Экзамен 2014 г. Педиатрия
Вопросы для подготовки к экзамену по микробиологии
Раздел 1. Общая микробиология и вирусология.
1. Микробиология, как фундаментальная наука. Объекты изучения. Задачи медицинской микробиологии.
2. Роль медицинской микробиологии в прогрессе медицины и ее значение для практической деятельности врача - педиатра.
3. Исторические этапы в развитии микробиологии.
4. Пастера и его школы. Их значение для медицинской микробиологии.
5. Коха и его школы. Их значение для медицинской микробиологии.
6. Открытие фагоцитоза, как защитной реакции организма. Создание клеточной теории иммунитета (). Открытие гуморальных факторов иммунитета (П. Эрлих, Э. Беринг, Э. Ру, др.).
7. Роль отечественных ученых в развитии микробиологии: , , .
8. - основоположник вирусологии. Развитие вирусологии во второй половине ХХ века.
9. Основные принципы систематики бактерий. Таксономические категории. Критерии вида.
10. Морфология, ультраструктура и химический состав бактерий. Особенности строения грамположительных и грамотрицательных бактерий. L-формы бактерий.
11. Строение актиномицетов, спирохет. Патогенные виды.
12. Основные методы исследования морфологии бактерий. Типы микроскопов (иммерсионный, темнопольный, фазовоконтрастный, люминесцентный, электронный). Принцип действия, особенности их устройства и области применения.
13. Тинкториальные свойства бактерий. Простые и сложные методы окраски (метиленовой синькой, фуксином, по Граму, Цилю - Нильсену, Нейссеру, Романовскому - Гимзе, Зырянову). Их особенности и области применения.
14. Морфология, структура риккетсий, хламидий, микоплазм; их биологические особенности.
15. Бактериоскопический метод диагностики, его суть, достоинства и недостатки.
16. Культуральные и морфологические свойства грибов; структура и химический состав клеток грибов. Патогенные и условно - патогенные виды (аспергиллы, пенициллы, кандида ).
17. Метаболизм бактерий. Ферменты. Методы изучения биохимической активности микроорганизмов.
18. Питание бактерий. Механизмы переноса питательных веществ в бактериальную клетку. Типы питания.
19. Энергетический метаболизм бактерий. Особенности энергетического метаболизма аэробных, анаэробных, факультативно - анаэробных бактерий, микроаэрофилов.
20. Рост и размножение бактерий. Фазы размножения микробов в жидкой питательной среде.
21. Основные принципы и методы культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов. Питательные среды и их классификация. Особенности состава и области применения общеупотребляемых, дифференциально - диагностических, элективных, специальных сред. Методы создания анаэробиоза.
22. Принцип и методы выделения чистых культур микроорганизмов.
23. Методы культивирования риккетсий, хламидий, микоплазм.
24. Бактериологический метод диагностики. Его суть, основные этапы.
25. Современные принципы классификации и номенклатуры вирусов.
26. Понятие о вирионе и вирусе, их определение. Морфология и структура вирионов. Вироиды, вирусоиды. Прионы.
27. Химический состав вирусов. Отличия структурной организации и химического состава вирусов от бактерий.
28. Репродукция вирусов. Основные стадии взаимодействия вирусов с клеткой хозяина. Особенности репродукции ДНК - и РНК-содержащих вирусов. Виды взаимодействия вирусов с клеткой хозяина и их значение в патогенезе вирусных инфекций.
29 Культивирование вирусов in vitro (в клеточных культурах, в курином эмбрионе и в организме лабораторных животных).
29. Методы обнаружения (индикации) вирусов по цитопатическому действию, бляшкообразованию, внутриклеточным включениям, в реакции гемагглютинации и гемадсорбции и др...
30. Вирусы бактерий (бактериофаги). Строение. Фазы взаимодействия умеренного и вирулентного бактериофагов с клеткой.
31. Распространение бактериофагов в природе. Методы выделения. Лизогения и ее значение. Фаговая конверсия.
32. Применение бактериофагов в микробиологии и медицине.
33. Материальная основа и организация генетического аппарата у бактерий и вирусов. Внехромосомные элементы. Понятие о гено - и фенотипе. Особенности взаимосвязи генотипа и фенотипа у прокариот.
34. Изменчивость микроорганизмов. Модификационная изменчивость, ее механизмы и формы проявления у бактерий.
35. Генотипическая изменчивость. Мутации у бактерий и их виды. Механизмы репарации и их значение.
36. Генетические рекомбинации и их значение в изменчивости бактерий. Трансформация, трансдукция и конъюгация.
37. Плазмиды бактерий. Виды плазмид и их роль в детерминации патогенных признаков и лекарственной устойчивости бактерий.
38. Значение мутаций, рекомбинаций и репараций в эволюции микроорганизмов. Теоретическое и практическое значение учения о генетике бактерий и вирусов для микробиологии и медицины.
39. Генодиагностика. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Суть, достоинства, практическое применение.
40. Распространение микроорганизмов в окружающей среде. Понятие о микробных ценозах. Факторы регуляции микробиоценозов.
41. Микроэкология организма человека. Роль нормальной микрофлоры в норме и патологии. Методы изучения роли нормальной микрофлоры. Гнотобиология.
42. Микрофлора кожи, ротовой полости, слизистых оболочек дыхательных путей, пищеварительной и урогенитальной систем здорового человека.
43. Микрофлора новорожденных, её становление в течение первого года жизни. Влияние механизма родов, санитарного состояния окружающей среды при родах совместного или раздельного пребывания матери и ребёнка в первые дни жизни, грудного или искусственного вскармливания на динамику колонизации организма и состав микрофлоры ребенка.
44. Дисбактериоз (дисбиоз). Факторы, влияющие на его формирование. Методы диагностики. Профилактика и лечение дисбактериоза.
45. Применение бактериальных препаратов (пробиотики), для профилактики и лечения дисбактериоза, кишечных заболеваний у детей.
46. Действие на микроорганизмы физических факторов окружающей среды. Стерилизация. Цели, методы, аппаратура. Методы контроля режима стерилизации.
47. Действие на микроорганизмы химических веществ. Дезинфекция. Механизмы губительного действия на микробы различных химических веществ.
48. Действие на микроорганизмы биологических факторов. Антагонизм в микробных биоценозах. Бактериоцины.
49. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.
50. Возникновение, распространение и пути преодоления лекарственной устойчивости бактерий. Роль плазмид в резистентности микробов к лекарственным препаратам.
Раздел 2. Инфекция, иммунитет, аллергия.
1. Понятие: инфекция (инфекционный процесс), инфекционная болезнь. Условия возникновения инфекционного процесса.
2. Роль микробов в инфекционном процессе. Патогенность и вирулентность.
3. Факторы патогенности микроорганизмов: адгезины, ферменты, токсины и др. Их характеристика.
4. Микробные токсины. Сравнительная характеристика экзо - и эндотоксинов.
5. Факторы патогенности риккетсий, хламидий, микоплазм. Внутриклеточный паразитизм.
6. Пути проникновения микробов в организм. Распространение бактерий, вирусов и токсинов в организме больного.
7. Динамика развития инфекционной болезни. Периоды.
8. Формы инфекции: экзогенная и эндогенная, очаговая и генерализованная, моно - и смешанная, вторичная, реинфекция, суперинфекция, рецидив. Носительство патогенных микроорганизмов: механизмы, значение.
9. Понятие о раневых, респираторных, кишечных, урогенитальных; антропонозных, зоонозных и др. инфекциях. Механизмы и пути передачи инфекций: фекально-оральный, контактный, воздушно-капельный, половой, трансмиссивный, трансплацентарный и др.
10. Инфекционные свойства вирусов. Особенности патогенеза вирусных инфекций.
11. Понятие об иммунитете. Классификация различных форм иммунитета.
12. Роль окружающей среды и социальных факторов в инфекционном процессе.
13. Неспецифические факторы защиты организма человека от микробов, их возрастные особенности.
14. Фагоцитоз, фагоцитирующие клетки. Стадии фагоцитоза, их характеристика. Завершенный и незавершенный фагоцитоз. Методы изучения фагоцитоза.
15. Гуморальные неспецифические факторы защиты организма от микробов.
16. Неспецифические факторы противовирусной защиты.
17. Иммунная система организма человека. Иммунокомпетентные клетки, их основные функции. Понятие о межклеточной кооперации в иммуногенезе.
18. Антигены, гаптены. Характеристика.
19. Антигенная структура бактериальных клеток. Локализация, химический состав, специфичность. Их роль в инфекционном процессе и развитии иммунного ответа.
20. Антитела. Классы иммуноглобулинов. Их характеристика. Полные и неполные антитела. Динамика антителобразования. Методы их обнаружения.
21. Защитная роль антител в приобретенном иммунитете.
22. Антибактериальный, антитоксический, противовирусный иммунитет. Понятие об иммунологической памяти, иммунологической толерантности.
23. Местный иммунитет. Секреторные иммуноглобулины.
24. Инструктивные и конструктивные теории иммунитета.
25. Аллергия. Классификация аллергических реакций по Джеллу и Кумбсу.
26. Аллергические реакции гуморального (немедленного) типа (типы Сенсибилизация. Механизмы развития, проявления (анафилактический шок, сывороточная болезнь и др.). Десенсибилизация.
27. Аллергические реакции клеточного (замедленного) типа (тип 4) . Роль в противомикробном и противовирусном иммунитете.
28. Практическое использование кожно-аллергических проб (КАП) в диагностике инфекционных заболеваний.
29. Иммунный статус человека и его оценка: основные показатели и методы их определения.
30. Серологические реакции: понятие, механизм, практическое использование. Основные компоненты серологических реакций. Феномены проявления и способы регистрации серологических реакций.
31. Реакция агглютинации, разновидности, механизм. Практическое применение.
32. Реакция преципитации, разновидности, практическое применение.
33. Реакции иммунного лизиса (бактериолиз, гемолиз). Практическое применение.
34. Реакция связывания комплемента. Практическое применение.
35. Опсоно-фагоцитарная реакция. Практическое применение.
36. Реакция нейтрализации токсина. Практическое применение.
37. Реакция нейтрализации вирусов. Практическое применение.
38. Реакция иммобилизации микроорганизмов. Практическое применение.
39. Реакции с использованием меченых антител: иммунофлюоресценция (прямая и непрямая реакция Кумбса), иммуноферментный метод, радиоиммунный метод, иммуноблотинг.
40. Принципы вакцинопрофилактики и вакцинотерапии. Типы вакцин, их характеристика, способы приготовления. Адъюванты.
41. Плановые профилактические прививки.
42. Серотерапия и серопрофилактика. Гомологичные и гетерологичные сыворотки. Антитоксические, антибактериальные, антивирусные сыворотки. Иммуноглобулины (нормальные и направленного действия). Методы получения и способы применения. Побочные действия и методы их предупреждения.
Раздел 3. Частная медицинская микробиология.
1. Методы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний.
2. Принципы забора, хранения и транспортировки материала от больных для микробиологической диагностики инфекционных заболеваний.
3. Стафилококки. Виды, дифференцирующие признаки. Факторы патогенности и вирулентности. Заболевания, вызываемые стафилококками. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
4. Стрептококки. Классификация, свойства. Виды патогенных стрептококков. Роль в патологии человека. Особенности патогенеза. Микробиологическая диагностика стрептококковых заболеваний. Специфическая профилактика и терапия.
5. Роль стрептококков в развитии скарлатины, ревматизма. Микробиологическая диагностика и профилактика.
6. Менингококки. Свойства. Серологические группы. Микробиологическая диагностика различных клинических форм менингококковых инфекций. Бактерионосительство. Специфическая профилактика.
7. Гонококки. Свойства. Особенности патогенеза и иммунитета. Микробиологическая диагностика острой и хронической гонореи. Специфическая профилактика и терапия.
8. Эшерихии. Физиологическая роль кишечной палочки. Серовары эшерихий, их роль в этиологии заболеваний у человека. Иммунитет. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
9. Шигеллы. Классификация. Свойства. Микробиологическая диагностика острой и хронической форм дизентерии. Специфическая профилактика и терапия.
10. Сальмонеллы - возбудители брюшного тифа и паратифов А, В. Классификация, свойства. Патогенез брюшного тифа. Микробиологическая диагностика заболевания и бактерионосительства. Специфическая профилактика и терапия.
11. Сальмонеллы - возбудители сальмонеллезов. Классификация, свойства. Патогенез. Микробиологическая диагностика, профилактика.
12. Клебсиеллы. Классификация, свойства. Этиологическая роль при склероме, озене, пневмонии и других заболеваниях. Роль во внутрибольничных инфекциях. Микробиологическая диагностика.
13. Синегнойная палочка. Классификация, свойства. Факторы патогенности. Патогенность для человека. Роль в возникновении внутрибольничных инфекций. Микробиологическая диагностика. Этиотропная терапия и профилактика.
14. Иерсинии. Возбудители кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза. Классификация, свойства. Биологические особенности. Патогенность для человека и животных. Микробиологическая диагностика. Профилактика.
15. Иерсинии. Возбудитель чумы. Классификация, свойства. Факторы патогенности. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
16. Бруцеллы. Виды бруцелл, свойства. Факторы патогенности. Патогенез, иммунитет при бруцеллезе. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
17. Возбудитель туляремии. Характеристика. Факторы патогенности. Патогенез и иммунитет при туляремии. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
18. Возбудитель сибирской язвы. Классификация, свойства. Патогенность для человека и животных. Микробиологическая диагностика различных клинических форм сибирской язвы. Специфическая профилактика и терапия.
19. Особенности микробиологической диагностики карантинных инфекций. Экспресс - диагностика.
20. Коринебактерии. Возбудитель дифтерии. Классификация, свойства. Факторы патогенности. Патогенез. Иммунитет и методы его выявления. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
21. Микобактерии. Возбудитель туберкулеза. Классификация, свойства. Экология, особенности патогенеза, иммунитета. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
22. Бордетеллы. Возбудители коклюша и паракоклюша. Классификация. Свойства. Патогенез, иммунитет. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
23. Вибрионы. Возбудители холеры. Свойства, факторы патогенности. Патогенез, иммунитет при холере. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
24. Кампило – и хеликобактерии. Классификация. Свойства. Патогенность для человека и животных. Патогенез кампилобактериозов у человека. Роль хеликобактерий в возникновении гастритов, язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки. Микробиологическая диагностика. Профилактика и терапия.
25. Клостридии столбняка. Классификация, свойства микробов, токсинов. Патогенез. Микробиологическая диагностика столбняка. Специфическая профилактика и терапия.
26. Клостридии ботулизма. Свойства микробов, характеристика ботулотоксинов. Патогенез. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
27. Клостридии газовой гангрены. Классификация, свойства микробов, токсинов. Патогенез заболевания. Микробиологическая диагностика анаэробной и газовой гангрены. Специфическая профилактика и терапия.
28. Клостридии псевдомембранозного колита. Классификация, свойства. Микробиологическая диагностика. Этиотропное лечение и профилактика.
29. Бактероиды. Классификация, свойства. Факторы патогенности. Особенности патогенеза заболеваний, вызываемых бактероидами. Иммунитет. Микробиологическая диагностика. Профилактика и терапия.
30. Трепонемы сифилиса. Свойства. Патогенез сифилиса, иммунитет. Врожденный сифилис. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
31. Боррелии возвратных тифов - эпидемического и эндемического возвратных тифов, болезни Лайма. Классификация, свойства. Патогенез, иммунитет. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
32. Лептоспиры. Классификация, свойства. Особенности патогенеза. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
33. Риккетсии. Возбудители эпидемического, эндемического сыпных тифов, болезни Брилля, Q-лихорадки, северо-азиатского риккетсиоза. Классификация, свойства. Патогенез, иммунитет. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика.
34. Хламидии. Классификация, свойства. Хламидийные инфекции. Роль хламидий в патологии беременности и поражении плода. Микробиологическая диагностика. Профилактика.
35. Микоплазмы. Классификация, свойства. Микоплазмозы. Роль микоплазм в патологии беременности и поражении плода. Особенности патогенеза и иммунитета. Микробиологическая диагностика. Профилактика.
36. Вирусы гриппа. Классификация, свойства, антигенная изменчивость. Особенности патогенеза и иммунитета. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
37. Парамиксовирусы. Вирусы парагриппа человека 1-5 типы. Роль в патологии человека. Лабораторная диагностика. Профилактика.
38. Парамиксовирусы. Вирус эпидемического паротита. Классификация, свойства. Экология, особенности патогенеза и иммунитета. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
39. Парамиксовирусы. Вирус кори. Классификация, характеристика. Экология, особенности патогенеза, иммунитета. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Программа ВОЗ по глобальной ликвидации кори.
40. Тогавирусы. Вирус краснухи. Классификация, характеристика. Экология, особенности патогенеза, иммунитета. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Программа ВОЗ по ликвидации синдрома врожденной краснухи.
41. Аденовирусы. Классификация, свойства. Персистенция. Онкогенные серотипы аденовирусов. Лабораторная диагностика.
42. Пикорнавирусы. Вирус полиомиелита. Классификация, характеристика. Экология, особенности патогенеза и иммунитета. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Программа ВОЗ по глобальной ликвидации полиомиелита; результаты ее реализации в России.
43. Вирусы Коксаки А, В, ЕСНО. Классификация, характеристика. Особенности патогенеза, иммунитета. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
44. Ротавирусы. Классификация, характеристика. Особенности патогенеза, иммунитета. Лабораторная диагностика. Профилактика и терапия.
45. Вирус клещевого энцефалита. Классификация, характеристика. Экология, патогенез, иммунитет. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и терапия. Роль отечественных ученых в изучении инфекции (, , и др.).
46. Герпесвирусы, патогенные для человека: простого герпеса 1и 2 типов, ветряной оспы - опоясывающего герпеса, цитомегалии, Эпштейна-Барр. Классификация, свойства, вызываемые ими заболевания. Персистенция. Роль герпесвирусов в патологии беременности и поражении плода. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
47. Рабдовирусы. Вирус бешенства. Характеристика. Экология, патогенез, иммунитет. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
48. Вирусы гепатитов А, В, С, Д, Е, G, TTV. Классификация, характеристика. Экология, особенности патогенеза и иммунитета. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и терапия.
49. Вирус иммунодефицита человека. Классификация. Характеристика ВИЧ. Экология, особенности патогенеза и иммунитета. Лабораторная диагностика. Профилактика и терапия.
50. Вирус натуральной оспы. Классификация, характеристика. Экология, особенности патогенеза, иммунитет. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Глобальная ликвидация натуральной оспы. Вклад нашей страны в программу ликвидации натуральной оспы.
51. Онкогенные вирусы. Классификация, характеристика. Роль в канцерогенезе человека и животных. Вирусогенетическая теория возникновения опухолей .
52. Коронавирусы. Вирус ТОРС (SARS). Классификация, свойства. Роль в патологии человека на современном этапе. Лабораторная диагностика. Профилактика.
53. Медленные вирусные инфекции. Прионы. Биологические особенности. Заболевания человека и их патогенетические особенности. Профилактика.
При ответе на вопросы по частной микробиологии рекомендуется придерживаться следующего плана:
1. Таксономия возбудителя: для бактерий - семейство, род, вид; для вирусов - ДНК или РНК - геномные вирусы, семейство, род, вид, серогруппа.
2. Характеристика бактериального возбудителя: морфологические, тинкториальные, культуральные, биохимические, антигенные свойства, факторы патогенности, резистентность к различным факторам.
3. Характеристика вирусного возбудителя: тип нуклеиновой кислоты, тип симметрии, размеры (мелкие, средние, крупные), сложность организации (простые, сложные); антигенные свойства, культивирование in vitro, способы индикации и идентификации, резистентность к различным факторам.
4. Вызываемые заболевания: экология, краткая эпидемиологическая характеристика (источники инфекции, механизм, пути и факторы передачи, восприимчивый коллектив), особенности патогенез, основные клинические проявления, особенности иммунитета.
5. Микробиологическая диагностика: исследуемый материал, применяемые методы диагностики.
6. Специфическая профилактика и терапия (вакцины, сыворотки, бактериофаги, иммуноглобулин, пробиотики).
Педиатрия, 2014 г.
П Е Р Е Ч Е Н Ь
практических навыков и умений, которыми должен владеть студент,
изучивший курс микробиологии, вирусологии
Уметь:
1. приготовить фиксированные микроскопические препараты из патологического материала (гной) и из чистых культур микроорганизмов
2. окрашивать препараты простым методом, по Граму
3. работать с иммерсионной системой
4. проводить взятие, доставку и хранение биоматериалов для основных микробиологических исследований
5. проводить бактериологическое исследование
6. интерпретировать результаты микробиологических методов диагностики инфекционных заболеваний
7. учитывать и интерпретировать результаты определения чувствительности бактерий к антибиотикам
8. заполнять бланк-направление в баклабораторию и интерпретировать результаты бланка-ответа из баклаборатории (соответственно формы № 000/у и № 000/у, утвержденные МЗ СССР 04.10.1980 г. № 000)
Перечень практических навыков и умений и эталоны ответов
по их выполнению студентами факультета ФМО по курсу микробиологии, вирусологии
1. Приготовить фиксированные микроскопические препараты из патологического материала (гной) и из чистых культур микроорганизмов.
Ответ:
Техника приготовления препарата из гноя:
На предметное стекло нанести каплю физиологического раствора, в которую внести гной и равномерно распределить его петлей. Стекло должно находится в чашке Петри; категорически запрещается готовить мазки на предметном стекле, лежащем на столе! Препарат высушивают и фиксируют в смеси Никифорова в течение 20 мин.
Техника приготовления препарата из чистых культур микроорганизмов:
На обезжиренное предметное стекло наносится капля физиологического раствора. Стекло должно находится в чашке Петри; категорически запрещается готовить мазки на предметном стекле, лежащем на столе! Прокаленной и остуженной бактериологической петлей берется немного биомассы культуры, выросшей на плотной питательной среде. Культуру суспензируют в капле физиологического раствора до появления легкой мути, после чего остатки биомассы на петле высушивают и сжигают в пламени спиртовки. Полученную взвесь равномерно распределяют остуженной петлей круговыми движениями на площади диаметром 1-1,5 см. Препарат высушивают и фиксируют в пламени в течение 6 сек.
Для приготовления мазка из культуры, выросшей в жидкой питательной среде, на предметное стекло наносят каплю культуры петлей или пастеровской пипеткой и равномерно распределяют ее петлей. Высушивают и фиксируют в пламени в течение 6 сек.
С обратной стороны стекла препараты из культур очерчивают карандашом, так как тонкие мазки почти не заметны. На лицевой стороне стекла указывают номер культуры.
2. Окрашивать препараты простым методом, по Граму.
Ответ:
Простые методы окраски предусматривают использование одного красителя и позволяют изучить морфологию бактерий. Краситель наносится на поверхность мазка, время окраски фуксином Пфейффера (1:10) составляет 1-2 мин., щелочным раствором метиленового синего Леффлера – 3-5 мин. После окраски красители сливают, препарат промывают водой и высушивают.
Окраска по методу Грама:
- на препарат поместить фильтровальную бумажку, пропитанную раствором генцианвиолета (модификация Синева), смочить водой, красить 2 мин., слить;
- налить раствор Люголя — 1 мин., слить;
- обесцветить 96° спиртом до отхождения струек краски, промыть водой;
- докрасить водным фуксином Пфейффера (1:10) — 1 мин., промыть водой;
- высушить фильтровальной бумагой.
При окраске этим методом грамположительные микроорганизмы окрашиваются в фиолетовый, а грамотрицательные - в розово-красный цвет, что связано с особенностями строения и состава клеточной стенки.
3. Работать с иммерсионной системой.
Ответ:
Иммерсионная микроскопия проводится следующим образом:
Конденсор поднять вверх до упора. На приготовленный препарат нанести каплю иммерсионного масла, повернуть револьвер до отметки иммерсионного объектива (х100) и с помощью макровинта под контролем глаза осторожно опустить тубус микроскопа до погружения объектива в масло. Затем, глядя в окуляр, макровинтом установить ориентировочный фокус. Нельзя допускать соприкосновения объектива с препаратом, т. к. это может привести к поломке фронтальной линзы. Провести окончательную фокусировку препарата микровинтом, вращая его в пределах только одного оборота.
По окончании микроскопии поднять тубус, снять препарат, осторожно вытереть масло с иммерсионного объектива и перевести на объектив х10.
4. Проводить взятие, доставку и хранение биоматериалов для основных микробиологических исследований.
Ответ:
Общими требованиями к процедуре отбора, транспортировки и хранения проб являются:
1. Знание оптимальных сроков для взятия материала для исследования.
2. Взятие материала производить, учитывая место максимальной локализации возбудителя, пути его выделения в окружающую среду.
3. Отбор материала для исследования проводить в необходимом объеме с обеспечением условий, исключающих контаминацию проб.
4. Материал берут до начала антимикробной терапии или когда содержание введенного в организм препарата становится минимальным.
5. Материал доставлять немедленно или не позднее 2 ч. Допускается хранение материала в холодильнике при +40 не более 6 ч, кроме ликвора! При увеличении времени доставки проб до 48 ч необходимо использовать транспортные среды.
6. Материал доставлять проинструктированным медработником в контейнерах, не допуская опрокидывания. Категорически запрещается доставка материала в лабораторию обследуемыми лицами.
7. В случае несоблюдения условий образцы не подлежат обработке и об этом сообщается лечащему врачу для проведения повторного забора материала.
5. Проводить бактериологическое исследование.
Ответ:
Бактериологический метод исследования является «золотым стандартом» при диагностике инфекционных заболеваний.
Цель бакметода: выделение чистой культуры предполагаемого возбудителя, ее идентификация с целью диагностики заболевания и определение антибиотикограммы с целью рациональной антибиотикотерапии.
Бактериологический метод включает 4 этапа:
1 этап – получение изолированных колоний предполагаемого возбудителя, для чего проводят:
- микроскопию исследуемого материала (при необходимости);
- выбор питательных сред с учетом физиологии предполагаемого возбудителя и вида исследуемого материала;
- посев исследуемого материала на питательные среды методом «штрих с площадкой» или по методу Голда;
- инкубирование посевов в термостате при t 37°С.
2 этап – накопление чистой культуры, для чего проводят:
- отбор характерных изолированных колоний с учетом культуральных и морфотинкториальных свойств;
- отсев изолированной колонии на скошенный агар;
- инкубирование посевов.
3 этап – видовая идентификация выделенной культуры и определение антибиотикограммы, для чего проводят:
- оценку характера роста на скошенном агаре, окраску по Граму, микроскопию для определения чистоты выделенной культуры и её соответствия характеристике отобранных колоний;
- посев на соответствующий «пестрый ряд» с целью изучения биохимических свойств выделенной культуры;
- посев в столбик полужидкого агара с целью определения подвижности выделенной культуры (в случае необходимости);
- определение антигенных свойств, фаголизабельности, факторов патогенности (в случае необходимости);
- определение антибиотикограммы.
4 этап – окончательная идентификация и определение антибиотикограммы, для чего проводят:
- учет результатов предыдущего этапа исследования;
- определение видовой принадлежности исследуемой культуры;
- учет и оценку антибиотикограммы;
- заполнение бланка-ответа результата бактериологического исследования.
6. Интерпретировать результаты микробиологических методов диагностики инфекционных заболеваний.
Ответ:
Общие принципы в интерпретации результатов микробиологических методов диагностики инфекционных заболеваний следующие:
1. Выделение патогенных микроорганизмов, не зависимо от их количества, подтверждает клинический диагноз (например: туберкулез, гонорея, брюшной тиф и т. д.). В случае выделения условно-патогенных микроорганизмов из нестерильных в норме биотопов, диагностически значимым является их количество, превышающее этиологический уровень (например: 105 и более при исследовании мочи, 103 и больше при исследовании желчи). Выделение условно-патогенных микроорганизмов из стерильных в норме биотопов свидетельствует об их этиологической роли.
2. Критериями оценки результатов серологических исследований являются диагностический титр и (или) выявление нарастания титра специфических антител в динамике заболевания в 2 и более раз при бактериальных инфекциях, в 4 и более раз – при вирусных инфекциях.
Определение специфических антител класса М и определение титра и авидности IgG позволяют установить стадию развития инфекции. Маркером острого заболевания или недавнего инфицирования являются IgM; рецидива и повторного заболевания – IgG.
Выявление в сыворотке одновременно IgG- и IgM-антител может быть свидетельством недавнего первичного инфицирования, поскольку срок исчезновения IgM-антител обычно составляет до 3 месяцев от начала инфекционного процесса. Но период циркуляции IgM антител может значительно варьировать в зависимости от инфекционного возбудителя и индивидуальных особенностей иммунного ответа организма. Выявление в крови высокоавидных IgG антител в этой ситуации позволяет исключить недавнее первичное инфицирование.
Исследование авидности позволяет отличить первичную инфекцию от реактивации. При реактивации хронической инфекции специфические IgG обладают высокой авидностью.
3. Критериями учета и оценки результатов аллергического исследования являются папула определенного диаметра, окруженная зоной гиперемии, в месте введения аллергена (например: при диагностике туберкулеза диаметр папулы не менее 5 мм). Для дифференциации инфекционной природы полученного результата от анамнестического или прививочного необходима повторная постановка кожно-аллергической пробы с выявлением увеличения диаметра папулы.
4. Методы экспресс-диагностики основаны на обнаружении и идентификации предполагаемого возбудителя в исследуемом материале с учетом антигенных свойств (РИФ, РЛА, ИФА) и/или определении специфичных ДНК/РНК (ПЦР).
7. Учитывать и интерпретировать результаты определения чувствительности бактерий к антибиотикам.
Основным методом определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам является диско-диффузионный метод. На поверхность чашки со специальной питательной средой наносят суспензию исследуемой культуры определенной плотности и помещают диски, пропитанные антибиотиками. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. Результат учитывается по величине диаметра зоны подавления роста вокруг диска в миллиметрах.
По чувствительности к антибиотикам микроорганизмы подразделяются на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные. Основой клинической интерпретации является предполагаемый эффект от антибактериальной терапии. Клинически к чувствительным относят бактерии, если при лечении стандартными дозами антибиотика инфекций, вызванных этими микроорганизмами, наблюдается хороший терапевтический эффект. Резистентными являются микроорганизмы, если при использовании общепринятых максимально допустимых терапевтических доз отсутствует клинический эффект. Клинически умеренная резистентность подразумевается в случае, если инфекции, вызванные такими штаммами, могут иметь различный терапевтический исход. Так, лечение может быть успешным, если антибиотик используется в максимальной терапевтической дозе и/или если инфекция локализуется в месте, где антибиотик способен создавать терапевтическую концентрацию. В клинике умеренно резистентные резистентные штаммы объединяют в одну категорию нечувствительных микроорганизмов.
8. Заполнять бланк-направление в баклабораторию и интерпретировать результаты бланка-ответа из баклаборатории (соответственно формы № 000/у и № 000/у, утвержденные МЗ СССР 04.10.80 № 000)
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
НАПРАВЛЕНИЕ №_______
на микробиологическое исследование
«14» сентября 2013 г. 9 час. 15 мин.
дата и время взятия материала
В бактериологическую лабораторию
Вид исследования: бак. метод
Ф. И. О. Возраст 25 лет
Отделение______________инфекционное______________________________
Диагноз, дата заболевания ангина, дифтерия ротоглотки? 12.09.12.
Показания к обследованию: больной, переболевший, реконвалесцент, бактерионоситель, контактный, профобследование (нужное подчеркнуть)
Материал: кровь, мокрота, кал, дуоденальное содержимое, пунктат, спинномозговая жидкость, раневое отделяемое, гной, выпот, секционный материал, мазок (подчеркнуть, вписать) из ротоглотки
Должность, фамилия, подпись лица, направляющего материал _______________________
врач М
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
РЕЗУЛЬТАТ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ №______
«14» сентября 2013 г.
дата взятия биоматериала
Ф. И. О Возраст 25 лет
Отделение инфекционное
При исследовании мазка из ротоглотки выделена C. diphtheriae v. mitis токсигенная
указать материал и результат
АНТИБИОГРАММА
Ристомицин 1 2 3 Канамицин 1 2 3
Гентамицин 1 2 3 Бензилпенициллин 1 2 3
Доксициклин 1 2 3 Ампициллин 1 2 3
Эритромицин 1 2 3 Карбенициллин 1 2 3
Линкомицин 1 2 3 Ципрофлоксацин 1 2 3
Левомицетин 1 2 3 Оксациллин 1 2 3
Рифампицин 1 2 3 Цефалекцин 1 2 3
Фузидин 1 2 3 Олеандомицин 1 2 3
Условные обозначения: 1 - культура устойчива; 2 - умеренно устойчива; 3 – чувствительна
« 17 » сентября 2013 г. Подпись
дата выдачи результата
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
НАПРАВЛЕНИЕ №_______
на микробиологическое исследование
«20» октября 2013 г. 9 час. 15 мин.
дата и время взятия материала
В бактериологическую лабораторию
Вид исследования: бак. метод
Ф. И. О. Возраст 25 лет
Отделение хирургическое
Диагноз, дата заболевания абсцесс правой ягодичной области 17.10.12 г.
Показания к обследованию: больной, переболевший, реконвалесцент, бактерионоситель, контактный, профобследование (нужное подчеркнуть)
Материал: кровь, мокрота, кал, дуоденальное содержимое, пунктат, спинномозговая жидкость, раневое отделяемое, гной, выпот, секционный материал, мазок (подчеркнуть, вписать) _________________________________________________________________
Должность, фамилия, подпись лица, направляющего материал _______________________
Врач
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
РЕЗУЛЬТАТ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ №______
« 20 » октября 2013 г.
дата взятия биоматериала
Ф. И. О Возраст 25 лет
Отделение хирургическое
При исследовании_раневого отделяемого выделен S. aureus 106 MRSA
указать материал и результат
АНТИБИОГРАММА
Ристомицин 1 2 3 Канамицин 1 2 3
Гентамицин 1 2 3 Бензилпенициллин 1 2 3
Доксициклин 1 2 3 Ампициллин 1 2 3
Эритромицин 1 2 3 Карбенициллин 1 2 3
Линкомицин 1 2 3 Ципрофлоксацин 1 2 3
Левомицетин 1 2 3 Оксациллин 1 2 3
Рифампицин 1 2 3 Цефалекцин 1 2 3
Фузидин 1 2 3 Олеандомицин 1 2 3
Условные обозначения: 1 - культура устойчива; 2 - умеренно устойчива; 3 – чувствительна
« 23 » октября 2013 г. Подпись
дата выдачи результата
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
НАПРАВЛЕНИЕ №_______
на микробиологическое исследование
«04» сентября 2013 г. 8 час. 30 мин.
дата и время взятия материала
В бактериологическую лабораторию
Вид исследования: бак. метод
Ф. И. О. Возраст 67 лет
Отделение реанимация
Диагноз, дата заболевания ожог передней поверхности грудной клетки 25.08.12 г.
Показания к обследованию: больной, переболевший, реконвалесцент, бактерионоситель, контактный, профобследование (нужное подчеркнуть)
Материал: кровь, мокрота, кал, дуоденальное содержимое, пунктат, спинномозговая жидкость, раневое отделяемое, гной, выпот, секционный материал, мазок (подчеркнуть, вписать)
Должность, фамилия, подпись лица, направляющего материал _______________________
Врач _____________________________________________________________
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
РЕЗУЛЬТАТ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ №______
« 04 » cентября 2013 г.
дата взятия биоматериала
Ф. И. О Возраст 67 лет
Отделение реанимация
При исследовании раневого отделяемого выделена P. aeruginosa 107
указать материал и результат
АНТИБИОГРАММА
цефтазидим 1 2 3 цефепим 1 2 3
амикацин 1 2 3 хлорамфеникол 1 2 3
карбенициллин 1 2 3 меропенем 1 2 3
ципрофлоксацин 1 2 3 имипенем 1 2 3
Условные обозначения: 1 - культура устойчива; 2 - умеренно устойчива; 3 – чувствительна
« 07 » сентября 2013 г. Подпись
дата выдачи результата
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
НАПРАВЛЕНИЕ №_______
на микробиологическое исследование
«19». ноября 2013 г. 9 час. 00 мин.
дата и время взятия материала
В бактериологическую лабораторию
Вид исследования: серологический метод, РА
Ф. И. О. Возраст 45 лет
Отделение инфекционное
Диагноз, дата заболевания обструктивный бронхит, коклюш? 01.10.06 г.
Показания к обследованию: больной, переболевший, реконвалесцент, бактерионоситель, контактный, профобследование (нужное подчеркнуть)
Материал: кровь, мокрота, кал, дуоденальное содержимое, пунктат, спинномозговая жидкость, раневое отделяемое, гной, выпот, секционный материал, мазок (подчеркнуть, вписать) сыворотка
Должность, фамилия, подпись лица, направляющего материал
Врач
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
РЕЗУЛЬТАТ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ №______
« 19 » ноября 2013 г.
дата взятия биоматериала
Ф. И. О. Возраст 45 лет
Отделение инфекционное
При исследовании сыворотки в РА с коклюшным диагностикумом титр 1/200, с паракоклюшным диагностикумом титр 1/50
указать материал и результат
АНТИБИОГРАММА
Ристомицин 1 2 3 Канамицин 1 2 3
Гентамицин 1 2 3 Бензилпенициллин 1 2 3
Доксициклин 1 2 3 Ампициллин 1 2 3
Эритромицин 1 2 3 Карбенициллин 1 2 3
Линкомицин 1 2 3 Ципрофлоксацин 1 2 3
Левомицетин 1 2 3 Оксациллин 1 2 3
Рифампицин 1 2 3 Цефалекцин 1 2 3
Фузидин 1 2 3 Олеандомицин 1 2 3
Условные обозначения: 1 - культура устойчива; 2 - умеренно устойчива; 3 – чувствительна
« 20 » ноября 2013 г. Подпись
дата выдачи результата
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
НАПРАВЛЕНИЕ №_______
на микробиологическое исследование
« 01, 13 ». сентября 2013 г. 9 час. 00 мин.
дата и время взятия материала
В вирусологическую лабораторию
Вид исследования: серологический метод, РНГА
Ф. И. О. Возраст 24 лет
Отделение инфекционное
Диагноз, дата заболевания корь 23 августа 2012 г.
Показания к обследованию: больной, переболевший, реконвалесцент, бактерионоситель, контактный, профобследование (нужное подчеркнуть)
Материал: кровь, мокрота, кал, дуоденальное содержимое, пунктат, спинномозговая жидкость, раневое отделяемое, гной, выпот, секционный материал, мазок (подчеркнуть, вписать) парные сыворотки
Должность, фамилия, подпись лица, направляющего материал _______________________
Врач
Медицинская документация
Форма № 000/у
Утв. МЗ СССР 04.10.80 № 000
РЕЗУЛЬТАТ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ №______
« 1, 13 » сентября _2013 г.
дата взятия биоматериала
Ф. И. О Кузьмин 24 лет
Отделение инфекционное
При исследовании парных сывороток в РНГА с коревым диагностикумом титры 1/20, 1/80
указать материал и результат
АНТИБИОГРАММА
Ристомицин 1 2 3 Канамицин 1 2 3
Гентамицин 1 2 3 Бензилпенициллин 1 2 3
Доксициклин 1 2 3 Ампициллин 1 2 3
Эритромицин 1 2 3 Карбенициллин 1 2 3
Линкомицин 1 2 3 Ципрофлоксацин 1 2 3
Левомицетин 1 2 3 Оксациллин 1 2 3
Рифампицин 1 2 3 Цефалекцин 1 2 3
Фузидин 1 2 3 Олеандомицин 1 2 3
Условные обозначения: 1 - культура устойчива; 2 - умеренно устойчива; 3 – чувствительна
« 14 » сентября 2013 г. Подпись
дата выдачи результата
П Е Р Е Ч Е Н Ь
диагностических, лечебно - профилактических препаратов, питательных сред,
приборов, которые должен знать студент, изучивший курс
микробиологии, вирусологии
1. СЫВОРОТКИ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ
1. Поливалентные и типовые агглютинирующие коли - сыворотки.
2. Монорецепторные тифо - паратифозные сыворотки.
3. Агглютинирующие поливалентные и типовые сыворотки к шигеллам.
4. Холерная О - сыворотка.
5. Люминисцирующие сыворотки (сибиреязвенная, противочумная, противохолерная, противогриппозная, противопаратифозная и др.).
6. Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка.
7. Гемолитическая сыворотка.
8. Типоспецифические гриппозные сыворотки.
9. Поливалентные и типоспецифические полиомиелитные сыворотки.
2. СЫВОРОТКИ ЛЕЧЕБНО - ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ И ИММУНОГЛОБУЛИНЫ
1. Противостолбнячная сыворотка.
2. Противогангренозная сыворотка.
3. Противоботулинистические сыворотки.
4. Антирабический иммуноглобулин.
5. Противокоревой иммуноглобулин.
6. Противогриппозный иммуноглобулин.
7. Противококлюшный иммуноглобулин.
8. Противосибиреязвенный иммуноглобулин.
9. Антитоксическая противодифтерийная сыворотка.
10. Противоэнцефалитный иммуноглобулин.
3. ДИАГНОСТИКУМЫ
1. Диагностикум бруцеллезный.
2. Диагностикум туляремийный.
3. Диагностикум сыпнотифозный.
4. Диагностикум коклюшный.
5. Антиген для реакции Вассермана.
6. Диагностикум из вируса клещевого энцефалита.
7. Диагностикумы типоспецифические гриппозные и др.
4. ВАКЦИНЫ
1. Адсорбированная коклюшно - дифтерийно - столбнячная вакцина (АКДС).
2. Адсорбированный дифтерийно - столбнячный анатоксин (АДС - М).
3. Адсорбированный дифтерийный анатоксин (АД).
4. Пневмококковая конъюгированная 7-валентная вакцина ПКВ7 (Превенар).
5. Вакцина коклюшная.
6. Вакцина гонококковая.
7. Вакцина холерная.
8. Вакцина сибиреязвенная (СТИ).
9. Вакцина туляремийная.
10. Вакцина живая гриппозная.
11. Вакцина субъединичная «Гриппол» и др.
12. Вакцина субвирионная «Флюарикс» и др.
13. Вакцина антирабическая (Ферми).
14. Вакцина антирабическая культуральная (УФ).
15. Вакцина живая противокоревая
16. Вакцина живая краснушная.
17. Вакцина против полиомиелита (живая, инактивированная).
18. Вакцина против клещевого энцефалита.
19. Вакцина БЦЖ.
20. Вакцина живая чумная.
21. Вакцина живая бруцеллезная.
22. Энджерикс В и др.
5. АЛЛЕРГЕНЫ
1. Бруцеллин.
2. Тулярин.
3. Антраксин.
4. Дизентерин.
5. Туберкулин.
6. БАКТЕРИОФАГИ
1. Стафилококковый бактериофаг.
2. Бактериофаг чумной палочки.
3. Бактериофаг холерный.
4. Бактериофаг брюшнотифозный.
5. Бактериофаг сибиреязвенный.
7. БИОПРЕПАРАТЫ И ИНТЕРФЕРОН
1. Лактобактерин.
2. Бифидумбактерин.
3. Бификол.
4. Колибактерин и др.
5. Интерферон.
8. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРОБОВ
1. Сухой питательный агар.
2. Среда Эндо.
3. Среда Плоскирева.
4. Среда Левенштейна - Иенсена.
5. Среда Китта - Тароцци.
6. Тиогликолевая среда.
9. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КУЛЬТУР КЛЕТОК ТКАНЕЙ
1. Среда 199.
2. Раствор Хенкса.
3. Бычья сыворотка.
10. ПРИБОРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ АНАЭРОБОВ
1. Микроанаэростат.
2. Эксикатор.
3. Чашки по Фортнеру.
4. Газпаки.
11. ПРИБОРЫ ДЛЯ СТЕРИЛИЗАЦИИ
1. Бактериальные свечи.
2. Паровой стерилизатор (автоклав).
3. Сушильный шкаф.
