ХАРАКТЕРИСТИКА РЕАКТОГЕННОСТИ И ИММУНОГЕННОСТИ ПАНДЕМИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ МОНОГРИППОЛ ПЛЮС
1, 1, 1, 2, 2, 1, 2.
ФГУН ГИСК им. Роспотребнадзора 1,
компания «Петровакс» 2
ВВЕДЕНИЕ
В апреле 2009 года в Мексике подтвержден первый случай заражения новым видом вируса гриппа, который после идентификации был отнесен к типу А(H1N1) и получил обозначение А/Калифорния/07/2009. Вирус стал быстро распространяться по всему миру и в июне 2009 года ВОЗ объявил о пандемии гриппа шестого уровня.
Широкое распространение этого штамма вируса гриппа А (H1N1) вызвало серьезные опасения органов здравоохранения всех стран мира.
Как известно, массовость заболевания людей пандемическим вирусом в различных регионах мира обусловлена в первую очередь отсутствием антител к данному штамму у подавляющего большинства населения. Основной мерой профилактики гриппа и сокращения распространения эпидемий является вакцинация. В связи с этим, в ряде стран мира и, в том числе, в нашей стране были начаты работы по созданию на основе пандемического штамма вакцины для иммунизации населения.
В настоящем сообщении представлены результаты клинических испытаний вакцины «МоноГриппол плюс» против «пандемического» гриппа, разработанной на предприятии «Петровакс».
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В период с ноября по декабрь 2009 г. было проведено клиническое исследование по оценке реактогенности и иммуногенной активности вакцины МоноГриппол плюс с участием 60 здоровых добровольцев в возрасте от 18 до 55 лет.
В клиническом испытании были использованы следующие препараты:
- пандемическая вакцина МоноГриппол плюс, содержащая в одной дозе (0,5 мл) 5мкг гемагглютинина штамма вируса гриппа А/Калифорния/07/2009 (H1N1) и 500 мкг Полиоксидония;
- в качестве Плацебо - физиологический раствор.
Препараты вводили внутримышечно в верхнюю треть плеча в объеме 0,5 мл.
Вакцинацию проводили двукратно.
В первый день исследования все 60 добровольцев были вакцинированы препаратом МоноГриппол плюс. Через 21 день после первой вакцинации методом случайного выборочного распределения привитые были разделены на 2 группы по 30 человек в каждой. Единица выборки – человек. Одной группе добровольцев повторно вводили МоноГриппол плюс, второй – плацебо. Группа плацебо была сформирована для исследования динамики развития иммунного ответа в отдаленные сроки после однократной и двукратной иммунизации пандемической вакциной.
Каждый доброволец перед включением в исследование подписал информированное согласие на участие в клиническом испытании, при этом, на всех участников были заведены амбулаторные карты и Индивидуальные регистрационные карты.
Клинико-лабораторное обследование вакцинируемых предусматривало проведение общего анализа крови до, на 5 день после 1 вакцинации и на 8 день после 2 вакцинации.
С целью оценки иммунологической эффективности вакцины забор крови у привитых проводили до вакцинации и на 21, 29 и 42 день после начала курса вакцинации. Сыворотки крови привитых исследовали в РТГА в лаборатории биотехнологии диагностических препаратов НИИ Гриппа РАМН и в лаборатории гриппа, парагриппа и других ОРЗ ФГУН ГИСК им. в зашифрованном виде. Расшифровку проводили после представления полученных результатов в ГИСК им. .
В качестве рабочей дозы антигена использовалась доза 4АЕ, приготовленная из диагностикума «Диагностикум гриппозный для реакции торможения гемагглютинации сухой», ТУ 938824-004-4429427-2008 штамма А/Калифорния/07/2009 (H1N1).
Оценку реактогенности проводили, анализируя развитие местных и системных реакций в поствакцинальном периоде с 0-го по 5-ый дни исследования при ежедневном осмотре привитых, как после первой, так и после второй прививки.
Далее оценивали состояние пациентов в течение 3-х недель после каждой прививки по телефону и амбулаторно в дни забора крови.
Также проводился мониторинг интеркуррентной заболеваемости после вакцинации с целью определения возможного побочного действия. Все данные осмотра и результаты анализов крови вносили в Индивидуальную регистрационную карту.
Результаты исследований статистически обработаны с использованием t-критерия Стъюдента и при отсутствии признаков нормального распределения – с помощью непараметрических критериев. Различия считали статистически значимыми при р<0,05. Вариационный анализ полученных результатов проводили с применением пакета прикладных программ «Statistica 6,0». В таблицах указаны средние значения соответствующих параметров и их ошибки среднего (M±m) или процент и его ошибка (%±m).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Первоначально всем 60 добровольцам была введена вакцина МоноГриппол плюс.
У 2 человек в первые 5 дней после вакцинации развились интеркуррентные заболевания, у этих участников оценка общих и местных реакций не проводилась. Таким образом, под наблюдением для оценки реактогенности находилось 58 добровольцев.
При наблюдении в течение 5 дней после вакцинации в 17,2 % случаев у привитых отмечали местные и общие реакции.
Общие реакции характеризовались повышением температуры слабой степени выраженности (5,2%) и единичными симптомами нарушения общего состояния (8,6%). Никаких медикаментозных средств для снижения температуры добровольцы не применяли, все жалобы купировались самостоятельно.
Местные реакции были зарегистрированы у 5 человек (8,6%). По степени выраженности все они были отнесены к слабым реакциям и характеризовались, в основном, болезненностью в месте введения инъекции.
Таким образом, результаты наблюдения за привитыми после первого введения вакцины показали, что вакцина МоноГриппол плюс являлась слабореактогенной и была разрешена для проведения повторной вакцинации.
Как уже отмечалось выше, через 21 день после 1 вакцинации все добровольцы были разделены на 2 группы (по 30 человек): одной группе повторно была введена вакцина МоноГриппол плюс, второй группе – плацебо.
Как показали наблюдения за привитыми в течение поствакцинального периода после второй вакцинации в группе привитых вакциной МоноГриппол плюс и плацебо общих и местных реакций отмечено не было, тогда как после первой вакцинации в отдельных случаях регистрировали местные и общие реакции слабой степени выраженности.
Таким образом, результаты оценки реактогенности после 1-го и 2-го введения вакцины МоноГриппол плюс показали, что исследуемый препарат является слабореактогенным и хорошо переносится привитыми.
Для оценки безопасности вакцины у всех привитых (60 чел.) проведено лабораторное обследование, включавшее определение клинических анализов крови до вакцинации МоноГрипполом плюс, на 5 день после первой вакцинации и на 8 день после повторной иммунизации МоноГрипполом плюс и введения плацебо.
Все проведенные клинико-лабораторные тесты по оценке безопасности вакцины не выявили отклонений от нормы, как у привитых вакциной, так и у получивших плацебо.
Отмечено, что на 8 день после второго введения препарата показатели общего анализа крови в группах однократно привитых вакциной и вторично получивших плацебо, а также двукратно привитых вакциной - не отличались. Таким образом, вторая прививка не изменяла картину гемограммы.
С целью оценки иммуногенной эффективности вакцинации у привитых проводили сбор сывороток крови до вакцинации и на 21, 29 и 42 день после начала курса двукратной вакцинации.
Большая часть добровольцев (86,4%) исходно не имела защитных титров против пандемического вакцинного штамма вируса гриппа типа А и была отнесена к серонегативной группе. Число лиц с защитным титром ≥ 1:40 до вакцинации составило 8 человек (13,6%).
Результаты исследования сывороток привитых вакциной МоноГриппол плюс (серонегативная группа), взятых в динамике после первой и второй вакцинации, с диагностикумом, приготовленным на основе антигенов пандемического вируса гриппа А/H1N1/Калифорния/7/2009, представлены в таблице.
В серонегативной группе у привитых вакциной МоноГриппол плюс через 21 день после первой вакцинации кратность нарастания титров антител к штамму вируса гриппа А/H1N1 составила 12,4, число лиц с 4-х кратным приростом антител (уровень сероконверсии) было равно 82,4% (табл.).
Одним из основных показателей иммуногенности препарата является процент серопротекций – число лиц с защитным (≥1:40) титром антител. После однократной вакцинации МоноГрипполом плюс через 21 день доля лиц с защитным титром в группе исходно серонегативных лиц составила 76,5% (табл.).
Таким образом, полученные результаты свидетельствовали о том, что вакцина МоноГриппол плюс обладает выраженной иммунногенной активностью в отношении антигенов вируса пандемического гриппа А/Калифорния/07/2009(H1N1). При однократной вакцинации показатели серопротекции (76,5%), сероконверсии (82,4%) и кратности нарастания титров (12,4) соответствуют международным критериям.
Как уже отмечалось выше, через 21 день после введения вакцины 30 добровольцев получили плацебо, а 30 – были привиты повторно вакциной МоноГриппол плюс.
При этом было показано, что у привитых однократно вакциной МоноГриппол плюс и повторно затем привитых плацебо, кратность нарастания титров антител к штамму вируса гриппа А/H1N1 на 29 день от первой вакцинации составила 15,6, на 42 день – 15,2. Уровень сероконверсий (доля лиц с 4-х кратным приростом антител) в эти же сроки исследования был равен 82,1% и 88,9%, соответственно, и количество добровольцев с защитным титром антител 1:40 и выше (уровень серопротекций) на 29 и 42 дни составило 71,4% и 74,1%, соответственно (табл.).
Результаты исследования динамики основных показателей иммуногенности вакцины МоноГриппол плюс после однократной вакцинации (42 дня наблюдения) свидетельствуют, что разница между показателями во всех случаях статистически незначима (р>0,05).
Особый интерес представляла оценка динамики иммуногенной активности у группы добровольцев, двукратно вакцинированных МоноГрипполом плюс.
У лиц с низким исходным уровнем антител, привитых дважды вакциной МоноГриппол плюс, через 8 дней после второй вакцинации кратность нарастания титров антител к штамму вируса гриппа А/H1N1 составила 15,5, а на 21 день – 14,7 и частота выявления лиц с 4-х кратным приростом антител была равна 95,8%, а на 21 день – 91,7%. Процент лиц с защитным титром (серопротекция) составил, соответственно, 91,7% – 87,5% (табл.).
Следует отметить, что результаты по оценке иммуногенности, на 8-ой день после повторной вакцинации МоноГрипполом плюс по сравнению с соответствующими показателями, полученными на 21-ый день после первой вакцинации, имели тенденцию к росту, однако различия статистически незначимы (р>0,05). Через 21 день после второй иммунизации все основные показатели (кратность нарастания титров антител, сероконверсия и серопротекция) оставались на том же уровне и статистически значимо не отличались от показателей на 21 и 29 дни от начала вакцинации (р>0,05).
Таким образом, после однократной и двукратной иммунизации вакциной МоноГриппол плюс все 3 показателя иммуногенности (серопротекция, сероконверсия, кратность нарастания титров антител) соответствуют отечественным и международным критериям предъявляемым к вакцинным препаратам. При этом, полученные результаты свидетельствуют о том, что достаточно однократного введения препарата.
Выводы
1. Результаты оценки общих и местных реакций, а также соматической и инфекционной заболеваемости показали, что пандемическая вакцина МоноГриппол плюс обладает низкой реактогенностью и безвредна при вакцинации людей. Серьезных нежелательных явлений, неожиданных реакций, а также поствакцинальных осложнений не выявлено, как при однократном, так и при двукратном введении вакцины.
2. После первой иммунизации пандемической вакциной МоноГриппол плюс на 21 день в группах исходно серонегативных лиц получены следующие результаты оценки иммуногенности: кратность нарастания титров антител к штамму вируса гриппа А/H1N1/Калифорния/07/2009 была равна 12,4; сероконверсия (процент лиц с 4-х кратным приростом титров антител) составила 82,4%; серопротекция (процент лиц с защитным титром (>1:40) составила 76,5%.
3. После второй иммунизации вакциной МоноГриппол плюс на 21 день:
кратность нарастания титров антител к штамму вируса гриппа А/H1N1/Калифорния/07/2009 была равна 14,7; уровень сероконверсий составил 91,7%; уровень серопротекций составил 87,5%.
4. Результаты исследования свидетельствуют, что при однократном введении вакцины МоноГриппол плюс показатели серопротекции, сероконверсии и кратности нарастания титров антител соответствуют отечественным и международным критериям, предъявляемым к вакцинным препаратам. При этом, показано отсутствие статистически достоверных различий между показателями иммуногенности вакцины (р>0,05) при однократном и двукратном ее введении.
Таблица
Результаты исследования сывороток привитых после первой и второй вакцинации МоноГриппол плюс
и после введения плацебо, взятых в динамике, с диагностикумом к штамму вируса гриппа А/H1N1/Калифорния/07/2009
(серонегативная группа – фоновые титры сывороток не выше 1:20)
Группы наблюдения | Срок обследования | Количество парных сывороток | Из них с 4-х кратным приростом (норма ≥40%) | СГТА | Кратность нарастания титров антител (норма ≥2,5) | Количество лиц с защитными титрами антител 1:40 и выше (норма ≥70%) | ||||
Абс. | % ± m | До вакцинации | После вакцинации | Абс. | % ± m | |||||
Привитые МоноГиппол плюс | после V1 (I этап) | на 21 день | 51 | 42 | 82,4±5.3 | 5,6 | 68.9 | 12,4 | 39 | 76,5±5,9 |
после V2 (II этап) | на 8 день | 24 | 23 | 95,8±4,1 | 5,8 | 89,8 | 15,5 | 22 | 91,7±5,6 | |
на 21 день | 24 | 22 | 91,7±5,6 | 5,8 | 84,8 | 14,7 | 21 | 87,5±6,8 | ||
После введения плацебо на II этапе | на 8 день (на 29 день после V1) | 28 | 23 | 82,1±7,2 | 5,4 | 84,1 | 15,6 | 20 | 71,4±8,5 | |
на 21 день (на 42 день после V1) | 27 | 24 | 88,9±6,0 | 5,4 | 82,1 | 15,2 | 20 | 74,1±8,4 |
