О. Н. СОШНИКОВА, С. В. ГРОНСКИЙ1, Н. П. ЗАКАТАЕВА1
Национальный исследовательский ядерный университет «МИФИ»
1, Москва
ИЗУЧЕНИЕ ФЕНОТИПИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ ИНАКТИВАЦИИ ГЕНОВ, УЧАСТВУЮЩИХ В РАСПРЕДЕЛЕНИИ
МЕТАБОЛИЧЕСКИХ ПОТОКОВ УГЛЕРОДА В КЛЕТКАХ
БАЦИЛЛ
Гены pckA и ccpN, кодирующие, соответственно, фосфоенолпируват-карбоксикиназу и белок-репрессор генов глюконеогенеза, были последовательно делетированы на хромосоме штамма Bacillus amyloliquefaciens. Эти немаркированные генетические модификации были получены методом гомологичной рекомбинации с применением плазмидного репликона, температурочувствительного по репликации. Рекомбинантные плазмиды для интеграции мутаций сконструированы с помощью ПЦР-сплайсинга, что позволило избежать полярного эффекта на экспрессию дистальных генов. Изучены фенотипические свойства полученных штаммов Bacillus amyloliquefaciens.
