Середовище культуральне FertiCult™ G3 medium
Середовище культуральне для штучного культивування ембріонів людини, від 48 годин до 96 годин культивування.
ЗАГАЛЬНІ ВІДОМОСТІ
Середовище FertiCult G3 medium – це готовий для використання розчин для штучного запліднення ембріонів ссавців. Його розроблено для послідовного культивування у середовищі FertiCult IVF medium від 48 годин до 96 годин культивування (день 3 та 4).Середовище є повним та не потребує ніяких інших додавань. За бажанням можна додати сироватку пацієнта.
FertiCult G3 medium підходить для мікрокраплин з олією, а також для культивування в чашці при органічному культивуванні Falcon 3037 (також 4-лункова чашка Nunc). Як і інші середовища ЕКЗ IVF media, середовище G3 medium потребує попередньої інкубації в інкубаторі CO2 протягом 24 годин перед використанням (з відкритою кришкою).
МАТЕРІАЛ У КОМПЛЕКТІ
Код продукту | Описання продукта |
G3020 G3050 | 9x 20 мл середовище FertiCult G3 5x 50мл середовище FertiCult G3 |
МАТЕРІАЛ ПОЗА КОМПЛЕКТОМ
· Інкубатор 37⁰С (5% CO2)
· Чашки Петрі (наприклад, Falcon 3037)
· Олія мінеральна (наприклад, FertiCult Mineral Oil)
· Стіл із ламінованим повітряним потоком (МОС середовище 5)
· Мікроскоп
· Пробірки
ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРОДУКТУ
· Хімічна композиція
· pH: між 7.30-7.60 (37⁰С-5⁰С CO2)
· осмотична концентрація розчину: 270-290 мОсм/кг
· Стерильність: стерильний (SAL (рівень гарантії стерильності) 10-3)
· Ендотоксини: ‹0,25 EU/мл.
· Культивування мишачих ембріонів (бластоциста після 96 год.):≥80% після 30 хв. виділення (стадія зиготи)
· Використання продуктів стандарту Європейської фармакопеї чи фармакопеї США, якщо існують
· Свідоцтво про дослідження та ПБМ можуть бути видані за потребою
FertiCult G3 medium
Cell culture medium for in vitro culture of human embryos, from 48 hours till 96 hours in culture
General information
FertiCult G3 medium is a ready to use medium for the in vitro culture of mammalian embryos. It is designed for sequential culture with FertiCult IVF medium from 48 hours till 96 hours culture (day 3 and 4).The medium is complete and does not require further additives. If preferred patient serum can be added.
FertiCult G3 medium is suitable for microdroplets under oil or equally suited to culture in Falcon 3037 organ culture dishes (also 4-well Nunc culture dishes).
As with all IVF media, G3 medium has to be pre-incubated in CO2 incubator for 24 hours before use (with lid opened).
Material included with the kit
Product code | Product description |
G3020 | 9 x 20ml FertiCult G3 medium |
G3050 | 5 x 50ml FertiCult G3 medium |
Material not included with the kit
· Incubator at 37°C (5% CO2)
· Petri dishes (e. g. Falcon 3037)
· Mineral oil (e. g. FertiCult Mineral Oil)
· Laminar flow bench (ISO5 environment)
· Microscope
· Test tubes
Product specifications
· Chemical composition
· pH: 7.30 - 7.60 (37°C - 5% CO2)
· Osmolality: 270 - 290 mOsm/kg
· Sterility: sterile (SAL 10-3)
· Endotoxins: < 0.25 EU/mL
· Mouse Embryo Assay (blastocysts after 96h culture): ≥80%(from zygote stage)
· Use of Ph Eur or USP grade products if applicable
· Certificate of analysis and MSDS are available upon request
ПЕРЕВІРКИ ПЕРЕД ЗАСТОСУВАННЯМ
· Не використовуйте продукт, якщо він втратив колір (якщо середовище містить феноловий червоний), прозорість, чи має наявні ознаки мікробного зараження
· Не використовуйте продукт, якщо пломба на контейнері відкрита чи ушкоджена під час доставки
ВКАЗІВКИ ДО ЗБЕРІГАННЯ
· Зберігати при 2-25⁰С, відкритий контейнер зберігати при 2-8⁰С
· Не заморожувати перед використанням
· Не тримати на добре освітлених (сонячних) місцях
· Після відкриття контейнеру не використовувати продукт більш ніж 7 днів
· Не використовувати після дати закінчення терміну дії
ПОПЕРЕДЖЕННЯ ТА ЗАПОБІЖНІ ЗАХОДИ
Середовище FertiCult G3 medium містить сироватковий альбумін людини. Похідні матеріали, з яких було виготовлено цей продукт, негативні при тестуванні на антитіла на ВІЛ та ВГС, а також не реагували на HbsAg(Поверхневий вірус Гепатиту В), HBV RNA (РНК вірусу гепатиту), HCV RNA (РНК вірусу гепатиту С), HIV-1 RNA (РНК ВІЛ-1) та сифіліс. Не існує засобів тестування, які гарантують, що продукти, яких отримано з крові людини, не переносять збудників інфекцій. Тому потрібно поводитися з усіма зразками так, ніби то вони можуть переносити ВІЛ та гепатит.
Не працюйте зі зразками без захисного одягу.
Дотримуйтеся під час роботи суворих умов гігієни (МОС середовище 5, наприклад, стіл з ламінованим покриттям), щоб уникнути можливого зараження, навіть якщо FertiCult G3 містить додаткові антибіотики.
Середовище FertiCultG3 medium не містить антибіотиків, завжди дотримуйтеся суворих умов гігієни (ламіноване повітря), щоб уникнути зараження, чи додавайте свої антибіотики: пеніцилін приблизно 100 одиниць на мл чи гентаміцин 10 мг на літер.
МЕТОД
Розчини для використання мікрокраплин
Для мікрокраплин, 100-250 
л середовища FertiCult G3 medium розподілити по планшету для культивування, до 6 на кожну 60мм лунку.
PRE-USE CHECKS
· Do not use the product if it becomes discoloured (if medium contains phenol red), cloudy, or shows any evidence of microbial contamination
· Do not use the product if seal of the container is opened or defect when the product is delivered
Storage and conservation
· Store between 2-25°C, once opened store between 2-8°C
· Do not freeze before use
· Keep away from (sun)light
· After opening the container do not use the product longer than 7 days
· Do not use after expiry date
Warnings and precaution
FertiCult G3 medium contains human serum albumin. Source materials from which this product was derived was found negative when tested for antibodies to HIV and HCV and non-reactive for HbsAg, HBV RNA, HCV RNA, HIV-1 RNA and syphilis. No known test method can offer assurance that products derived from human blood will not transmit infectious agents. Therefore, handle all specimens as if capable of transmitting HIV or hepatitis.
Always wear protective clothing when handling specimens.
Always work under strict hygienic conditions (ISO 5 environment, e. g. LAF-bench) to avoid possible contamination, even when FertiCult G3 medium contains antibitics.
FertiCult G3 medium does not contain antibiotics, always work under strict hygienic conditions (laminar flow) to avoid contamination, or add your own antibiotics: penicillin at about 100 units per ml or gentamicin at 10mg per liter.
METHOD
Preparations for use of microdroplets
For microdroplets, between 100-250μl of FertiCult G3 medium may be dispensed around the culture dish, up to 6 per 60mm dish.
The dish is then filled with 5ml of pre-washed and pre-equilibrated light mineral oil (nontoxic and preferably embryo tested, e. g. FertiCult Mineral Oil).
Each dish is placed in the incubator (usually non-humidified) to equilibrate overnight at 37°C and under an atmosphere of 5% CO2 in air.
Потім планшет наповнити 5 мл попередньо промитої та врівноваженої легкої мінеральної олії (нетоксичною та бажано протестованою ембріонами, наприклад, FertiCult Mineral Oil).Кожний планшет переміщується до інкубатору (зазвичай не зволожений) для урівноваження протягом ночі при температурі 37⁰С та при атмосфері 5% CO2 в повітрі.
Розчини для використанні в відкритих системах
У відкритих системах, таких як планшети Falcon чи Nunc, до кожної лунки додають 1мл середовища.
Потім наступні 3 мл додають в резервуар, який оточує лунки. Це допомагає підтримувати вологість та надає розчин для промивання ембріонів.
Кожен планшет переміщується до інкубатору для врівноваження протягом ночі при температурі 37⁰С та при атмосфері 5% CO2 в повітрі.
Як і при методі з мікрокраплинами, який описано вище, нагайно рекомендується проводити нічне врівноваження.
У відкритих системах парафінова олія не потрібна, однак іноді шар мінеральної олії в кількості 1мл може додаватися зверху розчину до внутрішньої лунки. Коли використовується така відкрита система, інкубатор потрібно зволожувати.
Культивування
Після 48 годин культивування, ембріони звичайно готові для трансплантації. Однак, якщо потрібне додаткове культивування, використовуйте середовище FertiCult G3 medium.
Перемістить ембріони до свіжого сосуду, який містить свіже середовище FertiCult G3 medium (дивіться вище).
Важливо приготувати нові свіжі планшети для цього, але вони мають бути врівноваженими шляхом нічного попереднього інкубування та попереднього вирівнювання в інкубаторі. Після наступних 24 годин культивування ембріони будуть готові для трансплантації (між 8 та 16 клітин на цій стадії).
Preparations for use in open systems
In open systems such as with the Falcon or Nunc dishes, about 1ml of medium is placed in each well.
A further 3ml is placed in the reservoir surrounding the wells. This helps to maintain humidity as well as providing medium with which to wash the embryos.
Each dish is placed in the incubator to equilibrate overnight at 37°C and under an atmosphere of 5% CO2 in air.
As with the microdroplets method described above, equilibration overnight is highly recommended.
In the open system, paraffin oil is not necessary, but sometimes a 1ml layer of mineral oil may be added over the medium in the inner well. When using such an open system the incubator must be humidified.
Culture
After 48 hours culture, embryos are usually ready for embryo transfer. However, if further culture is intended, use FertiCult G3 medium.
Place the embryos into fresh dishes containing fresh FertiCult G3 medium (see above).
It is important to prepare fresh dishes for this purpose and they must be equilibrated by overnight pre-incubation and pre-equilibration in the incubator. After a further 24 hours culture the embryos will then be ready for transfer (between 8 and 16 cells at this stage).
