ПРОГНОЗ НЕОПРЕДЕЛЕННОСТИ ПРОБОПОДГОТОВКИ ПРИ ВАЛИДАЦИОННОЙ ОЦЕНКЕ МЕТОДИК АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
Национальный фармацевтический университет, г. Харьков, Украина
Пробоподготовка это комплекс рациональных действий над объектом анализа с целью превращения аналита в форму приемлемую для дальнейшего анализа. Пробоподготовка является важным этапом аналитического цикла и необходима для улучшения валидационных характеристик методики анализа: повышение точности, надежности, правильности и воспроизводимости определения, расширения исследуемого диапазона значений, ускорения теста, уменьшения погрешности результатов анализа.
Согласно требованиям Государственной фармакопеи Украины [1], которая гармонизирована с Европейской фармакопеей, для методик количественного определения необходимо обязательно делать прогноз максимально допустимой неопределенности результатов анализа. Оценка неопределенности (ΔSP), которая связана с результатом анализа, является самой важной частью любого количественного анализа. Неопределенность пробоподготовки может быть рассчитана только путем теоретических расчетов.
Цель – провести прогноз неопределенности пробоподготовки при валидационной оценке методик анализа лекарственных средств методами спектрофотометрии и титриметрии.
Материалы и методы. В качестве объектов исследования выбрано экстемпоральные лекарственные прописи, которые содержат нитрофурал, пилокарпина гидрохлорид, папаверина гидрохлорид. Теоретические расчеты проводили, опираясь на требования нормативной документации [1] к максимально допустимой неопределенности взвешивания и мерной посуды.
Результаты и их обсуждение. При проведении валидации методик количественного определения действующих веществ в лекарственных формах (раствор нитрофурала 0,02% [2], растворы пилокарпина гидрохлорида 1,00% и 2,00% [3, 4], раствор папаверина гидрохлорида 2,00% [5]) на основе теоретического прогноза неопределенности осуществлена оптимизация пробоподготовки для каждой методики. На рисунках 1 и 2 представлены рассчитанные значения каждой составляющей неопределенности и экспериментальная практическая неопределенность по результатам двух лабораторий для методик количественного определения методом спектрофотометрии и методом титриметрии.
В случае метода спектрофотометрии основное влияние на неопределенность пробоподготовки оказывает неопределенность объема мерной пипетки. Для растворов с концентрацией 0,02% основной вклад в неопределенность вносит операция взятия малой навески и приготовление стандартного раствора, для растворов с концентрацией 1,00% и выше – количество этапов разведения.
В случае титриметрического метода основное влияние на неопределенность пробоподготовки оказывает неопределенность взятия аликвоты мерной пипеткой и неопределенность объема, потраченного на титрование аликвоты.
Выводы. Полученные результаты показывают, что для растворов с малой концентрацией (0,02%) более корректным является использование методик количественного определения методом спектрофотометрии, т. к. значение экспериментальной практической неопределенности значительно меньше величины полной неопределенности методики. Для растворов с концентрацией 1,00% и выше корректным является использование метода спектрофотометрии.
Рисунок 1. Результаты теоретической оценки неопределенности пробоподготовки в % для методик количественного определения методом спектрофотометрии.
Рисунок 2. Результаты теоретической оценки неопределенности пробоподготовки в % для методик количественного определения методом титриметрии.
Литературные источники:
1. Державна Фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». – Доповнення 2. – Харків: РІРЕГ. – 2008. – 608 с.
2. Євтіфєєва ідація йодометричної методики кількісного визначення нітрофуралу в розчинах аптечного виготовлення / Євтіфєєва О. А., Проскуріна К. І., Георгіянц В. А. // Фармацевтичний журнал. – 2009. – №2. – С. 105 – 110.
3. Євтіфєєва та валідація спектрофотометричної методики кількісного визначення для розчинів пілокарпіну гідрохлориду аптечного виготовлення / Євтіфєєва О. А., Проскуріна К. І., Георгіянц В. А. // Український журнал клінічної та лабораторної медицини. – 2009 – №2. – С.87–92.
4. Євтіфєєва ідація титриметричної методики кількісного визначення розчинів пілокарпіну гідрохлориду аптечного виготовлення / Євтіфєєва О. А., Проскуріна К. І., Георгіянц В. А. // Медична хімія. – 2009. – Т. 11. – №4. – С. 24 – 28.
5. Євтіфєєва підбір та валідація титриметричної методики кількісного визначення папаверину гідрохлориду в 2% розчині аптечного виготовлення/ Євтіфєєва О. А., Проскуріна К. І., Георгіянц В. А. // Запорожский медицинский журнал. – 2009 – Т. 11. – №6. – С.102–105.
