Изучение эффективности комбинированной мази «Пролидоксид» на модели химической кожной язвы

УДК: 615.451.1.015: 616-002.44

ТКАЧЕВА О.В.1, ЯКОВЛЕВА Л. В.2

1К. фарм. н., докторант кафедры фармакоэкономики

Национального фармацевтического университета (НФаУ), г. Харьков, Украина

2Профессор, д. фарм. н., заведующая кафедры фармакоэкономики

НФаУ, г. Харьков, Украина

ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ КОМБИНИРОВАННОЙ

МАЗИ «ПРОЛИДОКСИД» НА МОДЕЛИ ХИМИЧЕСКОЙ КОЖНОЙ ЯЗВЫ

Введение. На сегодняшний день одной из проблем в хирургии является рациональный выбор схемы лечения гнойных ран. Изменение представлений о патогенетических процессах при заживлении ран, динамичное развитие хирургии постоянно предъявляют новые требования к алгоритму лечения раневого процесса [1].

Арсенал лекарственных препаратов, предназначенных для местного консервативного лечения ран, неуклонно растет. Однако, еще не существует универсального препарата, пригодного для использования во всех фазах раневогого процесса (гнойно-некротической, фазы регенерации с образованием грануляционной ткани и рубцевания), поскольку лечение на каждой фазе требует дифференцированного подбора препаратов с различным механизмом действия [1, 3, 5]. На сегодняшний день большинство препаратов, представленных на фармацевтическом рынке Украины в виде мягких лекарственных форм (мазей, гелей, кремов, линиментов), предназначенных для местного лечения ран на І-й и ІІ-й фазах, не соответствуют медико-биологическим требованиям [3].

Нерешенные проблемы при применении ранозаживляющих препаратов в хирургической практике и комплексный подход в лечении ран требуют дальнейшей разработки и изучения комбинированных лекарственных средств, компоненты которых влияли бы на различные патогенетические звенья раневого процесса.

Многолетние исследования ученых НФаУ доказывают, что для фармакотерапии раневого процесса с успехом применяют препараты, разработанные с использованием фенольного гидрофобного препарата прополиса (ФГПП). Одним из препаратов, разработанных сотрудниками кафедры аптечной технологии НФаУ с использованием ФГПП, лидокаина и ПЭО-основы является мазь «Пролидоксид» [4]. Основной действующий компонент мази «Пролидоксид» – ФГПП содержит фенольные соединения (до 81,3%): флавоны кверцетин, кемпферол, апигенин, лютеолин, хризин, акацетин, рамноцитрин и флавонолы робиданол, робиданол-3-галлат, кейякинин, которые обладают антиоксидантными, противовоспалительными и репаративными свойствами.

В доклинических исследованиях, проведенных на базе ЦНИЛ НФаУ под руководством проф. установлено, что мазь «Пролидоксид» оказывает выраженное антимикробное, ранозаживляющее, противовоспалительное, обезболивающее действие, что позволяет рекомендовать ее для лечения гнойных ран на I-й и II-й фазах.

Целью данной работы явилась оценка динамики заживления химической кожной язвы под влиянием мази «Пролидоксид» в сравнении с аналогом по фармакологическому действию и по составу природных компонентов – мазью «Вундэхил».

Экспериментальная часть. Исследования проводили в асептических условиях на 27-ми половозрелых нелинейных крысах самцах, массой 150-170 г. Кожные язвы вызывали подкожным введением 9% раствора уксусной кислоты в объеме 0,5 мл на животного вместе с внутрибрюшинной инъекцией декстрана в дозе 300 мг/кг для увеличения реактивности организма животного [5]. Лечение мазями начинали на 8-й день, когда кожные язвы были сформированы. Все животные были разделены на три группы: 1-я группа – контрольная патология, животные которой в условиях патологии не получали лечение; животных 2-й и 3-й групп лечили мазями «Пролидоксид» и препаратом сравнения – мазью «Вундэхил» («Научно-производственная фармацевтическая компания «Эйм», г. Харьков). Мази наносили стерильным шпателем на поверхность язвы животных 2 раза в день (утром и вечером) в условнотерапевтической дозе 20 мг/см2, которая была определена путем скрининговых исследований. Лечение продолжали до полного рубцевания кожных язв.

Все вмешательства и эвтаназию животных осуществляли с соблюдением принципов «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и научных целей» (Страсбург, 1986). Полученные результаты обрабатывали с помощью программы Statistica на основе дисперсионного анализа для данных с повторными измерениями с использованием критериев Крускала-Уоллис и Мана-Уитни при уровне достоверности р<0,05.

Основными показателями лечебного действия мази «Пролидоксид» служили: сокращение площади кожных язв и увеличение количества животных с рубцами по сравнению с контрольной патологией и мазью «Вундэхил». Площадь язв (S) измеряли в мм2 по методу (1942), прикладывая к ране прозрачный трафарет и обводя ее края. О состоянии кроветворных органов, а также об интенсивности воспалительного процесса судили по показателям периферической крови у крыс: гемоглобина, лейкоцитов, эритроцитов, показателей лейкоцитарной формулы. Гематологические показатели регистрировали 3 раза: до начала эксперимента (исход), в середине (на 11-й день) и в конце исследования (на 21-й день).

Клинические наблюдения за животными показали, что на 8-й день после воспроизведения уксусно-кислых язв у крыс всех групп развивались открытые язвенные дефекты кожи с выраженным воспалительным процессом окружающих тканей и отторжением вторичной корки. Гибели животных в опытных группах не наблюдали. Язвы были чистыми без присоединения вторичной инфекции и гнойно-некротических процессов. На 8-й день опыта площадь кожных язв варьировала от 204,78 мм до 307,0 мм2 (таблица 1).

Наблюдения за дальнейшим процессом заживления язв показали, что на 11-й и 22-й дни опыта площади язв в группах животных, которых лечили мазями были достоверно меньшими от показателей группы контрольной патологии. Начиная с 20-го дня в группе животных, которых лечили мазью «Пролидоксид» наблюдалось интенсивное нарастание скорости заживления и грануляции ран. На 22-й день у животных этой группы была наименьшая площадь язв по сравнению с животными других групп. С 22-го по 28-й дни опыта % животных с рубцами под влиянием мази «Пролидоксид» увеличился с 22,2% (2 крысы) до 88,9% (8 крыс). На 29-й день все животные этой группы (100%) имели зарубцевавшиеся язвы, в то время, как в группе контрольной патологии заживление произошло лишь у 55,6% животных, а в группе, леченных мазью «Вундэхил» – у 77,8% животных. Полное заживление язв у животных, которых лечили мазью «Вундэхил» произошло на 31-й день, а в группе контрольной патологии – на 34-й день.

Таблица 1

Влияние мази «Пролидоксид» на динамику планиметрических показателей на модели химической язвы кожи у крыс в дозе 20 мг/см2 (n = 9)

Дни опыта	Показатели	Контрольная патология	Мазь «Пролидоксид»	Мазь «Вундэхил»
8-й	Площадь язв, мм2	307,0±43,35	204,78±36,81	227,22±19,67
11-й	Площадь язв, мм2	207,44±33,38	119,89±16,62*	81,89±4,36*
16-й	Площадь язв, мм2	100,50±30,99	55,50±10,87	38,50±6,60
20-й	Площадь язв, мм2	51,17±12,95	34,33±7,79	33,67±6,01
22-й	Площадь язв, мм2	45,00±10,80	18,00±5,25*	20,67±4,50*
% жив. с рубцами	0	22,2	22,2
26-й	Площадь язв, мм2	10,17±3,43	3,50±1,96*	5,33±1,80
% жив. с рубцами	11,1	55,6	33,3
28-й	Площадь язв, мм2	5,50±2,55	0,67±0,67	3,50±1,02
% жив. с рубцами	44,5	88,9	66,7
29-й	Площадь язв, мм2	3,83±1,80	0,00±0,00	1,50±0,50
% жив. с рубцами	55,6	100	77,8

Примечание: * - отклонение достоверно по отношению к контрольной патологии, р<0,05.

Исследования гематологических показателей крыс группы контрольной патологии показали, что воспалительный процесс на модели уксусно-кислой язвы имел выраженный характер, о чем свидетельствовало достоверное снижение гемоглобина, эритроцитов и времени свертывания, а также достоверное повышение лейкоцитов на 11-й и 21-й дни в сравнении с исходными показателями (таблица 2).

Таблица 2

Вплияние мази «Пролидоксид» на гематологические показатели на модели химической язвы кожи у крыс в дозе 20 мг/см2 (n=6)

Показатель	Сроки наблюдения	Контрольная патология	Мазь «Пролидоксид»	Мазь «Вундэхил»
Время свертывания, сек.	Исход 11-й день 22-й день	204,00±10,68 166,67±4,29** 127,67±11,68**	193,40±11,4 224,00±12,82* 158,33±16,90	207,00±3,94 209,00±26,15 124,67±5,36**
Гемоглобин, г/л	Исход 11-й день 22-й день	146,48±3,20 114,93±6,08** 135,33±2,36**	153,88±5,43 127,67±1,45** 147,23±4,23	139,00±2,34 121,67±2,73** 131,47±6,28
Эритроциты, 1012/л	Исход 11-й день 22-й день	6,08±0,23 4,27±0,22** 5,72±0,23	5,71±0,27 5,20±0,08 5,93±0,16	5,35±0,39 5,19±0,08 5,30±0,17
Лейкоциты, 109/л	Исход 11-й день 22-й день	10,92±0,90 18,13±1,56** 17,77±0,95**	12,18±0,53 15,47±0,64** 13,73±0,74*	12,26±0,34 15,47±0,83** 14,20±0,79*
Лейкоцитарная формула, %:
Палочкоядерные нейтрофилы	Исход 11-й день 22-й день	2,00±0,32 1,33±0,33 2,67±0,33	2,00±0,32 2,00±0,58 2,67±0,33	1,80±0,37 1,33±0,33 1,67±0,33
Сегментоядерные нейтрофилы	Исход 11-й день 22-й день	31,20±3,17 23,67±2,33 31,67±5,81	31,80±1,36 23,00±2,08 23,67±4,33	36,60±2,62 33,33±2,33* 42,67±3,48
Лимфоциты	Исход 11-й день 22-й день	61,00±3,74 64,67±2,40 55,00±6,56	59,20±0,86 65,67±2,91 63,00±3,79	54,20±3,48 59,00±2,52 49,00±1,15
Моноциты	Исход 11-й день 22-й день	3,80±0,73 9,33±1,76** 9,67±2,19**	5,40±0,81 9,33±0,67** 10,00±1,00**	5,60±1,03 10,33±0,33** 9,00±1,15**

Примечания:

1) * - отклонение достоверно по отношению к контрольной патологии, р<0,05;

2) ** - отклонение достоверно по отношению к исходу, р<0,05.

Прогрессивное снижение времени свертывания в группе контрольной патологии может свидетельствовать об увеличении активности тромбоцитарной системы крови, а снижение гемоглобина и эритроцитов – о развитии анемических процессов, что влияет на удлинение процесса заживления язв [2].

Со стороны лейкоцитарной формулы у животных контрольной патологии также наблюдались изменения, которые проявлялись в небольшой нейтропении и незначительном увеличении количества лимфоцитов на 11-й день и затем его снижении на 22-й день, а также в достоверном возрастании количества моноцитов 11-й и 22-й дни исследований.

Динамика гематологических показателей животных, которые получали лечение мазями мало чем отличалась между собой, но имела отличия от группы контрольной патологии, которые свидетельствовали о выраженном противовоспалительном действии мазей. Это проявилось в отсутствии достоверного снижения количества эритроцитов на 11-й день и лейкоцитоза на 22-й день по сравнению с контрольной патологией. В группе животных, которых лечили мазью «Пролидоксид», также наблюдалось достоверное по отношению к контрольной патологии увеличение времени свертывания крови на 11-й день, что косвенно может свидетельствовать об улучшении реологических показателей крови и активации репаративных процессов. У животных, которых лечили мазью «Вундэхил», напротив на 22-й день наблюдалось достоверное уменьшение времени свертывания крови, что, по-видимому, связано с увеличением количества тромбоцитов и, следовательно, с некоторым замедлением процесса заживления в этой группе.

В целом полученные результаты показателей лейкоцитарной формулы свидетельствуют о том, что воспалительный процесс у животных всех групп имел кратковременный характер и не перешел в хроническую форму. Развитие воспаления у животных, по-видимому, происходило за счет активации лимфоцитарно-моноцитарного ростка [2], а нейтрофильный росток кроветворения не принимал активного участия в реакции организма животных, что характеризует мощную иммунную защиту организма крыс.

Таким образом, полученные результаты лечебного действия мази «Пролидоксид» и препарата сравнения – мази «Вундэхил» позволили установить, что по уменьшению площади ран и по снижению интенсивности воспалительного процесса показатели в опытных группах существенно, а в некоторых случаях достоверно, отличались от показателей группы контрольной патологии. Исследуемые препараты проявили выраженную ранозаживляющую активность, ускоряя эпителизацию и грануляцию кожных язв под действием мази «Пролидоксид» на 5 дней, а под действием мази «Вундэхил» – на 3 дня сравнительно с контрольной патологией. По срокам заживления мазь «Пролидоксид» на 2 дня опережала заживление кожных язв сравнительно с мазью «Вундэхил».

Более выраженная репаративная активность мази «Пролидоксид» реализуется за счет антиоксидантного и мембраностабилизирующего влияния полифенолов основного действующего компонета мази – фенольного гидрофобного препарата прополиса.

Выводы:

1.  На модели химической кожной язвы у крыс по данным планиметрических и гематологических показателей установлено выраженное противовоспалительное и репаративное действие мази «Пролидоксид».

2.  Заживление кожных язв под влиянием мази «Пролидоксид» проиходило на 2 дня раньше сравнительно з мазью «Вундэхил». Более выраженная эффективность исследуемого препарата в условиях эксперимента позволяет прогнозировать подобные преимущества в условиях клинической практики.

Литература:

1.  Абаев хирурга. Раны и раневая инфекция / . – Ростов н/Д : Феникс, 2006. – 427 с.

2.  Клиническая интерпретация лабораторных исследований / под ред. , проф. – СПб: ЭЛБИ-СПб, 2006. – С. 37-243.

3.  Крутиков лечение ран и ожогов / , // Российские аптеки. [Электронный ресурс]. – 2006. – №5. – Режим доступа: http://www. remedium. ru/drugs/doctor/dermatology/detail. php? ID=17466

4.  Розробка та дослідження мазі з фенольним гідрофобним препаратом прополісу / , , // Вісник фармації. – 2003. – № 2. – С. 26–28.

5.  Ткачова ідження ефективності мазі «Біофлорин» на моделі хімічної рани у щурів / , єва, // Вісник фармації. – 2012. – № 1. – С. 65–69.

УДК: 615.451.1.015: 616-002.44

ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ КОМБИНИРОВАННОЙ

МАЗИ «ПРОЛИДОКСИД» НА МОДЕЛИ ХИМИЧЕСКОЙ КОЖНОЙ ЯЗВЫ

,

Национальный фармацевтический университет, г. Харьков, Украина

Изучена ранозаживляющая активность комбинированной мази «Пролидоксид» на модели химической язвы кожи у крыс. Установлена выраженная эффективность препарата. По срокам заживления и уменьшению площади язв мазь «Пролидоксид» превосходила ее фармакологический аналог – мазь «Вундэхил». Исследуемый препарат проявил положительное влияние на гематологические показатели (количество эритроцитов, лейкоцитов, уровень гемоглобина, время свертывания крови), что способствовало ускорению заживления кожных язв. Более выраженная эффективность мази «Пролидоксид» реализуется за счет антиоксидантного и мембраностабилизирующего влияния полифенолов основного действующего компонента мази – фенольного гидрофобного препарата прополиса.

UDC: 615.451.1.015: 616-002.44

THE OINTMENT “PROLIDOKSID” EFFECTIVENESS STUDY

ON THE CHEMICAL SKIN ULCERS MODEL

O. V.Tkacheva, L. V. Іakovlіeva

National University of Pharmacy, Kharkov, Ukraine

Wound healing activity of combination ointment "Prolidoksid" studied on the model of chemical skin ulcers in rats. It was installed expressed effectiveness of the drug. Оintment "Prolidoksid" exceeded its pharmacological analogue ointment "Wundahyl" for the healing of ulcers and reduce the area. The drug showed a positive effect on haematological indices (number of RBC, leucocytes, hemoglobin level, coagulation time), that helped to accelerate the healing of skin ulcers. More pronounced effectiveness of ointment «Prolіdoxyd» is realized due to the antioxidant and stabilization of membranes influence of polyphenols the main active component of the ointment - phenolic hydrophobic drug propolis.

***

Контакты для переписки: .

E-mail: *****@***com, тел. раб. ([phone], тел. моб. [phone].