Применение аутологичных мононуклеаров периферической крови
в лечении язвенных поражений роговицы
, ,
Using autologous mononuclears of peripheral blood in the treatment
of corneal injuries
Yelegecheva O. N., Krivosheina O. I., Zapuskalov I. V.
Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
ã , ,
УДК 617.713-002.44:611.018.5
Бактериальные язвы роговицы относятся к числу тяжелых заболеваний глаз, трудно поддающихся лечению и приводящих к снижению или потере зрения.
Наиболее частыми возбудителями бактериальных язв роговицы (более 80% всех случаев) являются Staphylococcae epidermidis, Staph. aureus, Pseudomonas aeruginosa. Наиболее агрессивный возбудитель — синегнойная палочка, вызывающая бурное течение язвы с последующей перфорацией роговицы и развитием эндофтальмита (Шаимова В. А., 2000; Шаимова В. А., 1999).
В последние годы выявились отрицательные тенденции в группе экзогенных факторов риска: контактные линзы (с ними связывают от 27 до 33% всех бактериальных кератитов), травма роговицы (23,7%), нарушение слезной пленки (20%).
В изменении характера возбудителей бактериальных язв роговицы также можно выделить следующие тенденции: рост числа антибиотико-резистентных возбудителей, рост более чем в 2 раза удельного веса грамотрицательных возбудителей, в том числе синегнойной палочки (Даутова З. А., 2000).
Трудности лечения язв роговицы в значительной степени обусловлены и тем, что в 44,8—52,7% случаев не удается выделить возбудителя, и лечение проводится эмпирически, с учетом клинической картины заболевания. Неудовлетворенность результатами традиционной терапии, высокая частота развития осложнений обусловливают разработку новых методов лечения язв роговицы.
Целью настоящей работы явилось изучение эффективности применения аутологичных мононуклеаров периферической крови у больных с язвенным поражением роговицы.
Клинические исследования проведены в группе из 56 больных (60 глаз) с язвой роговицы различной степени тяжести. При этом тяжелый патологический процесс наблюдался у 67% больных, средней степени тяжести — у 33%. На момент обращения в стационар острота зрения в большинстве случаев (59%) составляла ниже 0,1, в 41% — 0,1—0,2. Сроки обращаемости составляли от 1 до 3—4 дней.
Бактериологическое исследование отделяемого язвенного дефекта выявило рост микрофлоры в 78,9% случаев. Патогенная микрофлора обнаруживалась в 63,4% и была представлена Pseud. aeruginosa — 42,1%, Staph. aureus — 21,1%. Условно-патогенная микрофлора выявлялась в 15,5%, среди которой преобладали Staph. epidermidis — 5,2%, E. coli — 10,5%.
Всем пациентам данной группы наряду с традиционным лечением выполнялись инстилляции аутологичных мононуклеаров периферической крови с частотой 6—8 раз в день. Кровь, взятую из локтевой вены пациента в количестве 4,0—5,0 мл, помещали в стерильную пробирку, содержащую 1,0 мл раствора гепарина. Мононуклеары выделяли методом фракционирования в градиенте плотности (1,067—1,077 г/мл) на разделяющем растворе фиколл-верографина (Гольдберг Е. Д. и соавт., 1992). Взятая кровь в 2 раза разбавлялась физиологическим раствором и наслаивалась на 3 мл смеси фиколл-верографина. Пробы центрифугировали в течение 15 мин при 800g (2000 об./мин). Далее интерфазный слой, содержащий мононуклеары и располагающийся между плазмой и градиентом, забирался пастеровской пипеткой. Добавлялся 1 мл физиологического раствора, и полученная суспензия вновь центрифугировалась в течение 7 мин при 400g (1500 об./мин) для отмывания полученных мононуклеаров. Чистота мононуклеаров, полученных на градиенте фиколл-верографина, составляла 96%, жизнеспособность клеточного материала в тесте с трипановым синим находилась в пределах 95—97%.
Контрольная группа была представлена 40 пациентами (42 глаза), получавшими аналогичное лечение без применения инстилляций аутологичных мононуклеаров крови.
Пациенты обеих групп сопоставимы по полу, возрасту и тяжести поражения роговицы.
Сравнительный анализ результатов лечения язв роговицы позволил выявить значительную эффективность применения инстилляций аутологичных мононуклеаров крови. Так, например, срок очищения язвенного дефекта от некротических масс сократился в 2 раза по сравнению с контрольной группой. Рассасывание перифокального отека и инфильтрации стромы роговицы ускорилось на 25—30%. Как следствие, в более ранние сроки, чем в контрольной группе, наступала полная эпителизация роговицы. Число осложнений (формирование десцеметоцеле, перфорация роговицы, развитие эндофтальмита) уменьшилось в исследуемой группе в 3 раза.
Применение инстилляций аутологичных мононуклеаров периферической крови в комплексном лечении больных с язвенными поражениями роговицы положительно отразилось и на состоянии зрительных функций. У 46% пациентов основной группы отмечено повышение остроты зрения до 0,5—0,6, в то время как в контрольной группе подобный показатель достигнут лишь в 27% случаев.
Важное в медико-социальном аспекте значение имеет также факт сокращения длительности пребывания пациентов основной группы в стационаре в среднем на (6,0 ± 0,2) койко-дня.
Таким образом, результаты клинических исследований свидетельствуют о высокой эффективности применения аутологичных мононуклеаров периферической крови в комплексном лечении язвенных поражений роговицы.
Работа выполнена при поддержке гранта Президента РФ для молодых российских ученых за 2006—2007 гг. № МД-6837.2006.7.


