На правах рукописи
НУРТДИНОВ РУСЛАН МИНСАГИРОВИЧ
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОЦЕССОВ ОСАХАРИВАНИЯ СОЛОМЫ И ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ГИДРОЛИЗАТОВ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ САХАРОМИЦЕТОВ
03.01.06 – Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата технических наук
Казань - 2012
Работа выполнена на кафедре химической кибернетики федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Казанский национальный исследовательский технологический университет» (ФГБОУ ВПО КНИТУ)
Научный руководитель: кандидат технических наук,
Официальные оппоненты: ,
доктор технических наук, профессор,
заведующий кафедрой промышленной
биотехнологии ФГБОУ ВПО «Казанский национальный исследовательский технологический университет»
,
доктор технических наук, профессор,
заведующий кафедрой инженерной
кибернетики ФГБОУ ВПО «Казанский государственный энергетический университет»
Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Российский химико - технологический университет имени », г. Москва
Защита состоится 18 апреля 2012 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.080.02 при ФГБОУ ВПО «Казанский национальный исследовательский технологический университет» 8 (зал заседаний Ученого совета, А-330).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанского национального исследовательского технологического университета.
Автореферат разослан «___»___________2012 г.
Ученый секретарь Степанова
диссертационного совета Светлана Владимировна
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность работы. Возрождение крупнотоннажной промышленной биотехнологии в Российской Федерации непосредственно связано с освоением сырьевой базы на основе возобновляемого растительного сырья. Целлюлозосодержащее сырье в стране имеется практически в неограниченных количествах в виде древесины, соломы, твердых бытовых отходов и т. д. Однако его эффективное превращение в биологически усвояемые сахара – сложная задача, над которой работают научные коллективы во всем мире. При этом исследуются возможности использования непосредственно микроорганизмов, комплексов целлюлолитических ферментов, химических гидролизующих агентов для эффективного превращения непищевого сырья в усвояемые сахара.
В настоящее время отсутствует исследовательское технологическое оборудование, позволяющее на лабораторной стадии оценить технико-экономические характеристики, энергетические показатели соответствующих технологий, что затрудняет решение вопросов определения перспективы внедрения в производство получаемых научных результатов. Поэтому разработка научного оборудования для осуществления процессов деполимеризации целлюлозосодержащего сырья с возможностью исследования их кинетики и энергоемкости является чрезвычайно актуальной задачей.
Одним из наиболее дешевых и имеющихся в наличии видов целлюлозосодержащего сырья для крупнотоннажного производства энергоносителей, в частности топливного спирта, является солома. Масса производимой ежегодно соломы злаковых и крупяных культур в России составляет 80 – 100 млн. т. В республике Татарстан объем производства соломы достигает 6,6 млн. т. в год, в том числе ржаной соломы – 880 тыс. т в год. Это огромная потенциальная сырьевая база.
Наконец, существующая инфраструктура сельского хозяйства позволяет решить задачу доставки соломы на переработку при условии расположения перерабатывающего предприятия вблизи элеватора.
Учитывая низкую степень эффективного использования соломы зерновых культур в настоящее время, в работе основное внимание уделено проблеме осахаривания данного вида вторичного сырья.
Наконец, учитывая рост требований к ресурсо - и энергосбережению создаваемых технологий, актуальность работы состоит в технологическом решении по рекуперации гидролизующего агента, а также в энергетическом критерии мониторинга новых ферментных препаратов.
Экспериментальная часть работы выполнялась в рамках гранта Фонда содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере "Разработка технологического регламента на выращивание чистой культуры дрожжей» (государственный контракт № 000р/7406 от 01.01.2001).
Целью настоящей работы является сравнительное исследование кинетики химического и ферментативного гидролиза целлюлозного сырья на основе удельных энергетических затрат и оценка качества гидролизатов в процессах культивирования сахаромицетов.
В качестве основного объекта исследования выбраны процессы гидролиза и ферментолиза соломы зерновых культур, как одного из перспективных видов возобновляемого сырья.
В соответствии с поставленной целью были решены следующие задачи:
- разработаны экспериментальные установки, исследована кинетика процессов гидролиза и ферментолиза целлюлозосодержащего и крахмалистого сырья на примере соломы и отрубей зерновых культур;
- экспериментально оценены удельные затраты энергии в процессах гидролиза и ферментолиза соломы зерновых культур, в том числе на нагрев и механическое перемешивание гидролизуемой массы.
Научная новизна:
- экспериментально оценены параметры процессов гидролиза соломы и отрубей зерновых культур разбавленной сернистой кислотой при варьировании режимных параметров;
- оценены параметры процесса гидролиза соломы, предложенного в качестве базового для сравнения энергетической эффективности ферментативного гидролиза целлюлозосодержащих видов вторичного сырья и позволяющего осуществлять мониторинг ферментных препаратов, выводимых на рынок биотехнологической продукции;
- впервые экспериментально показана возможность рекуперации сернистого газа в процессах гидролиза соломы за счет тепла, запасенного в гидролизате;
- предложен энергетический критерий сравнительной оценки альтернативных процессов деполимеризации целлюлозосодержащего сырья, апробированный на примере использовании сернистой кислоты и ферментов фирмы Genencor International;
- предложен и научно обоснован комбинированный состав гидролизатов для приготовления сред, используемых при наращивании биомассы сахаромицетов.
Практическая значимость работы.
Создан комплекс лабораторного оборудования для исследования процессов химического и ферментативного гидролиза возобновляемого целлюлозосодержащего и полисахаридного сырья. Оборудование позволяет осуществлять процессы деполимеризации в широком диапазоне температур: от 30 °С до 190 °С с возможностью определения их кинетических и энергетических характеристик. Предусмотрена регистрация затрат тепловой и механической энергии при осуществлении указанных процессов. Осуществлено сравнительное исследование процессов гидролиза и ферментолиза соломы зерновых культур, продемонстрировавшее работоспособность созданного оборудования и его соответствие поставленным задачам. Комплекс оборудования внедрен в учебный процесс и используется в исследованиях, проводимых в лаборатории «Инженерные проблемы биотехнологии» ФГБОУ ВПО КНИТУ (г. Казань). Предложенный энергетический критерий сравнительной оценки процессов гидролиза может быть использован на стадии ТЭО проектируемых производств, в которых осуществляются гидролитические процессы деполимеризации целлюлозосодержащего сырья. Разработанная аппаратура и методика исследования позволяют осуществлять мониторинг новых ферментных препаратов.
Апробация работы. Основные положения и результаты диссертационной работы докладывались на международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы совершенствования технологии, производства и переработки продукции сельского хозяйства» (Йошкар-Ола, 2009г.), научно-практической конференции «Инновационные подходы к естественнонаучным исследованиям и образованию»: (Казань, 2009г), X - ХI Международных конференциях молодых ученых «Пищевые технологии и биотехнологии» (Казань, г. г.), XIII Международной конференции молодых ученых, студентов и аспирантов «Полимеры: Синтез исследование свойств, модификация и переработка высокомолекулярных соединений» – V Кирпичниковские чтения (Казань, 2009г), Республиканскаой школе студентов и аспирантов «Жить в XXI веке» (Казань 2009г.), Международной конференции «Катализ для переработки возобновляемого сырья: топливо, энергия, химические продукты» (Новосибирск, 2010г.), V-VI Московских международных конгрессах «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, г. г.), на ежегодных научно-технических конференциях ФГБОУ ВПО «Казанский национальный исследовательский технологический университет» ( гг.).
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликованы 8 статей в рецензируемых научных журналах и изданиях, рекомендованных ВАК, и 11 докладов на всероссийских и международных конференциях и других публикаций.
Личный вклад автора. В диссертации обобщены результаты экспериментальных работ, в которых автор принимал непосредственное участие. Личный вклад автора заключается в комплексировании технических средств исследовательского комплекса, позволяющего реализовать предложенный автором подход к анализу эффективности гидролизующих агентов на основе величины удельных энергозатрат, в проведении экспериментальных исследований процессов гидролиза и ферментолиза отходов зернового хозяйства и процессов культивирования сахаромицетов на средах с гидролизатами соломы, в обсуждении и представлении результатов работы на конференциях, а также в подготовке их к публикации. Соавторы не возражают против использования результатов исследований в материалах диссертации.
Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, 4 глав, заключения, списка использованной литературы и приложения. Материал изложен на 129 страницах текста и содержит 22 таблицы и 39 рисунков. Список литературы включает 148 источников.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Во введении изложены общие сведения о решаемых в работе научно-технических задачах, обоснована необходимость и показана актуальность разработки энергетически эффективных процессов деполимеризации целлюлозного и полисахаридного сырья.
В первой главе представлен обзор научных публикаций, посвященных проблеме деполимеризации лигноцеллюлозного и полисахаридного сырья, обоснована актуальность исследований в этой сфере.
Показано, что одними из наиболее актуальных и требующих решения проблем биотехнологии являются:
- повышение экономической эффективности процессов деполимеризации целлюлозного и полисахаридного сырья;
- достижение достаточно высокой концентрации сахаров в гидролизатах, предназначенных для последующей микробиологической переработки;
- поиск энергосберегающих технологий в исследуемой сфере.
Экспериментальные исследования в данной сфере в Российской Федерации сейчас ведутся в незначительном числе университетов и исследовательских центров, например, в Казанском национальном исследовательском технологическом, Новосибирском государственном университетах. Развитие исследований сдерживается отсутствием серийно выпускаемого специализированного лабораторного технологического оборудования.
Во второй главе представлено описание разработанного комплекса лабораторных установок, обеспечивающих проведение процессов низкотемпературного, высокотемпературного и ферментативного гидролиза растительного сырья. Комплекс включает: 1) лабораторную установку получения химически чистой сернистой кислоты на основе процесса горения серы в кислороде, представляющую собой кварцевую трубку для сжигания серы, абсорбер с нерегулярной насадкой, рециркуляционный насос, подающий разбавленную кислоту на орошение насадки абсорбера для хемосорбции сернистого газа; 2) установку низкотемпературного гидролиза (до 120 °С) на основе аппарата с рамной мешалкой особой конструкции и фильтрационным пробоотборником, снабженным выносным теплообменником для охлаждения отбираемой пробы, 3) установку для исследования кинетики высокотемпературного гидролиза (до 190 °С) с возможностью отбора до 5 проб за процесс, 4) установку ферментолиза на базе легко разборного ферментера объемом 6 л, снабженного механической мешалкой с нижним приводом и обеспечением автоматического поддержания температурного режима и рН гидролизуемой массы. Разработанная малогабаритная лабораторная универсальная установка для исследования кинетики и стехиометрии реакций низкотемпературного гидролиза дисперсных твердофазных субстратов растительного происхождения (рис.1, рис.2) позволяет варьировать температуру от 50 °С до 120 °С и оценивать возможности использования дешевых отходов в процессах микробиологического синтеза. Загрузка измельченного сырья, воды и раствора гидролизующего агента осуществляется через горловину 2, приваренную к верхней части корпуса 1.
После одновременной загрузки всех компонентов, образовавшаяся суспензия гидролизуемого материала быстро нагревается до заданной температуры с помощью «внешнего» нагревателя 5, представляющего собой спираль в керамической изоляции, намотанную вокруг корпуса аппарата. При достижении заданной температуры, «внешний» нагреватель отключается и включается автоматический терморегулятор, подающий напряжение на встроенный нагреватель патронного типа 6. В ходе процесса гидролиза отбор проб осуществляется через сетчатый фильтр 7, установленный на уровне середины столба жидкой фазы, и холодильник типа «труба в трубе» 8.
|
2 – Горловина загрузки компонентов 3 – Предохранительный клапан 4 – Рамная мешалка 5 – Нагреватель электрический 2,0 квт 6 – Нагреватель электрический патронного типа 0,5 квт 7 – Фильтр сетчатый 8 – Холодильник типа «труба в трубе» 9 – Привод перемешивающего устройства, 300 вт 10 – Пробоотборная емкость, 50 мл. | В1 – Вентиль продувки фильтра В2 – Вентиль отбора проб В3 – Вентиль подачи охлаждающей воды Р – Манометр показывающий МПТС-100, 4 атм, кл.1,5 Т – Терморегулятор ОВЕН ТРМ1 с датчиком температуры ТСП 100 n – Регулятор оборотов мешалки дисплеем индикации потребляемой мощности. |
1 – Корпус гидролизера объемом 6 лРис.1. Принципиальная схема установки низкотемпературного гидролиза
Рис.2. Общий вид лабораторного гидролизера
Созданная лабораторная установка для исследования кинетики высокотемпературного гидролиза растительного сырья (рис.3) позволяет проводить процессы химического гидролиза в рабочем диапазоне температур от 100 °С до 190 °С при избыточном давлении до 1,6 МПа. Данная установка состоит из: 1) масляного термостата объемом 3 л с датчиком температуры ДТС 035-50М. В3-250, нагревателем мощностью 600 Вт и терморегулятором ТРМ1 фирмы ОВЕН, 2) шести капсул для гидролиза объемами по 30 мл. К одной из капсул подсоединен манометр типа МП4-УУ2 (кл.1,5) с диапазоном измерения избыточного давления до 1,6 МПа. Для заливки масляного термостата используется силиконовое масло ПМС-300.
Съем каждой из капсул производили через интервалы времени, равные 1/5 от заданной длительности эксперимента (1,5 часа). Извлекаемые из термостата капсулы немедленно погружали в воду, охлажденную до°С. Охлажденные пробы помещали в центрифужные пробирки для отделения не гидролизованного осадка. Разделение гидролизованных проб осуществляли на лабораторной автоматической центрифуге с охлаждением Rotina 380R при скорости вращения ротора 2113 об/мин в течение 15 минут. Отделенный от каждой пробы фугат в количестве 13 – 15 мл помещали во флаконы и хранили до анализа в холодильнике при 4 °С не более 1 суток.
1- емкость термостата; 2- штатив; 3- силиконовое масло; 4, 5- капсулы для гидролизуемого материала; 6 - термодатчик – термопреобразователь сопротивления платиновый ТСП-002; 7- манометр МП4-УУ2; 8- терморегулятор ТРМ1 фирмы ОВЕН.
Рис.3. Схема и общий вид установки для исследования кинетики процессов гидролиза при температуре 150 °С - 190 °С
Для изучения сложных биотехнологических процессов была использована исследовательская установка с компьютерной системой управления, включающая универсальный легко разборный биореактор, ультратермостат и блок перистальтических микродозаторов (рис.4).
Такая установка в составе комплекса позволяет осуществлять исследование процессов ферментативного гидролиза целлюлозосодержащего сырья при гидромодуле 1:10 и более и регулируемой температуре в диапазоне 30 ºС – 75 ºС.
|
|
Общая схема установки для ферментолиза несущественно отличается от стандартной ферментационной установки, оснащенной реактором с механической мешалкой. Кислотность контролируется рН-метром МУЛЬТИТЕСТ ИПЛ-513, титрование осуществляется по варианту одностороннего регулирования с подачей титранта с помощью перистальтического насоса-дозатора.
В ходе экспериментов использовали солому, а в качестве гидролизующих агентов минеральные кислоты и жидкие ферментные препараты фирмы Genencor International.
Разработаны рабочие инструкции по эксплуатации комплекса. Комплекс введен в эксплуатацию и используется в научных исследованиях и учебном практикуме, реализуемых лабораторией «Инженерные проблемы биотехнологии» КНИТУ. Техническая документация на экспериментальный образец комплекса передана в малое предприятие для организации его серийного производства. На основании этой документации осуществлен выпуск малой опытной партии лабораторного оборудования (3 гидролизера и 4 ферментолизера).
В третье главе дано описание использованных методов исследования.
При подготовке гидролизующего агента – сернистой кислоты концентрацию получаемого раствора определяли с помощью стандарт-титров.
При выполнении процессов гидролиза и ферментолиза соломы в отбираемых пробах анализировали содержание сухих веществ (СВ) с помощью влагомера марки МХ-50 и редуцирующих веществ (РВ) по методу Бертрана. Дополнительно в некоторых пробах гидролизатов определяли аминный азот по методу Кьельдаля с использованием анализатора J. P.Selecta S. O. В процессах низкотемпературного гидролиза и ферментолиза определяли энергетические затраты раздельно: на механическое перемешивание и на нагрев гидролизуемой массы. При анализе данных высокотемпературного гидролиза энергозатраты пересчитывали пропорционально длительности нагрева и продолжительности перемешивания, приводя их к условиям энергообеспечения низкотемпературного гидролиза. С целью точного определения затрат энергии на перемешивание был использован электродвигатель постоянного тока с измерением электрической мощности на якоре (обмотка статора при этом питалась от независимого стабилизированного источника, температура двигателя поддерживалась постоянной на уровне 40 °С ±1 °С за счет контура специального водяного охлаждения и вентиляции). В процессах высокотемпературного гидролиза осуществляли замер времени гидролиза вещества в каждой капсуле с точностью ± 2 с. Извлекаемые капсулы из ванны масляного термостата немедленно погружались в воду, охлажденную до 10 – 15 °С. При выполнении процессов ферментативного гидролиза отбор проб осуществлялся по времени с точностью ± 10 с. Кислотность среды поддерживалась автоматически с точностью ± 0,1 ед. рН. Подача титранта осуществлялась перистальтическим насосом (максимальный расход при диаметре рабочей трубки 3 мм составляет 1,9 л/час; объем минимальной дозы 0,55 мл). В качестве сравнения использовался процесс ферментолиза измельченной обеззоленной бумаги (целлюлозы).
Все пробы сырья для гидролиза и ферментолиза измельчались и фракционировались на сетках до размера частиц 0,5 - 1; 1 - 3 и > 3 мм. Пробы для ферментолиза подвергались предварительной обработке паром в автоклаве при температуре 120 °С в течение 6 часов.
В четвертой главе приведены результаты анализа периодических процессов гидролиза и ферментолиза пшеничной соломы, позволившие подтвердить соответствие созданного комплекса решаемым задачам.
Результаты сравнительного исследования гидролиза соломы серной и сернистой кислотами при концентрации их 2% масс. (рис.5, рис.6) показали, что сернистая кислота более предпочтительна, поскольку при ее применении образуется меньше летучих метаболитов, чем при использовании других минеральных кислот (рост давления в замкнутой емкости гидролизера не значителен – колебания давления и температуры взаимно почти пропорциональны).
В обоих процессах использовано по 200 г просушенной до постоянного веса измельченной соломы, гидромодуль 1:18,6. Конечная концентрация РВ на третий час процесса составила 1,7 – 1,75 % масс. при использовании серной кислоты и 1,85 – 1,9 % масс. при использовании сернистой кислоты. Точность поддержания температуры после выхода на режим составила ± 1 °С. При загрузке 400 г соломы (гидромодуль 1:8,8) была достигнута концентрация РВ 2,35 – 2,45 % масс. при применении серной кислоты. При этом прямой пропорциональности между величиной загрузки и максимальной концентрацией РВ не наблюдалось.
|
|
Рис.5. Изменения давления и температуры в процессе гидролиза соломы серной кислотой | |
|
|
Рис.6. Изменения давления и температуры в процессе гидролиза соломы сернистой кислотой |
При высокотемпературном гидролизе и варьировании концентрации сернистой кислоты исследовалась динамика содержания РВ в гидролизате (рис.7, рис.8).
Процессы проводились при гидромодуле 1:5,8. Стандартное отклонение определения РВ составило ± 0,3 % масс.
|
|
Рис.7. Изменения концентрации РВ в процессах гидролиза соломы концентрации сернистой кислоты | Рис.8. Изменения концентрации РВ в процессах гидролиза соломы |
Из графиков рис.7 и рис.8 следует, что влияние концентрации сернистой кислоты при температурах ниже 150 °С заметно проявляется, но при повышении температуры до 160 °С оно исчезает. Это может быть объяснено практически полным переходом в паровую фазу сернистого газа (разложение сернистой кислоты) при нагревании. При этом гидролиз, по-видимому, идет только за счет контакта жидкой и паровой фаз и определяется величиной межфазной поверхности, остающейся постоянной в течение процесса.
Оптимальная температура и продолжительность гидролиза соломы сернистой кислотой составили соответственно 160 °С – 170 °С и 30 – 35 минут. Увеличение температуры или продолжительности процесса не приводит к росту концентрации редуцирующих веществ за счет побочных реакций распада и карамелизации сахаров.
Влияния степени измельчения сырья на процесс гидролиза (от 3 мм до 1 мм) не наблюдалось. Повышение температуры до 170 °С позволяет снизить концентрацию сернистой кислоты до 1,18 % масс. При этом концентрация РВ достигает 4,05 - 4,2 % масс., а степень конверсии полисахаридов исходного сырья (соломы) составляет – 42 %.
Аналогичный комплекс работ, выполненный с использованием пшеничных отрубей, показал, что оптимальная температура гидролиза также близка к 160 °С. При этом достигается концентрация РВ 6,3 % масс. (рис.9).
В экспериментах (рис.9) гидромодуль составлял 1:5,8; концентрация сернистой кислоты – 1,18 % масс. Кроме редуцирующих веществ в гидролизате отрубей зафиксировано заметное содержание аминного азота. Концентрация аминного азота в пересчете на аммиак приведена в таблице 1.
Таблица 1.- Погрешность определения аминного азота в гидролизате отрубей
№ замера | 1 | 2 | 3 | Среднее знач. |
Концентрация, г/л | 0,292 | 0,298 | 0,296 | 0,296 |
Поскольку в соломе содержание протеинов в 4 раза меньше, чем в отрубях, предлагается использовать состав сред для генерации биомассы сахаромицетов, основанный на смеси гидролизатов соломы и отрубей в соотношении 1:0,5 – 1:1. При этом возможно наращивание биомассы сахаромицетов до 19 – 22 гАСД/л при уменьшенной в 2 - 3 раза стоимости углеродсодержащих источников сырья (солома и отруби вместо низкокачественного зерна). Это достаточно высокие показатели для линии чистой культуры и даже дрожжегенератора.
Применение сернистой кислоты предпочтительно по сравнению с использованием серной кислоты и по той причине, что сернистый газ после завершения гидролиза может быть отогнан с парами воды, за счет чего возможна частичная рекуперация титрующего агента. Степень рекуперации сернистой кислоты за счет отгона при сбросе избыточного давления с 0,4 до 0 МПа и снижения температуры гидролизата при испарении сернистой кислоты со 121 °С до 99 °С составила 72,9 % (таблица 2). Погрешность (стандартное отклонение) определения массы сернистой кислоты методом титрования составила ± 11,55 г (± 4,86 % от исходного количества).
Таблица 2.- Рекуперация сернистого газа
Общее количество сернистой кислоты | Высококонцентрированный отгон | Низкоконцентрированный отгон (при дополнительном нагреве) | Всего |
95,12 г | 69,4 г | 14,6 г | 84,0 г |
100 % | 72,9 % | 15,3 % | 88,2 % |
Исследование эффективности ферментолиза соломы показало низкий выход редуцирующих веществ (рис. 10).
Процессы ферментолиза и низкотемпературного гидролиза существенно уступают по параметрам процессам высокотемпературного гидролиза соломы (рис.11), в частности по величине удельной скорости нарастания РВ (%РВ/час).
 |
На основании выполненных исследований процесс гидролиза целлюлозосодержащего сырья сернистой кислотой при оптимальных параметрах (165 °С, 1,2% масс. сернистой кислоты, гидромодуль 1:6) нами предложен в качестве образцового для сравнительных оценок различных гидролизующих агентов.
Исследование качества гидролизатов соломы осуществлено путем сравнения показателей роста сахаромицетов на средах Ридера с глюкозой и редуцирующими веществами сернистокислотного гидролизата (табл.3).
Таблица 3.- Показатели роста сахаромицетов (раса 1986) на среде Ридера с глюкозой и гидролизатом соломы в качалочных колбах
Субстрат | Прирост биомассы, г/л | Средняя удельная скорость роста, час-1 | Удельная скорость роста на экспоненциальном участке, час-1 | Выход, г АСД г сахаров |
Глюкоза | 16,35 | 0,087 | 0,137 | 0,61 |
Гидролизат соломы | 7,05 | 0,08 | 0,108 | 0,31 |
Результаты экспериментов (таблица 3) свидетельствуют о достаточно высоком качестве гидролизатов. Снижение выхода биомассы и скорости роста на экспоненциальном участке определяется преимущественным наличием в гидролизате соломы пентоз. Возможность аэробного роста сахаромицетов в дрожжерастильных аппаратах с использованием содержащих пентозы гидролизатов соломы позволит в перспективе при создании производства топливных спиртов экономить более дорогие среды на основе гексоз, используя последние только на стадии брожения.
На основе результатов экспериментальных исследований был обоснован энергетический критерий эффективности гидролитических процессов:
Е =(Eи + Енп + Ен + Еп + Ем)/(РВ∙Vг)
где: Еи – затраты энергии на измельчение сырья, Енп – затраты энергии на тепловую предобработку сырья (при проведении процессов гидролиза отсутствуют), Ен – затраты энергии на нагрев гидролизуемой массы, Еп – затраты энергии на поддержание температуры во время гидролиза или ферментолиза, Ем – затраты на механическое перемешивание гидролизуемой массы, РВ – концентрация редуцирующих веществ, Vг – объем гидролизуемой массы.
Данный критерий является экстремальной функцией времени и температуры и может быть использован при выборе оптимальной продолжительности процессов гидролиза и ферментолиза, а также самих гидролизующих агентов (рис.11, 12).
Таким образом, ферментные препараты могут конкурировать с неорганическими гидролизующими агентами (сернистая кислота) при более глубокой предобработке сырья и достижении сравнимых концентраций редуцирующих веществ за приемлемое время процесса. При одинаковой предобработке сырья и достигаемой концентрации РВ длительности процессов ферментолиза превышают продолжительность гидролиза в условиях выполненных экспериментов более, чем в 15 раз.
Рис.11. Удельные затраты энергии и конверсия полисахаридов соломы при гидролизе сернистой кислотой в зависимости от температуры гидролиза
 |
Рис.12. Суммарные энергозатраты в процессах гидролиза и ферментолиза (без учета затрат на измельчение сырья)
Выполненные исследования позволяют рекомендовать в качестве оптимальной среды для микробиологических синтезов и дрожжегенерации сахаромицетов смесь гидролизатов соломы и отрубей в соотношении 1:1 (при концентрации РВ 5 % масс).
ВЫВОДЫ
1. Показано преимущество использования сернистой кислоты для гидролиза соломы перед традиционно используемой в процессах гидролиза целлюлозосодержащего сырья серной кислотой, состоящее в следующем:
- незначительное образование побочных летучих компонентов, что обеспечивает более высокое качество гидролизатов;
- возможность частичной рекуперации сернистого газа (от 50 % до 88 % от используемого количества в зависимости от начальной концентрации сернистой кислоты) за счет тепла, запасенного в гидролизате при температуре гидролиза 150 °С и выше.
2. Предложен энергетический критерий сравнения эффективности гидролитических процессов, включающий удельные затраты энергии на нагрев гидролизуемой массы и механическое перемешивание. Критерий соответствует концепции Региональной программы «Энергоресурсоэффективность в Республике Татарстан на 2006 – 2010 годы», предусматривающей непосредственную оценку технологических решений по снижению энергоемкости продукции в единицах энергии. Продемонстрировано применение критерия при мониторинге целлюлолитических ферментов.
3. Обосновано использование процесса гидролиза растительного сырья сернистой кислотой при температуре 160 °С - 170 °С, концентрации сернистой кислоты 1,2 % масс. и гидромодуле 1:6 в качестве сравнительного при оценке эффективности ферментных препаратов на основе целлюлаз.
4. Показано, что зависимости удельных затрат энергии и конверсии полисахаридов соломы от температуры в процессе гидролиза сернистой кислотой имеют экстремумы, что позволило определить оптимальные условия гидролиза на основе требований энерго- и ресурсосбережения.
5. Предложен полноценный по углероду и азоту смешанный состав гидролизатов соломы и отрубей для культивирования сахаромицетов.
6. Разработан исследовательский лабораторный комплекс и обосновано его применение для оценки технологических параметров процессов гидролиза и ферментолиза целлюлозосодержащего возобновляемого сырья.
Основное содержание диссертационной работы изложено в публикациях:
а) в рецензируемых научных журналах и изданиях, рекомендованных ВАК:
1. Мухачев комплекс учебной лаборатории энерго - и ресурсосбережения / , , , // Вестник Каз. технол. ун-та. – 2009.-№5. - С. 21 –26.
2. Разработка биотехнологического комплекса переработки растительного сырья и отходов сельскохозяйственного производства / , , // Вестник Каз. технол. ун-та.-2011.- №2.- С.143 – 147.
3. Предварительная обработка растительного сырья и отходов сельскохозяйственного производства с целью повышения выхода редуцирующих веществ / , , // Вестник Каз. технол. ун-та. – 2011.- №9.- С. 264 – 267.
4. Высокотемпературный гидролиз растительного сырья / , , // Вестник Каз. технол. ун-та.- 2011.- №10.- С.204 – 208.
5. Мухачев среда для генерации биомассы сахаромицетов / , , Р. М. Нуртдинов // Производство спирта и ликероводочных изделий.- 2011.- №3.- С. 20 – 23.
6. Кинетика ферментативного гидролиза растительного сырья / , , // Вестник Каз. технол. ун-та.-2011.- №14.- С.211 – 214.
7. Низкотемпературный гидролиз растительного сырья / , , // Вестник Каз. технол. ун-та№15.- С.150 – 154.
8. Понкратов управления поддержания рН в процессах ферментолиза растительного сырья / , // Вестник Каз. технол. ун-та. – 2011. - №22. - С.62-67.
б) в прочих публикациях по теме диссертационного исследования:
9. Лабораторная установка для исследования процессов гидролиза растительного сырья / , , // Материалы международной науч. - прак. конф., выпуск 11 Марийский государственный университет. – Йошкар - Ола. – 2009.- С.
10. Мухачев биотехнологического комплекса для научно-учебной лаборатории энерго - и ресурсосбережения / , , , , // Инновационные подходы к естественнонаучным исследованиям и образованию: материалы науч. - практ. конф. – Казань: ТГГПУ.-2009. – С. 248-253.
11. Сырьевая база для производства биоэтанола в Республике Татарстан / , , // Х Международная конференция молодых ученых «Пищевые технологии и биотехнологии» (г. Казань, 12-15 мая 2009 г.) Сборник тезисов докладов. – Казань. Изд-во «Отечество». – 2009. - С. 321.
12. Осипова гидролиза природных полисахаридов сернистой кислотой / , , , // Синтез, исследование свойств, модификация и переработка высокомолекулярных соединений – V Кирпичниковские чтения. Тезисы докладов. XIII Международная конференция молодых ученых, студентов и аспирантов.- Казань. – 2009. - С.348.
13. Шавалиев оснащение исследовательских работ в области совершенствования процессов комплексной переработки сельскохозяйственного сырья и отходов / , , , , // Материалы VI Московского международного конгресса, «Биотехнология: состояние и перспективы развития», часть 1 (Москва, 21-25 марта 2011г.).- М.: -биохим-технологии», РХТУ им. .- 2010.- С.252-253.
14. Эффективность комплексной переработки растительного сырья / , , // Материалы VI Московского международного конгресса, «Биотехнология: состояние и перспективы развития», часть 1 (Москва, 21-25 марта2011г.). - М.: -биохим-технологии», РХТУ им. .- 2010. - С.250-251.
15. Emelyanov V. M. Investigation of the Kinetics of straw Enzimolysis / E. M. Emelyanov, R.M. Nurtdinov, S. G. Mukhachev, A. R. Ablaev, R. T. Valeeva, G. A. Gadelshina// Catalysis for renewable sources: fuel, energy, chemicals. – Novosibirsk. – 2010. - Р.105.
16. Mukhachev S. G. Laboratory Equipment for the Study of Hydrolysis and Enzymolysis of Plant Raw Materials / S. G.Mukhachev, E. M. Emelyanov, M. F. Shavaliev, R. T. Valeeva, A. R. Ablaev, R.M. Nurtdinov, A. M. Builin// Catalysis for renewable sources: fuel, energy, chemicals. – Novosibirsk.- 2010.- Р.126.
17. Харина эффективности производства кормовых дрожжей / , , Р. М. Нуртдинов // Материалы VI Московского международного конгресса, «Биотехнология: состояние и перспективы развития», часть 1 (Москва, 21-25 марта2011г.) М.: -биохим-технологии», РХТУ им. .- 2011. - С.332-333.
18. Мухачев комплекс для исследования процессов гидролиза растительного сырья / , , // Материалы VI Московского международного конгресса, «Биотехнология: состояние и перспективы развития», часть 1 (Москва, 21-25 марта2011г.). - М.: -биохим-технологии», РХТУ им. . 2011.- С.357-358.
19. Понкратов система управления в области процессов ферментативного гидролиза ., , , // Материалы VI Московского международного конгресса, «Биотехнология: состояние и перспективы развития», часть 1 (Москва, 21-25 марта2011г.). - М.: -биохим-технологии», РХТУ им. . 2011.- С.365-366.
Заказ Тираж
Издательство Казанского национального исследовательского технологического университета
Офсетная лаборатория Казанского национального исследовательского технологического университета. Казань, К. Маркса, 68
