ПРОГРАММА
практических занятий по общей микробиологии для студентов 3 курса МБФ
(специальность медицинская кибернетика) на весенний семестр учебного года
I РАЗДЕЛ ОСНОВЫ ВИРУСОЛОГИИ. ГЕНЕТИКА МИКРООРГАНИЗМОВ
Занятие № 1 «Вирусы. Бактериофаги»
Контрольные вопросы:
Общая характеристика представителей надцарства Acaryocytes (вирусы, бактериофаги, прионы, вироиды). Классификация вирусов. Морфология и ультраструктура вирусов. Типы и этапы взаимодействия вирусов с чувствительной клеткой. Вирогения и персистенция. Методы культивирования вирусов. Типы клеточных культур. Индикация вирусов в культуре клеток. Классификация и морфология. Особенности химического состава. Умеренные и вирулентные бактериофаги. Лизогенные культуры, их свойства. Профаг. Фаговая конверсия. Применение и производство бактериофагов. Титрование бактериофагов.Самостоятельная работа студентов:
Изучение строения куриного эмбриона и основных способов заражения вируссодержащим материалом. Изучение основных принципов культивирования вирусов на клеточной культуре. Изучение демонстрационного набора культуральных сред для культур клеток. Просмотр демонстрационных препаратов, с целью изучения цитопатического эффекта вирусов. Изучение методов титрования бактериофагов по методу Аппельмана и методу Грациа (в демонстрации). Изучить схему постановки и учесть реакцию фаготипирования стафилококка. Ознакомиться с набором диагностических и лечебно-профилактических бактериофагов.Занятие № 2 «Организация и регуляция генетических функций прокариот. Генетические детерминанты вирулентности»
Контрольные вопросы:
Понятие о генотипе бактерий. Структурные и функциональные гены. Репликация ДНК бактерий. Роль мезосом. Фенотип и генотип. Модификационная (фенотипическая) изменчивость, ее значение для медицинской микробиологии. Регуляция метаболизма бактерий. Система оперона у бактерий. Строение оперона. Генотипическая изменчивость бактерий. Мутации. Спонтанные и индуцированные мутации. Мутагены. Системы, репарирующие повреждение ДНК у бактерий. Основной механизм. Ферменты репарации. Рекомбинантная изменчивость. Транформация, трансдукция, конъюгация.7. Плазмиды, их классификация, характеристика, основные свойства.
8. Плазмиды и профаги как основные носители генов вирулентности. Островки патогенности.
Практическое применение генетики микроорганизмов.Самостоятельная работа студентов:
Изучение схемы постановки и учет рекомбинативной изменчивости бактерий:a) конъюгации;
b) трансдукции;
c) трансформации.
Изучение фенотипической изменчивости микроорганизмов (в демонстрациях):a) влияние температуры на синтез пигмента S. marcescens;
b) влияние фенола на тип колоний P. vulgaris.
II РАЗДЕЛ «ИНФЕКЦИЯ. ОБЩАЯ И ИНФЕКЦИОННАЯ ИММУНОЛОГИЯ»
Занятие № 3 «Инфекция и инфекционный процесс»
Контрольные вопросы:
1. Взаимоотношения микро - и макроорганизмов. Патогенные, условно-патогенные и непатогенные микроорганизмы.
2. Инфекция, инфекционный процесс, инфекционная болезнь. Формы и динамика развития инфекционной заболевания.
3. Источники, механизмы и пути передачи инфекции.
4. Патогенность и вирулентность.
5. Факторы и ферменты патогенности.
6. Токсины бактерий, их разновидности, свойства, механизм действия, мишени, типы секреции.
Этика экспериментальных исследований на животных, цели и способы заражения животных.Самостоятельная работа студентов:
Изучение методов определения ферментов и факторов патогенности золотистого стафилококка (лецитиназы, гиалуронидазы, гемолизина, плазмокоагулазы). Микроскопия мазков-отпечатков из внутренних органов белой мыши, погибшей от газовой гангрены, с целью выявления капсулы.Занятие № 4 «Факторы резистентности (врождённого иммунитета) макроорганизма»
Контрольные вопросы:
1. Понятие о резистентности макроорганизма. Клеточные и гуморальные факторы резистентности. Защитные свойства кожи и слизистых оболочек, лимфоузлов.
2. Фагоцитоз, его стадии. Механизмы бактерицидности.
3. Завершенный и незавершенный фагоцитоз. Механизмы ускользания бактерий от фагоцитоза. Методы изучения фагоцитарной активности клеток.
4. Комплемент. Пути активации комплемента.
5. Лизоцим, β-лизины, нормальные антитела. Интерфероны, разновидности, свойства, механизм действия.
6. Toll-подобные рецепторы.
Самостоятельная работа студентов:
1. Определение индекса бактерицидной активности кожи.
2. Изучение мазков с картиной завершенного и незавершенного фагоцитоза.
3. Определение общей бактерицидной активности сыворотки крови.
4. Определение активности лизоцима в слюне.
5. Учет опыта определения титра β - лизинов в сыворотке крови.
Занятие № 5 «Иммунитет. Антигены. Антитела»
Контрольные вопросы:
1. Иммунитет. Виды иммунитета.
2. Пути формирования иммунитета.
3. Понятие об антигенах, химическая природа, свойства, классификация.
4. Антигенные детерминанты (эпитопы), строение у белковых и полисахаридных веществ. Специфичность антигенов.
5. Гетерогенные антигены (антигенная мимикрия), их роль в инфекционном процессе.
6. Антигены микроорганизмов.
7. Антитела (иммуноглобулины), молекулярная структура, классы, функции.
8. Строение активного центра (паратопа), валентность антител, авидность, аффинитет. Антителообразование и его фазы. Механизм взаимодействия антител с антигеном.
Самостоятельная работа студентов:
1. Учет опыта по определению общей бактерицидности сыворотки крови.
Учет индекса бактерицидной активности кожи.3. Изучение принципиального строения антител, их свойств.
Занятие № 6 «Иммунный ответ. Типы иммунного ответа. Аллергия» (семинар)
1. Центральные и периферические органы иммунитета. Т - и В-лимфоциты, их функции.
2. Цитокины. Основные представители монокинов и лимфокинов, их роль в регуляции активности иммунной системы.
Иммунный ответ. Тимус-зависимые и тимус-независимые антигены. Типы иммунного ответа. Клеточный тип иммунного ответа. Гуморальный тип иммунного ответа. Аллергические реакции. Классификация. Понятие о ГНТ и ГЗТ. Патогенез аллергических реакций немедленного типа. ). Роль ГНТ в развитии побочных эффектов серотерапии и экстренной серопрофилактики инфекционных заболеваний. Патогенез аллергических реакций замедленного типа. Роль ГЗТ в развитии инфекционного процесса и нестерильного иммунитета. Инфекционные аллергены как диагностические препараты. Получение и применение аллергенов.Занятие № 7 «Серологические реакции (разновидности, значение). РА, РП, РНГА Получение диагностических препаратов (диагностикумов и диагностических сывороток)»
Контрольные вопросы:
1. Серологические реакции, понятие, свойства, разновидности.
2. Реакция агглютинации (РА). Цель и техника постановки.
3. Реакция преципитации (РП) и ее разновидности. Цель и техника постановки.
4. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). Цель и техника постановки.
5. Препараты для постановки серологических реакций (диагностикумы и агглютинирующие сыворотки) принципы их получения.
Самостоятельная работа студентов:
1. Поставка и учет РА на стекле с целью идентификации неизвестной чистой культуры микробов.
2. Учет результатов развернутой РА с целью обнаружения антител в сыворотке крови больного (пробирочная РА).
3. Учет результатов РНГА с использованием эритроцитарного антигенного диагностикума.
4. Поставка и учет РП (кольцепреципитация) с целью определения видовой принадлежности крови.
5. Учет результатов РП в геле с целью идентификации антигенов или антител.
6. Изучение набора препаратов для постановки серологических реакций (диагностикумы и агглютинирующие сыворотки)
Занятие № 8 «Серологические реакции с использованием меченных антител (РИФ, ИФА, РИА). Серологические реакции в диагностике вирусных инфекций, иммуноблотинг. Моноклональные антитела»
Серологические реакции с использованием меченых антител. Реакция иммунофлюоресценции ( РИФ прямой и непрямой вариант). Реакция иммуноферментного анализа (ИФА). Радиоиммунологический анализ (РИА). Иммуноблотинг.6. Моноклональные антитела. Получение и применение.
Самостоятельная работа студентов:
1. Изучение принципов постановки РИФ, ИФА, РИА.
2. Изучение набора для диагностики хламидиоза, с помощью ИФА.
3. Учет ИФА.
4. Изучение принципа постановки иммуноблотинга.
Занятие № 9 «Иммунобиологические препараты»
Контрольные вопросы:
1. Вакцинация. История вопроса.
2. Вакцины. Их назначение и классификация. Основные требования, предъявляемые к вакцинам. Противопоказания к вакцинации. Побочное действие вакцинных препаратов.
3. Живые вакцины, принципы получения, контроля, способы введения в организм. Преимущества и недостатки применения.
4. Убитые (инактивированные) вакцины, принципы получения, контроля и способы введения в организм. Преимущества и недостатки применения. Лечебные вакцины. Вакцинотерапия.
5. Химические вакцины и анатоксины. Принципы получения и контроля, способы введения в организм.
6. Компонентные (субъединичные) вакцины. Вакцина против гепатита В.
7. Ассоциированные вакцины.
8. Лечебно-профилактические сыворотки, подразделение, принципы получения. Антитоксические сыворотки. Способы контроля, введения в организм, продолжительность действия.
9. Иммуноглобулины. Принципы получения, контроля и введения в организм. Преимущества.
10. Виды иммунотерапии и иммунокоррекции инфекционных заболеваний. Иммуномодуляторы, основные группы этих препаратов.
Самостоятельная работа студентов:
Реферативные доклады по теме занятия. Изучение набор иммунобиологических препаратов, применяемых для профилактики и лечения инфекционных заболеваний.Занятие № 10 Итоговое по разделам «Основы вирусологии. Генетика микроорганизмов», «Инфекция. Общая и инфекционная иммунология»
III РАЗДЕЛ «КЛИНИЧЕСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ И ОСНОВЫ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ»
Занятие № 11 «Методы диагностики инфекционных заболеваний. ПЦР. Патогенные кокки»»
Контрольные вопросы:
Методы микробиологической диагностики: микроскопический, бактериологический, биологический, метод кожно-аллергических проб и серологической диагностики. ПЦР-диагностика инфекционных заболеваний. Общая характеристика группы патогенных кокков, их таксономическое положение. Морфологические, тинкториальные, биологические свойства стафилококков. Дифференциация патогенных и непатогенных стафилококков. Стрептококки, их морфологические, тинкториальные и биологические свойства; классификация, токсинообразование и антигенная структура. Патогенез стафилококковых и стрептококковых инфекций у человека. Методы лабораторной диагностики стафилококковых и стрептококковых инфекций. Характеристика морфологических, тинкториальных и биологических свойств менингококков, патогенез и микробиологическая диагностика вызываемых ими инфекций. Морфологические, тинкториальные и биологические свойства гонококков. Патогенез гонореи. Микробиологическая диагностика острой и хронической гонореи.Самостоятельная работа студентов:
Определение методов и составление схемы микробиологической диагностики стафилококковых и стрептококковых инфекций. Проведение микроскопического этапа: микроскопия мазков из культур стафилококков и стрептококков. Проведение бактериологического этапа: изучение культуральных свойств стафилококков и стрептококков; изучение дифференциально-диагностических свойств золотистого стафилококка (гемолитическая, плазмокоагулирующая, лецитиназная, гиалуронидазная активность, ферментация маннита) на демонстрационных посевах. Определение чувствительности золотистого стафилококка и пиогенного стрептококка к антибиотикам (учет демонстрационных посевов). Определение методов и составление схемы микробиологической диагностики менингококковой и гонококковой инфекций. Проведение микроскопического этапа: микроскопия препаратов из спиномозговой жидкости больных менингитом и гноя уретры больного гонореей. Проведение бактериологического этапа: изучение культуральных свойств менинкокков и гонококков на демонстрационных посевах.8. Определение типовой принадлежности менингококков в реакции агглютинации. Учет реакции Нобля.
Занятие № 12 «Особенности диагностики и иммунитета при туберкулезе и токсических инфекциях»
Контрольные вопросы:
Токсические инфекции. Особенности их этиологии, патогенеза и диагностики. Возбудители дифтерии, таксономическое положение, биологические свойства. Эпидемиология и патогенез дифтерии. Микробиологическая диагностика дифтерии. Исследование на носительство дифтерийных бактерий. Серотерапия. Специфическая профилактика дифтерии. Особенности иммунитета при токсических инфекциях. Характеристика возбудителей туберкулеза. Биологические типы микобактерий туберкулеза. Эпидемиология и патогенез туберкулеза. Особенности иммунитета при туберкулезе. Методы микробиологической диагностики туберкулеза. Аллергологическая диагностика туберкулеза. Туберкулин: состав, способ получения и применение. Внутрикожная проба Манту: техника проведения и интерпретация. Профилактика туберкулеза.Самостоятельная работа студентов:
Определение методов и составление схемы микробиологической диагностики дифтерии. Проведение микроскопического этапа диагностики. Микроскопия демонстрационных препаратов из чистых культур дифтерийных и ложнодифтерийных бактерий. Проведение бактериологического этапа: изучение дифференциально-диагностических свойств патогенных коринебактерий на кровяно-теллуритовой среде, средах Гиса. Определение токсигенности возбудителя дифтерии методом преципитации в геле. Определение методов и составление схемы микробиологической диагностики туберкулеза. Микроскопия демонстрационных препаратов из мокроты больного туберкулезом и из микобактерий туберкулеза, выращенных по методу Прайса. Изучение культуральных свойств возбудителя туберкулеза на среде Левенштейна-Йенсена.Занятие № 13 «Особенности диагностики оппортунистических и внутрибольничных инфекций. Иммунитет и диагностика при грибковых заболеваниях»
Контрольные вопросы:
Предмет и задачи клинической микробиологии. Понятие об условно-патогенных микроорганизмах, их роль в патологии человека. Понятие о внутрибольничных (ятрогенных, госпитальных, нозокомиальных) и оппортунистических инфекциях, условия их возникновения и этиология. Основные возбудители внутрибольничных инфекций: стафилококк, стрептококк, клебсиелла, протей, синегнойная палочка и кишечная палочка, грибки рода Candida. Таксономическое положение, основные биологические свойства. Особенности диагностики оппортунистических и внутрибольничных инфекций. Особенности иммунитета и диагностики при грибковых заболеваниях.Самостоятельная работа студентов:
а) составление схемы поэтапного бактериологического исследования гнойного отделяемого послеоперационной раны больного;
б) проведение бактериологического исследования с целью выделения возбудителя гнойной раневой инфекции (синегнойная палочка).
Микробиологическая диагностика гнойно-воспалительных заболеваний:а) составление схемы поэтапного бактериологического исследования гнойного отделяемого больного острым отитом;
б) проведение бактериологического исследования с целью выделения возбудителя острого гнойного отита (золотистый стафилококк).
Микробиологическая диагностика бронхолегочных инфекций:а) составление схемы поэтапного бактериологического исследования мокроты больного хроническим бронхитом;
б) проведение бактериологического исследования мокроты больного с целью выделения возбудителя хронического бронхита (клебсиелла пневмонии).
Микробиологическая диагностика сепсиса:а) составление схемы поэтапного бактериологического исследования крови больного с подозрением на сепсис;
б) проведение бактериологического исследования крови больного с целью выделения возбудителя сепсиса (пиогенный стрептококк).
Микробиологическая диагностика урологических инфекций:а) составление схемы поэтапного бактериологического исследования мочи больного острым пиелонефритом;
б) проведение бактериологического исследования мочи больного с целью выделения возбудителя острого пиелонефрита (вульгарный протей).
Занятие № 14 «Иммунный ответ и особенности диагностики вирусных инфекций. Микробиологическая диагностика парентеральных гепатитов и ВИЧ-инфекции»
Особенности диагностики вирусных инфекций. Иммунный ответ при вирусных инфекциях. Классификация вирусов гепатита. Взаимоотношения вируса с пермиссивной клеткой. Вирусная персистенция. Гепатиты с парентеральным путем заражения: гепатиты В, С, D. Патогенез, причины персистенции. Основные маркеры инфекции. Микробиологическая диагностика парентеральных гепатитов. Специфическая профилактика. ВИЧ. Таксономия, основные свойства. Патогенез ВИЧ-инфекции. Современные методы диагностики ВИЧ-инфекции.Занятие № 15 Итоговое по разделу «Клиническая микробиология и основы диагностики инфекционных заболеваний»
Всего 15 занятий по 3 часа
ЛИТЕРАТУРА
Основная
1. Коротяев микробиология, иммунология и вирусология: учебник для студентов медицинских вузов / , . -4-е изд., испр. и доп. – СПб.:СпецЛит, 20с.
2. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии / Под ред. проф. .-Томск: Изд-во Том. ун-та, 2003.-260с.
3. Медицинская микробиология: учебное пособие. Сибирский медицинский университет (Томск); ред.: , , . – Томск: Печатная мануфактура, 2012. – 252 с.
Дополнительная
1. Борисов микробиология, вирусология, иммунология: учебник для студентов высших заведений, обучающихся по медицинским специальностям / . – 4-е изд., доп. и перераб. – М.: МИА, 2005. – 736 с.
2. Противомикробные средства (принципы антимикробной терапии, сульфаниламидные препараты, антисептические и дезинфицирующие средства): учебное пособие для студентов медицинских вузов / [и др.]; ред ; Нижегородская медицинская академия (Нижний Новгород). – Нижний Новгород: НижГМА, 2008. – 108 с.
3. Иммунобиологические препараты для профилактики, лечения и диагнростики инфекционных заболеваний: учебное пособие. Сибирский медицинский университет (томск); ред.: , . – Томск: Печатная мануфактура, 2007. – 292 с.: Режим доступа: http://www.elib.ssmu.ru
4. Аллергология: научное издание / Российская Ассоциация аллергологов и клинических иммунологов (М); ред.: , . -2-е изд., испр. и доп. – М.: ГЭОТАР – Медиа, 2009. – 256 с.
Зав. кафедрой микробиологии СибГМУ,
профессор
