,08±0,81 **	25,14±0.93 **#
15	10,36±0,58 **##	11,69±0,20 ###	13,85±0,38 ***	35,35±0,68 ***	28,76±0,86 ***
20	11,36±0,59 ***###	12,41±0,48 ###	13,83±0,76 ***##	35,61±0,81 **###	26,80±0,54 ***###
30	13,01±0,81 ***###	9,81±0,59 *	18,24±0,41 ##	27,53±1,67 ***##	31,41±1,46 ***#
45	16,96±0,64 ***##	6,48±0,72 ***	23,33±1,10 **	23,01±0,51 ***###	30,23±0,78 ***
Иммобилизация +АЛК (дни)	5	7,58±0,36 ##^^^	11,44±0,89	15,63±0,70 **#	40,11±0,50 ###^^^	25,25±1,08 **
10	10,36±0,25 ***###	10,97±0,21 ###	15,34±0,49 **	39,57±0,63 ##^	23,77±0,51 ***#
15	10,25±0,25 ***##	11,59±0,17 ###	13,66±0,46 ***###	37,03±0,83 **###	27,48±0,68 ***
30	13,24±1,00 ***##	10,69±0,52	18,03±0,25 ##	27,44±1,66 ***##	30,59±1,60 ***

Примечание: ЛФЛ – лизофосфолипиды; ФС – фосфатидилсерин; СФ – сфингомиелин; ФХ – фосфатидилхолин; ФЭА – фосфатидилэтаноламин;* Р<0,05, ** Р<0,01, *** Р<0,001 – статистически значимые различия по сравнению с контролем; # Р<0,05, ## Р<0,01, ### Р<0,01 статистически значимые различия между стресс-устойчивыми и стресс-неустойчивыми животными; ^ Р<0,05, ^^ Р<0,01, ^^^ Р<0,01 статистически значимые различия по сравнению со стрессированными без фармакологической коррекции стресс-устойчивыми животными