ФЛЮОРЕСЦЕНТНАЯ ДИАГНОСТИКА СОСТОЯНИЯ ТКАНЕЙ БАРАБАННОЙ ПЕРЕПОНКИ
1, Д.1
1- ГБУЗ МО Московский областной научно-исследовательский клинический институт (МОНИКИ) им.
e-mail: *****@***ru
При лечении экссудативных отитов в ЛОР-практике используется два альтернативных способа создания перфорации для оттока экссудата: шунтирование (формирование отверстия в барабанной перепонке при помощи металлической тимпаностомической трубки) и лазерная миринготомия (перфорацию осуществляют лазерным скальпелем [1]). Согласно наблюдаемым данным на пациентах МОНИКИ, количество рецидивов отита после лазерной миринготомии значительно меньше. Для более детального понимания процессов, происходящих с тканью барабанной перепонки после этих операций, было проведено лазерное флюоресцентное исследование состояния тканей. Для исследования было привлечено 3 пациента после шунтирования барабанных перепонок и 7 пациентов после лазерной миринготомии, - все на сроках 3-5 недель после операции, а также 15 условно здоровых добровольцев из персонала МОНИКИ.
Лазерное флюоресцентное исследование проводилось при помощи диагностического комплекса «ЛАКК-М», обладающего гибким выносным оптоволоконным зондом, по которому на перепонку подавалось возбуждающее излучение длиной волны 365 нм с мощностью 3 мВт, а обратно рассеянное тканью флюоресцентное излучение подавалось на спектроанализатор. Глубина проникновения такого излучения в покровные ткани составляет 1-3 мм.
Здоровые ткани содержат несколько эндогенных флюорофоров, формирующих общеинтегральный сигнал флюоресценции: структурные белки (коллаген, эластин, кератин), дыхательные пигменты NAD(P)H и FAD, флавины и порфирины [2]. Отмечено, что рубцовая ткань имеет иные спектры флюоресценции, чем интактная, с меньшей интенсивностью сигнала в области флюоресценции коллагена и эластина (от 400 до 440 нм) [3].
Контроль состояния микроциркуляторного русла исследованных тканей также проводился при помощи «ЛАКК-М» в режиме ЛДФ (лазерного допплеровского флюоресцентного сканирования). При этом на основании получаемых спектральных данных характеристических полос поглощения гемоглобина и динамического анализа допплеровского сдвига сигналов в автоматическом режиме определяются такие параметры микрокапиллярного русла ткани, как параметр микроциркуляции (ПМ), характеризующий объёмную перфузию ткани кровью и пропорциональный скорости и концентрации эритроцитов в диагностическом объёме, тканевую сатурацию (ТС), характеризующую относительную долю оксигенированного гемоглобина, и объёмное кровенаполнение (ОК), пропорциональное доли гемоглобина в ткани [4].
При анализе совокупности полученных результатов выяснено, что разброс данных по микроциркуляции внутри групп как здоровых добровольцев, так и пациентов с патологией любого типа слишком широк, чтобы говорить о статистически значимых отличиях патологических состояний. В целом разброс данных при воспалительных процессах шире (12<ПМ<60 перфузионных единиц, 25%<ТС<70%, 10%<ОК<30%), чем в норме. Отмечено, что последовательные измерения этих параметров у одного и того же пациента по мере восстановления имеет тенденцию к снижению ТС и ОК и повышению ПМ.
Отсутствие статистически достоверных различий в параметрах микроциркуляции позволяет сопоставлять спектральные данные флюоресценции без учёта возможных изменений их оптической плотности. Для удобства сопоставления все полученные распределения интенсивностей обратно рассеянного возбуждающего излучения Ilaser и флюоресцентного сигнала тканей Iflu были линейно преобразованы в коэффициенты флюоресцентной контрастности kf по формуле, отличной вдвое от стандартного представления [5]:
.
При сопоставлении данных в коэффициентах флюоресцентной контрастности пациентов с рубцом после оперативного вмешательства и интактной ткани перепонки здоровых добровольцев обнаружены различия почти на всём диагностируемом спектральном диапазоне (рис. 1)
Рис. 1. Распределение коэффициентнтов флюоресцентной контрастности барабанной перепонки у пациентов с рубцом после оперативного вмешательства (красная полоса) и интактной ткани перепонки здоровых добровольцев (зеленая полоса).
Обращает на себя внимание уширение левого плеча спектра обратно рассеянного возбуждающего лазерного сигнала у тканей рубца. Это может свидетельствовать о наличии в рубцовой ткани более мелкодисперсных фракций структурных белков.
Для оценки вклада коллагена и эластина в общеинтегральный спектр флюоресценции вычисляли среднеинтегральное значение kf на диапазоне от 400 до 440 нм. В результате выявлено, что у группы здоровых добровольцев среднеинтегральное значение коэффициента флюоресцентной контрастности на участке 400-440 нм составило 0,39±0,13, в то время как у группы пациентов после шунтирования этот показатель составил 0,18±0,05, а у группы лазерной миринготомии 0,26±0,08. Сделан вывод о том, что состояние структурных белков в ткани барабанной перепонки после лазерной миринготомии ближе к норме, чем после шунтирования.
Библиографический список
1. , Овчинников Г. Н., , Опыт применения хирургических лазеров в лечении больных с заболеваиями верхних дыхательных путей и уха// Вестник оториноларингологии, 2009. №4. С. 36-39.
2. Лазеры и волоконная оптика в биомедицинских исследованиях// Саратов: Изд-во Саратов. ун-та, 1998. с. 302
3. Smirnova O. D., Rogatkin D. A., Litvinova K. S. Collagen as in vivo quantitative fluorescent biomarkers of abnormal tissue changes // Journal of Innovative Optical Health Sciences. 2012. V.5, №2. P. 71-79.
4. ., Лазерная допплеровская флоуметрия микроциркуляции крови: Руководство для врачей. М.: , 20с.
5. , , А. Лазерофорез гиалуроновой кислоты улучшает микроциркуляцию кожи// Косметика и медицина 2011; №1. с.48–52.
Сведения об авторах
– интерн ГБУЗ МО МОНИКИ им. , г.
– научный сотрудник, г.; *****@***ru тел.: +7(903)
Вид доклада: устный
