БЕЛОК В СМЖ АГАТ
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реактивов для определения белка
в спинномозговой жидкости
НАЗНАЧЕНИЕ
Диагностический набор предназначен для количественного определения содержания белка в спиномозговой жидкости с сульфосалициловой кислотой и сульфатом натрия унифицированным методом. Для клинико-диагностических и биохимических лабораторий.
Набор рассчитан на 400 определений при расходе 5,0 мл рабочего раствора на один анализ.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Интенсивность помутнения при коагуляции белка сульфосалициловой кислотой в присутствии натрия сернокислого (сульфата натрия), измеренная по оптической плотности при 440 нм, пропорциональна его концентрации. Калибровка осуществляется по раствору человеческого сывороточного альбумина.
СОСТАВ НАБОРА
1. 5-сульфосалициловая кислота, дигидрат, 60 г – 1 упаковка;
2. Натрий сернокислый, безводный, 140 г – 1 упаковка;
3. Калибровочный раствор альбумина 1000 мг/л, 10 мл – 1 флакон.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Нормальные величины концентрации белка в спинномозговой жидкости:
– из желудочков мозга 0,12–0,20 г/л;
– из большой цистерны 0,10–0,22 г/л;
– при люмбальной пункции 0,22–0,33 г/л.
ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ
– Спектрофотометр, длина волны 440 нм или фотоэлектроколориметр, длина волны 410–480 нм (сине-фиолетовый светофильтр), кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм;
– пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,5 и 5,0 мл;
– пробирки вместимостью 5,0–10 мл;
– колба мерная вместимостью 1000 мл;
– секундомер;
– вода дистиллированная;
– раствор натрия хлористого, 9 г/л;
– перчатки резиновые или пластиковые.
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Спиномозговая жидкость.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА
1. Раствор сульфосалициловой кислоты. Содержимое упаковки с сульфосалициловой кислотой количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем до метки.
Раствор стабилен.
2. Раствор натрия сернокислого. Содержимое упаковки с натрием сернокислым количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем до метки.
Раствор стабилен.
3. Рабочий раствор. Смешивают равные объемы приготовленных растворов сульфосалициловой кислоты и натрия сернокислого.
Раствор устойчив в течение 8 часов.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
В пробирки вносят реактивы по следующей схеме:
Содержимое пробирок тщательно перемешивают и выдерживают при температуре +18–22° С в течение 10 минут. Определяют оптическую плотность при длине волны 440 нм (410–480 нм, сине-фиолетовый светофильтр) против холостой пробы в кювете с толщиной слоя 10 мм.
При стоянии образцов более 20 минут возможно, уменьшение значений оптической плотности за счет оседания части преципитата. Непосредственно перед измерением пробирку с опытной пробой тщательно встряхнуть.
РАСЧЕТЫ
Расчет проводят по калибровочному графику.
Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика из калибровочного раствора альбумина и 9 г/л раствора натрия хлористого готовят следующие разведения:
Полученные разведения обрабатывают так же, как и образец.
Примечание: При использовании кюветы меньшего объема расход реактивов может быть пропорционально уменьшен при сохранении соотношения образец/рабочий раствор 1:10.
Линейная зависимость сохраняется до концентрации белка 1 г/л. При более высоких концентрациях пробу следует развести в 2–3 раза, результат умножить на разведение.
Результаты, получаемые данным методом чувствительны к изменениям температуры. Рекомендуется производить измерения при температуре +18–22° С.
СРОК ГОДНОСТИ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
Набор следует хранить в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–8° С в течение всего срока годности.
Срок годности набора – 2 года.
Литература: Лабораторные методы исследования в клинике. Под редакцией проф. , М., 1987, с. 103.
По вопросам, касающимся приобретения наборов и их качества, просим обращаться , стр. 1, –Мед». Телефон для справок: (4
Инструкция составлена: к. б.н. – ст. н.с. Гематологического научного центра РАМН, к. б.н. , – сотрудниками –Мед».
