Влияние добавки семян рапса на секреторную функцию поджелудочной железы кур

На правах рукописи

ВЛИЯНИЕ ДОБАВКИ СЕМЯН РАПСА НА СЕКРЕТОРНУЮ ФУНКЦИЮ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ КУР

03.00.13 – Физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Новосибирск – 2009

Работа выполнена в лаборатории физиологии и патологии питания животных при кафедре анатомии, физиологии и валеологии Забайкальского государственного гуманитарно-педагогического университета им.

Научный руководитель: доктор биологических наук

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

ФГОУ ВПО «Новосибирский государственный

аграрный университет»

доктор биологических наук, профессор

ФГОУ ВПО «Красноярский государственный

аграрный университет»

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Дальневосточный государственный

аграрный университет»

Защита состоится «12» ноября 2009 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 220.048.04 при Новосибирском государственном аграрном университете ( г. Новосибирск-39, ул. Добролюбова, д. 160)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Новосибирский государственный аграрный университет»

Автореферат разослан «2» октября 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. В связи с необходимостью увеличения рентабельности производства и повышения качества животноводческой
продукции разработка научно обоснованных рационов кормления животных, сбалансированных по питательным веществам и энергии в соответствии с физиологическими потребностями организма, приобретает в условиях рыночной экономики определяющее значение.

К числу перспективных культур, богатых протеином и энергией, относится рапс. Несмотря на благоприятный состав питательных веществ, семена из обычных сортов рапса, в связи с наличием в них глюкозидов и эруковой кислоты, не нашли широкого применения в комбикормах птицы (, 1992). Известно, что поджелудочная железа очень чувствительна к изменению качества кормов и кормовым добавкам (, 1990; , 2001; , 2004). Однако исследования влияния рапса и продуктов его переработки на процессы пищеварения животных малочисленны и разноречивы (, 1989; , 1992), а внешнесекреторная функция поджелудочной железы птиц при добавке в рацион рапса практически не изучена. Это и явилось основанием для научного поиска.

Цель и задачи исследования. Цель данного исследования состояла в изучении секреторной функции поджелудочной железы при добавке семян рапса в рацион кур.

Для реализации указанной цели были сформулированы следующие задачи:

- определить содержание в маслосеменах рапса антипитательных веществ;

- изучить влияние на секреторную функцию поджелудочной железы кур семян рапса с разным содержанием эруковой кислоты;

- исследовать влияние добавок разного количества семян рапса к корму кур (1%, 5%, 10% от массы корма);

- проанализировать динамику выделения сока и панкреатических ферментов при использовании в рационе кур семян рапса;

- изучить показатель общего белка крови при добавке в рацион семян рапса;

- провести сравнительный анализ действия на секреторную функцию поджелудочной железы кур добавок семян рапса и сои.

Научная новизна. Впервые в хроническом эксперименте изучена внешнесекреторная деятельность поджелудочной железы кур при введении в рацион добавки семян рапса в разных дозах. Установлено, что добавка рапса 5% от массы корма является оптимальной дозой, поскольку она оказывает наибольшее стимулирующее влияние на ферментативную активность поджелудочной железы. Активность амилазы при использовании добавки семян рапса возрастает на 9%, протеаз – на 30-50%, липазы – на 13% по сравнению с фоновым периодом.

Теоретическая значимость и практическая ценность. Результаты экспериментальных исследований по изучению влияния добавки семян рапса на внешнесекреторную функцию поджелудочной железы кур позволяют определить механизмы и фазы адаптации пищеварительной системы при использовании белковой добавки, а также установить оптимальные дозы введения семян рапса в рацион кур-несушек.

Работа представляет научно-практический интерес для биологов, физиологов, технологов птицеводства. Материалы исследований могут быть использованы при теоретическом обосновании характера питания птиц, а также в качестве данных для последующих исследований в научной работе и учебном процессе.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научно-практических конференциях: «Роль физиологии в современном естествознании» (Чита, 2007); «Проблемы биологической науки и образования в педагогических вузах» (Новосибирск, 2008), ежегодных научных конференциях в ЗабГГПУ (2007, 2008, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 3 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Содержание в семенах рапса эруковой кислоты и влияние семян рапса с избыточным содержанием эруковой кислоты на панкреатическую секрецию.

2. Оптимальная доза введения добавки семян рапса в рационы кур-несушек.

3. Динамика сокоотделения, выделения панкреатических ферментов под влиянием добавки семян рапса.

4. Сравнительный анализ действия на секреторную функцию поджелудочной железы кур разных белковых добавок (семян рапса и сои).

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 182 страницах компьютерного текста. Содержит введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты исследования, обсуждение результатов, выводы, рекомендации для практического применения и приложения. Список использованной литературы включает 235 источников, в том числе 22 на иностранных языках. Работа иллюстрирована 33 таблицами и 34 рисунками.

1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Эксперименты по изучению внешнесекреторной функции поджелудочной железы птиц выполняли в период с 2006 по 2009 гг. в лаборатории физиологии и патологии питания животных кафедры анатомии, физиологии и валеологии Забайкальского государственного гуманитарно-педагогического университета им. .

Хронические опыты проводили на одиннадцати курах-несушках породы Ломан Браун, оперированных по методу , (1970).

При выполнении работ пользовались методом периодов с обратным замещением в соответствии с методическими рекомендациями «Комплексное (физиологическое и зоотехническое) изучение процессов питания у свиней» (1988). Для изучения динамики секреторной функции поджелудочной железы собирали панкреатический сок в течение 3 часов с 30 минутными интервалами. После первых 30 минут эксперимента курам давали корм в объеме 30 % от дневной нормы.

Для исследования ферментативной активности панкреатического сока использовали следующие методы. Активность амилазы устанавливали по Смит-Рою-Уголеву (1965). Протеолитическую активность определяли по уменьшению концентрации казеина при фотометрическом контроле (, 1971). Активность липазы панкреатического сока изучали по гидролизу подсолнечного масла (, , 1985).

Количество эруковой кислоты в масле рапса определяли по методу Мак Грегора (1952). Активность ингибиторов трипсина в семенах сои и рапса - казеинолитическим методом по (1987).

Определение общего белка в сыворотке крови кур проводили биуретовым методом. При этом I группа птиц была контрольной, получала основной рацион. Вторая группа (опытная) получала в течение пяти дней добавку семян рапса в количестве 5% от массы корма. Пробы крови отбирали из подкрыльцовой вены.

Статистическую обработку цифровых материалов проводили по (1975), используя критерии Стьюдента.

2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Содержание в маслосемянах рапса эруковой кислоты, и ингибитора

трипсина - в семенах сои и рапса

Рапс и сою относят к высокобелковым сельскохозяйственным растениям, в которых помимо полезных для организма веществ содержатся антипитательные вещества (эруковая кислота, глюкозинолаты) - в рапсе и ингибиторы - в сое. Известно, что антипитательные вещества, содержащиеся в белковых культурах, оказывают неблагоприятное воздействие на рост и развития животных и птиц. Однако механизм этого воздействия на процессы пищеварения до конца не изучен. Это и послужило причиной исследования количества антипитательных веществ в рапсе и сое.

Мак Грегором (1952) был разработан метод определения содержания эруковой кислоты в масле семян рапса. Метод основан на зависимости скорости помутнения масла от концентрации в нем эруковой кислоты. Данные нашего исследования показали, что содержание эруковой кислоты в масле семян рапса сорта Шпат составило 33%.

Известно, что в белковых культурах содержится антипитательное вещество – ингибитор трипсина, который значительно снижет питательную ценность бобов (, 1991). В задачу наших исследований входило изучение наличия данного вещества в семенах рапса и сои. Исследования выполняли двумя методами. Результаты анализов казеинолитическим методом показали, что количество ингибитора в семенах рапса составило 5,2 х 100 мкг, в сое - 7,7 х 100 мкг и в соевом жмыхе – 4,3 х 100 мкг. Следовательно, в соевом жмыхе трипсинингибирующая активность меньше почти в два раза, чем в семенах сои.

Предложенная нами методика, основана на определении активности ферментов, которые остаются после образования ферментно-субстратного комплекса. Сущность метода состоит в сравнении контрольной пробы (активность протеаз панкреатического сока) с опытными пробами, в которых панкреатический сок смешивался с белковой добавкой (без термической обработки и после термической обработки).

В таблице 1 представлены сравнительные результаты изменения активности протеаз панкреатического сока с добавкой семян рапса и сои в связи с их термической обработкой.

Таблица 1. Изменение активности протеаз панкреатического сока с добавкой

семян сои и рапса

Название семян растений	Исходная протеолитическая активность панкреати- ческого сока	%	Активность протеаз панкреати- ческого сока с добавкой семян, прошедших термическую обработку	% к контр.	Активность протеаз панкреати- ческого сока с добавкой семян, без термической обработки	% к контр.
Рапс	761±64,5 мг/мл/мин	100%	731±75,2 мг/мл/мин	96%	607±32,2 мг/мл/мин	80%
Соя	283±18,6 мг/мл/мин	100%	168±20,6 мг/мл/мин	59%	104±16,5 мг/мл/мин	37%

Результаты исследований показали, что содержащийся в семенах рапса белок разрушается полностью в результате термической обработки. По нашим данным, в нем содержалось 20% белка. В добавке семян сои подверглось денатурации всего 41%. Разница между белком, находящимся в связанном виде (63%), и оставшимся после термической обработки (41%), соответствует количеству ингибитора, который составляет 22%.

Следовательно, в семенах рапса ингибитор практически не содержится, а в семенах сои его уровень составляет 22%. Поэтому при использовании в рационе кур семян рапса особое внимание следует обращать на количество в них эруковой кислоты и глюкозинолатов.

2.2. Влияние семян рапса с содержанием 33% эруковой кислоты на секреторную функцию поджелудочной железы кур

В доступной научной литературе мы не обнаружили данных о влиянии рапса с разным содержанием эруковой кислоты на процессы пищеварения у животных. Поэтому одной из задач нашего исследования явилось изучение влияния добавки рапса (5% от массы корма) с содержанием эруковой кислоты 33% на секреторную функцию поджелудочной железы кур.

Результаты свидетельствуют о том, что при использовании в рационе кур рапса с содержанием эруковой кислоты 33% количество панкреатического сока за опыт уменьшалась на 25% (табл. 2). Амилолитическая активность в 1 мл сока снижалась на 22%, а в объеме сока за опыт - на 38%. Протеолитическая активность увеличивалась в 1,5 раза, а в объеме сока - в 1,1 раза.

Таблица 2. Влияние семян рапса с содержанием 33% эруковой кислоты в дозе 5% от массы корма на секреторную функцию поджелудочной железы у кур

Показатели	Фон	Опыт	% к контр.
Количество панкреатического сока за опыт, мл	3,2±0,2	2,4±0,2	75,0
Активность ферментов в 1мл сока, мг/мл/мин
Амилаза	5550±115,7	4328±121,7****	78,0
Протеазы	245±13,1	358±11,6****	146,1
Активность ферментов в объеме сока за опыт, мг/мл/мин
Амилаза	17408±1459,9	10786±858,7**	62,0
Протеазы	791±65,0	884±76,0	111,8

Примечание: * P<0,05, ** P<0,02, ***P<0,01, **** P<0,001.

Эксперименты, выполненные на курах с хронической фистулой панкреатического протока, показывают, что сокоотделение поджелудочной железой в течение опыта идет непрерывно разными порциями (рис. 1).

Рис. 1. Количество выделения панкреатического сока у куриц при добавлении в рацион 5% рапса от массы корма

При введении семян рапса, содержащих 33% эруковой кислоты в количестве 5% от массы корма, динамика (рис. 1) не изменяется, однако данная добавка вызывает снижение количества сока, поэтому траектория показателя сокоотделения располагается ниже, по сравнению с фоновым уровнем. Прием корма вызывает увеличение количества панкреатического сока в 1,6 раза, по сравнению с исходным уровнем. Затем следует снижение секреции в течение 90 минут и уровень выделения сока практически приближается к исходной величине 0,4±0,04 мл. На этом заканчивается сложнорефлекторная фаза и происходит выделение секрета под действие гуморальной фазы регуляции. В этот период наблюдается тенденция к увеличению секреции до 0,54±0,06 мл.

Рис.2. Динамика активности амилазы у кур при добавке в рацион 5% рапса от массы корма

Рис.3. Влияние добавки 5% рапса от массы корма на протеолитическую активность панкреатического сока у кур

При введении рапса с содержанием 33% эруковой кислоты в объеме 5% от массы корма (рис. 2) динамика амилолитической активности не изменяется, но траектория показателя выделения ферментов находится ниже фонового уровня.

Существенные изменения наблюдали и в динамике протеолитической активности после добавки семян рапса с избыточным содержанием эруковой кислоты (рис. 3). После приема корма через 30 минут активность протеаз увеличивалась в 1,3 раза. Первый пик активности наступал через 90 минут после кормления и составлял 323±18,2 единиц в фоновый период, а в опытный - 474±12,8 единиц. Данная величина протеолитической активности оказывалась выше в 1,5 раза соответствующей величины в фоновой серии опытов. Второй пик активности фермента происходил через 150 минут от начала опыта, что в 1,4 раза было выше фонового периода.

Таким образом, причиной снижения количества секрета и уменьшения активности амилазы поджелудочного сока является качество семян рапса. Рапс, использованный в виде добавки к основному рациону кур, содержал большое количество эруковой кислоты (33%) при допустимой норме 5%, а повышение протеолитической активности в данном случае можно объяснить увеличением содержания белка в рационе.

2.3. Экзокринная функция поджелудочной железы кур при добавке разного количества семян рапса (1%, 5%, 10% от массы корма)

Для того, чтобы эффективно использовать белковые добавки, необходимо знать оптимальное их количество, способное давать наивысшую конверсию корма в продукцию. С этой целью мы решили сравнить соотношение добавок семян рапса (1%, 5% и 10% от массы корма) с активностью панкреатических ферментов (табл. 3).

Сравнивая влияние семян рапса в разных дозах, можно отметить, что в опытный период имело место снижение количества сока в случае добавления в рацион кур семян рапса в дозе 1% и 5% от массы корма - на 4% и 14%, а при добавке 10% от массы корма, наоборот, увеличение выделения панкреатического сока в 1,1 раза. Однако разница существенна только при использовании семян рапса в дозе 5% от массы корма.

Амилолитическая активность увеличивается в опытный период на 2%, 9% и 9% соответственно дозам рапса, а в объеме секреция сока за опыт остается без существенных изменений.

Протеолитическая активность в период опыта увеличивалась при введении в корм курам 5% и 10% семян рапса от массы корма в 1,5 раза и 1,3 раза в единице сока, а в объеме сока за опыт увеличивалась, соответственно, в 1,2 и 1,4 раза, по сравнению с фоном. Добавление семян в объеме 1% от массы корма не влияло на протеолитическую активность.

Следовательно, наибольшее увеличение активности протеаз (в 1,5) раза наблюдалось в опытный период, при кормлении кур семенами рапса в дозах 5% от массы корма.

Липолитическая активность при добавлении курам семян рапса в дозе 5% и 10% от массы корма увеличивалась в 1,1 раза.

Таблица 3. Внешнесекреторная функция поджелудочной железы кур при добавлении в рацион семян рапса

№ п\п	Показа- тели	Ед. изм	Доза добавки семян рапса
1% от массы корма	5% от массы корма	10% от массы корма
фон	опыт	фон	опыт	фон	опыт
1.	Количество сока за опыт	мл %	7,5±0,4 100%	7,2±0,4 96,0%	6,6±0,2 100%	5,7±0,2** 86,4%	5,0±0,2 100%	5,7±0,3 114,0%
Активность ферментов в 1 мл сока, мг/мл/мин
2.	Амилаза	ед. %	5250± 119,1 100%	5344± 174,1 101,8%	4284± 118,4 100%	4664± 176,9 108,9%	4204± 188,7 100%	4593± 153,0 109,2%
3.	Протеазы	ед. %	249± 14,0 100%	220± 9,5 88,3%	236± 11,8 100%	342± 13,1**** 144,9%	323± 9,4 100%	417± 10,0**** 129,1%
4.	Липаза	ед. %	18±04 100%	18±0,4 100%	10±0,5 100%	11±0,4 110,0%	15±0,6 100%	17±0,6* 113,3%
Активность ферментов в объеме сока, мг/мл/мин
5.	Амилазы	ед. %	43872± 2837,3 100%	42353± 3134,8 96,5%	28397± 1066,0 100%	27205± 1759,7 95,8%	23650± 1784,3 100%	23820± 2440,9 100,7%
6.	Протеазы	ед. %	1966± 160,8 100%	1668± 139,5 84,8%	1489± 78,3 100%	1846± 60,0**** 124,0%	1679± 94,5 100%	2400± 152,7*** 142,9%
7	Липаза	ед. %	138±7,5 100%	138±8,9 100%	71±4,9 100%	68±4,8 95,8%	79±5,9 100%	105±9,5* 132,9%

Примечание: *Р<0,05, ** Р<0,02, *** Р<0,01, **** Р< 0,001

Таким образом, поджелудочная железа кур реагирует на разницу в добавках семян рапса изменением секреции сока. Так, наименьшая доза (1% от массы корма) существенно не изменяет сокоотделение и активность панкреатических ферментов. Однако 5% от массы корма вызывает снижением секреции панкреатического сока на 14%, но при этом увеличивается его протеолитическая активность в 1,5 раза (в единице секрета и в 1,2 раза в объеме сока за опыт).

Добавка семян рапса в количестве 10% от массы корма стимулирует активность протеаз в 1,3 раза в единице сока и в 1,4 раза в объеме сока за опыт. Учитывая увеличение количества рапса по сравнению с предыдущей дозой, в два раза, следует отметить, что наиболее выраженной реакция поджелудочной железы отмечается при добавке семян рапса в количестве 5% от массы корма. Поэтому данная доза является наиболее оптимальной.

2.4. Динамика секреции панкреатического сока и ферментов при использовании в рационе кур семян рапса

Поджелудочная железа птиц реагирует на прием корма усилением своей деятельности, которая вызывает одновременное увеличение объема панкреатического сока и повышение активности ферментов. В регуляции внешнесекреторной функции поджелудочной железы принимают участие нервные и гуморальные механизмы. Так, внешнесекреторная функция железы кур в основном увеличивается за счет повышения активности амилазы, протеаз и липазы (, 2001). Одной из задач настоящего исследования явилось изучение динамики выделения панкреатического сока и ферментов до - и после добавки в рацион семян рапса.

Для того, чтобы изучить как меняется секреторная функция поджелудочной железы кур на введение в рацион семян рапса, следует рассмотреть динамику секреции панкреатического сока и его ферментативной активности.

Наши экспериментальные данные, представленные на рисунке 4,5,6,7, показывают изменения экзокринной функции поджелудочной железы кур в 1 мл получасовой порции сока под влиянием добавки рапса в объеме 5% от массы корма.

Рис. 4. Количество панкреатического сока у кур при добавлении в рацион 5% рапса от массы корма

Итак, усиление внешнесекреторной функции поджелудочной железы кур связано с приемом корма. Наибольшее количество сока за опыт выделяется через 30 и 150 минут после кормления. В опытный период эти показатели на 18% и на 20% были ниже исходного периода (рис. 4).

Ферментативная активность изменяется по-разному. При добавлении рапса существенных изменений в динамике активности амилазы и липазы не установлено (рис. 5,7). Активность липазы достигает максимального значения через 30 и 150 минут после приема корма в 1,1 раза, а активность амилазы - через 60 и 150 минут, соответственно, в 1,7 раза, по сравнению с исходной активностью. Динамика активности протеаз (рис. 6) в течение опыта принципиально не изменялась, по сравнению с фоном, но в опытный период значения активности протеаз значительно превосходили показатели без добавления рапса (р< 0,001). Пики активности фермента регистрировали через 90 и 150 минут, соответственно, в 1,6 раза.

Рис. 5. Динамика активности амилазы у кур при добавке в рацион 5% рапса от массы корма

Рис. 6. Влияние добавки 5% рапса от массы корма на протеолитическую активность панкреатического сока у кур

Рис. 7. Динамика активности липазы у кур при добавке в рацион 5% рапса от массы корма

Результаты наших исследований согласуются с данными, полученными на цыплятах-бройлерах (, 1989), где было отмечено, что при выделении панкреатических ферментов после приема корма наблюдается определенный паралеллизм, и в то же время наибольшей активности ферменты достигают в следующей последовательности: липаза, амилаза, протеаза.

Добавка семян рапса оказывает существенное влияние на динамику протеолитической активности. Базовая активность фермента в 1 мл сока в опытный период возрастает в 1,3 раза, что свидетельствует о долговременной адаптации функции органа к белковой добавке. В максимальных точках траектории показатели выделения протеаз в опытный период были выше в 1,5 раза. В динамике выделения протеолитических ферментов в объеме сока имел место наибольший подъем в сложнорефлекторную фазу регуляции, т. е. через 30-90 минут после кормления. Это связано, по-видимому, со своеобразными вкусовыми качествами семян рапса.

Таким образом, наши данные согласуются с результатами исследований и его научной школы. Процесс пищевого возбуждения связан с приемом корма и протекает в две фазы: первая – сложнорефлекторная (в течение двух часов), а вторая – нейрогуморальная (до 5-6 часов после приема корма).

2.5. Влияние добавки семян рапса в рацион кур на показатели общего белка в сыворотке крови

Белки крови являются индикатором обменных процессов в организме животных. Количество общего белка в сыворотке крови у разных видов животных колеблется в определенных пределах, у кур показатели сывороточного белка в крови (4-6%) уступают млекопитающим.

В задачу наших исследований входило изучить влияние добавки семян рапса к корму кур на уровень общего белка в сыворотке крови.

Результаты исследований показали, что в контрольной группе у птиц содержание общего белка составляло 58±2,0 г/л, а в опытной - 65±0,34 г/л, т. е. выше на 12%. Это свидетельствовало о том, что семена рапса (5% от массы корма) оказывают стимулирующее влияние на процессы пищеварения и усвоение белка. В связи с тем, что добавка семян рапса производилась к сбалансированному корму, то показатель общего белка в опытной группе несколько превышал физиологическую норму кур. Такое отклонение можно считать физиологичным, поскольку согласно данным (2004), у кур отмечаются сезонные колебания и в зимний период содержание общего белка в сыворотке крови может достигать 74,1±16,17 г/л.

Таким образом, добавка семян рапса в объёме 5% от массы корма к сбалансированному рациону повышает уровень общего белка в сыворотке крови на 12%, по сравнению с контролем. Это свидетельствует о том, что семена рапса оказывают стимулирующее влияние на процессы пищеварения и обмен веществ.

2.6. Сравнительный анализ действия на секреторную функцию поджелудочной железы кур добавки семян рапса и сои

Среди всех возделываемых в мире сельскохозяйственных культур соя является одной из самых высокобелковых кормовых растений. По качеству белка она значительно превосходит многие другие растения, в том числе масличные и зерновые.

Основным биохимическим компонентом семян сои является белок. Семена ее содержат 17-26% жира, 36-42% сбалансированных по аминокислотному составу белка и более 20% углеводов. По белковому комплексу и содержанию незаменимых аминокислот (лизин, метионин, триптофан и др.) соевый протеин ближе к белкам животного происхождения, следовательно, организм животных и человека затрачивает минимальные усилия для превращения соевого белка в белки своего тела. Высокая растворимость соевого альбумина в воде делает его легкоусвояемой пищей для людей и ценным кормом для животных и птицы.

В задачу наших исследований входило изучение влияния на пищеварительную функцию поджелудочной железы добавки разных белковых культур в рацион кур. Результаты экспериментов показывают, что секреторная функция поджелудочной железы кур реагирует на увеличение протеина корма за счет добавки семян сои в объёме 5% от массы корма (табл. 4).

Таблица 4. Влияние семян сои (5% от массы корма) на секреторную функцию поджелудочной железы кур

Показатели	Фон	Опыт	% к контр.
Количество панкреатического сока за опыт, мл	5,6±0,3	5,0±0,4	89,3
Активность ферментов в 1мл сока, мг/мл/мин
Амилаза	3960±376,5	4732±235,1	119,5
Протеазы	265±13,4	452±24,7**	170,6
Липаза	16±0,6	19±0,5*	118,8
Активность ферментов в объеме сока за опыт, мг/мл/мин
Амилаза	23388±1745,5	26952±3425,3	115,2
Протеазы	1643±110,2	2575±236,6*	156,7
Липаза	95±6,1	102±8,5	107,4

Примечание: * P<0,01, ** P<0,001.

Результаты свидетельствуют о том, что количество панкреатического сока за опыт у кур существенно не изменялся, хотя и имела место тенденция снижения секреции на 11%. Активность амилазы в 1 мл за опыт и в объеме сока увеличивалась в 1,2 раза (p>0,1). Протеолитическая активность в 1 мл сока при использовании добавки сои повысилась у кур в 1,7 раза, а в объеме сока за опыт - в 1,6 раза. Активность липазы в 1 мл сока и объеме сока возрастала, соответственно, - в 1,2 и в 1,1 раза. Следовательно, при введении в рацион кур семян сои в объёме 5% от массы корма происходило изменение протеолитической активности, что можно объяснить увеличением содержания сырого протеина в корме.

Таким образом, добавление семян сои в объёме 5% от массы корма оказывает стимулирующее влияние на протеолитическую активность сока поджелудочной железы кур, (в 1,7 раза).

Сою и рапс относят к кормовым и высокобелковым культурам. Известно, что качественный состав их несколько отличается (, 1989). Задача наших исследований состояла в том, чтобы сравнить качество добавок биологическим методом, используя адаптивные возможности поджелудочной железы кур (рис. 8,9,10,11).

Рис. 8. Количество выделенного панкреатического сока в сравнение сои и рапса (5% от массы корма) в сравнении

Из рисунка 5 видно, что количество панкреатического сока (рис. 8), выделенного за опыт, достоверно снижалось при кормлении их семенами рапса - на 14% (с 6,6±0,2 мл до 5,7±0,2 мл); семенами сои - на 11% (с 5,6±0,3 мл до 5,0±0,4 мл).

Рис. 9. Динамика активности амилазы у кур при добавке в рацион корма сои и рапса (5% от массы корма) в сравнении

Рис. 10. Влияние добавки сои и рапса (5% от массы корма) на протеолитическую активность панкреатического сока у кур

Рис. 11. Динамика активности липазы у кур при добавке в рацион сои и рапса (5% от массы корма) в сравнении

Амилолитическая активность (рис. 9) при введении добавок семян сои и рапса существенно не изменялась, а протеолитическая активность (рис. 10) увеличивалась в опытный период в 1,7 раза (с 265±13,4 мг/мл/мин до 452±24,7 мг/мл/мин) при добавлении в рацион кур семян сои, а при добавке к корму семян рапса данный показатель увеличиваля в 1,5 раза (236±11,8 мг/мл/мин до 342±13,1 мг/мл/мин). Это связано с тем, что в семенах сои содержится больше протеина (36-42%), чем в семенах рапса (20-30%). Поэтому внешнесекреторная функция поджелудочной железы кур адекватно реагировала на изменение сырого протеина в суточном рационе.

Использование в рацион кур добавки сои повышает активность липазы в 1,2 раза (с 16±0,6 мкмоль/мл/мин до 19±0,5 мкмоль/мл/мин) по сравнению с фоновым уровнем (рис. 11).

Таким образом, внешнесекреторная функция поджелудочной железы кур наиболее интенсивно реагирует на добавление в рацион семян сои, чем рапса. Так, при введении в корм семян сои в объёме 5% от массы корма наблюдается увеличение протеолитической активности в 1,7 раза, а при добавке рапса в таком же объёме увеличение составляет - 1,5 раза. Добавление в рацион кур семян сои вызывает увеличение липолитической активности в 1,2 раза, по сравнению с фоновым периодом.

ВЫВОДЫ

1. Рапс - кормовая культура, в которой наряду с высоким содержанием белка и жиров содержаться антипитательные вещества (эруковая кислота, глюкозинолаты). В исследованных нами пробах количество эруковой кислоты достигало 33%, что значительно превышало допустимую норму (5%). Установлено, что в семенах рапса отсутствует ингибитор трипсина, что подтверждено ферментно-субстратным и казеинолитическим анализами.

2. Добавление рапса с высоким содержанием эруковой кислоты (33%) в объеме 5% массы корма угнетает функцию поджелудочной железы кур, снижая количество панкреатического сока и активность амилазы. Однако протеолитическая активность в данном случае возрастает на 35%, что можно объяснить повышением уровня белка в данном виде корма.

Введение в рацион кур семян рапса в объеме 5%, с допустимым содержанием эруковой кислоты, стимулирует продукцию панкреатического сока и его протеолитическую активность в 1,5 раза.

3. Объем панкреатического сока, секретируемого поджелудочной железой зависит от дозы рапса, вносимого в корм суточного рациона птиц: при объеме 1% от массы корма изменения в секреции были недостоверны; при 5% добавке секреция снижалась на 14%, при одновременном увеличении его протеолитической активности в 1,5 раза. Добавка рапса в объеме 10% от массы корма также приводила к снижению секреции сока, а протеолитическая и липолитическая активность были, соответственно, выше в 1,3 и 1,1 раза. Последнее позволило нам прийти к заключению о том, что наиболее оптимальной по эффективности является добавка рапса в объеме 5% массы корма суточного рациона.

4. Введение семян рапса в рацион кур в качестве добавки сопровождается стимуляцией секреции панкреатического сока, связанной с временным фактором и гетерохроностью изменения ферментативной активности сока. Максимум значений активности липазы регистрируются через 30 и 150 минут после приема корма; амилазы - через 60 и 150 минут (в 1.7 раза выше исходной активности) и протеазы через 90 и 150 минут (в 1,6 раза). Все это является отражением сложно-рефлекторной и нервно-гуморальной регуляции процессов пищеварения.

Исходная активность протеаз, в пересчете на 1 мл сока, в опытный период возрастала в 1,3 раза, что свидетельствует о долговременной адаптации поджелудочной железы к белковой добавке.

Итак, сравнительные исследования выявили, что динамика показателей протеолитической активности панкреатического сока под влиянием добавки рапса достоверна была выше.

5. Пятипроцентная добавка семян рапса к массе корма суточного рациона стимулирует синтез сывороточного белка крови - превышение данного показателя в опыте составило 12%.

6. Экспериментально установлено, что у птиц, получавших добавки рапса и сои к корму суточного рациона, поджелудочная железа с разной интенсивностью отвечала секрецией ферментов панкреатического сока: на введение семян сои в объеме 5% к корму протеолитическая активность увеличивалась в 1,7 раза, а на рапс – в 1,5 раза. При этом в обоих случапях зарегистрировано повышение липолитической активности в 1,2 раза.

Предложения для практического применения

1.  Результаты исследований позволяют рекомендовать для использования в научно-производственных опытах добавку семян рапса в дозе 5% от массы корма. В этом случае отмечается максимальный уровень стимуляции секреторной функции поджелудочной железы.

2.  Предлагаем использование хронических опытов на курах с фистулой панкреатического протока (метод , , 1970) для определения оптимальной дозировки различных биологически активных добавок в корм, в том числе содержащие антипитательные вещества (эруковую кислоту, ингибиторы), поскольку поджелудочная железа четко адаптируется к качественному составу корма.

3.  Разработанный нами метод проведения ферментно-субстрантного анализа качества кормов, позволяет определить содержание протеина, в том числе ингибитора трипсина в белковых культурах.

4.  Материалы диссертации могут быть использованы для теоретического обоснования характера питания птиц, а также в качестве данных для последующих исследований в научной работе и в учебном процессе.

Список опубликованных работ по теме диссертации

Вертипрахов панкреатической секреции к уровню белка в рационе кур / , , // Вестник Красноярского государственного аграрного университетаВып. 2. – С. 187-189. Цуканова функция поджелудочной железы кур при использование в рацион добавки маслосемян рапса (5% от массы корма) / // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. – 2009. - № 3. - С. 129-132. Вертипрахов семян рапса с разным содержанием эруковой кислоты на секреторную функцию поджелудочной железы кур / , // Вестник Красноярского государственного аграрного университетаВып. 8. – С. 110-113. Вертипрахов панкреатической секреции кур и цыплят-бройлеров к уровню протеина в рационе / , , // Проблемы биологической науки и образования в педагогических вузах: Материалы V Всероссийской научно-практической конференции. – Новосибирск, 2008. – С. 101-103. Вертипрахов анализ действия на секреторную функцию поджелудочной железы кур добавки семян рапса и сои / , // «Боловсрол судлал», Монголия, Улан-Батор. - № 6. – 2009. – С. 136-143. Цуканова рапса в качестве белковой добавки в рационах животных Молодая наука Забайкалья – 2007: аспирантский сборник / ЗабГГПУ – Чита, 2007. – С. 313-316. Цуканова пищеварительных ферментов в бобовых культурах Молодая наука Забайкалья – 2008: аспирантский сборник / ЗабГГПУ – Чита, 2008. – Ч. 1. - С. 46-50.