2. Содержание учебной дисциплины

Тематический план лекций по учебной дисциплине основы цитологии

№ темы

Название темы

Содержание темы

Часы

Раздел 1. Задачи и роль клинической цитологии на современном этапе развития медицины. Типы цитологических лабораторий.

1

Введение. Роль цитологических исследований в профилактической и диагностической медицине.

Изучение цитологии имеет большое значение для медицины, так как практически все заболевания организма человека являются результатом различных клеточных поражений или нарушений функций клеток различных органов.

Клиническая цитология – метод морфологического анализа, основанный на изучении и оценке клеточного материала, полученного разными способами из различных органов и тканей организма. В настоящее время цитологические исследования широко применяются в клинической диагностике различных заболеваний. Это происходит как в результате технического совершенствования и повышения информативности морфологических методов, так и благодаря достижениям эндоскопии и других приемов, позволяющих получить материал для исследования из подавляющего большинства органов и тканей.

На эффективность конечных результатов цитологического исследования непосредственное влияние оказывает качество взятого на исследование материала, соблюдение всех правил его обработки, вплоть до окраски цитологического препарата. Именно эта часть работы возлагается на медицинского лабораторного техника, от знаний и умений которого во многом зависит клинический диагноз пациента и его дальнейшая судьба.

2

2

Типы цитологических лабораторий. Виды цитологических исследований. Ведение лабораторной документации.

Типы цитологических лабораторий: централизованные; специализированные; цитологические отделы при патологоанатомических бюро; цитологические группы в составе клинической лаборатории. Одноэтапные и двухэтапные методы работы цитологической лаборатории. Роль медицинского лабораторного технолога в двухэтапном методе работы цитологической лаборатории.

Организация работы цитологической лаборатории. Директивные документы, регламентирующие работу цитологической лаборатории (Приказ г.; «Организация работы ЦЦЛ» от 09.1990г. и др.).

Функциональные обязанности медицинского лабораторного техника в цитологической лаборатории, организация его рабочего места. Оборудование цитологической лаборатории: типы микроскопов, центрифуги, аппараты для автономной окраски препаратов, лабораторная посуда и т. д.

Учетная документация цитологической лаборатории: журнал регистрации поступивших анализов и их результатов; журнал гисто-цитологических сопоставлений; журнал тяжелой патологии. Архив, регистрация и выдача архивного материала.

Техника безопасности при работе с цитологическим материалом (регламентирующие документы).

2

Раздел 2. Клетка. Понятие о патологии клетки. Типы эпителия.

3

Структурные компоненты животной клетки. Клеточный цикл. Воспаление. Виды воспаления. Реакция клеток на воспаление.

Определение понятия «клетка», общий план строения животной клетки. Органеллы, классификация. Морфология, функции органелл общего и специального значения. Включения, классификация, функции.

Строения ядра, его составные части, ядерно-цитоплазмати-ческое соотношение в нормальных клетках.

Основные процессы, происходящие в ходе деления клетки и связанные с ними морфологические изменения, значение их для цитологической диагностики. Клеточный цикл. Старение и гибель клетки. Апоптоз клетки, морфологические проявления. Некроз, его морфологические признаки.

Воспаление, этиология, механизмы. Острое воспаление, стадии процесса: альтернативная, экссудативная, пролиферативная, их цитологические признаки. Исходы острого воспаления. Хроническое воспаление: продуктивное, формирование грануляционной ткани, ее клеточный состав, рубцовая ткань. Понятие гранулемы, клеточный состав, этапы формирования. Определение понятия «специфическое» воспаление. Инфекционные гранулемы: туберкулезная гранулема (строение, клеточный состав), сифилитическая гумма, гранулемы при микозах др.

2

4

Морфология эпителиальной ткани. Гистофункциональные особенности клеток эпителия различных органов. Опухоли, классификация, цитологические признаки опухолевых клеток. Дифференциальная диагностика воспалительных предопухолевых и опухолевых заболеваний.

Гистогенетическая и морфологическая классификация эпителиальной ткани. Общие морфологические характеристики эпителиев (однослойного, многослойного, железистого). Гистофизиологические особенности эпителиальных клеток различных органов (эпидермис кожи, многорядный эпителий воздухоносных путей, эпителий слизистой оболочки различных отделов желудочно-кишечного тракта, переходный эпителий слизистой мочевого пузыря, эпителий слизистых оболочек половых органов).

Компенсаторно-приспособительные процессы: регенерация, виды; понятия «гипертрофия», «атрофия».

Предопухолевые заболевания, этиопатогенез. Цитологическая характеристика предопухолевых процессов - гиперплазия, метаплазия, дисплазия.

Опухоли, этиология. Гистогенетическая классификация опухолей. Морфологическая характеристика опухолей. Проявления клеточного и тканевого атипизма. Рост опухоли: инфильтрирующий, экспансивный. Доброкачественные опухоли, общая характеристика, цитологические признаки. Злокачественные опухоли, характеристика, цитологические критерии злокачественности – общие и частные. Метастазирование опухолей.

Роль цитологического и гистологического исследования в диагностики опухолей.

2

Всего часов:

8

Тематический план практических занятий по учебной дисциплине основы цитологии

НЕ нашли? Не то? Что вы ищете?

№ темы

Название темы

Содержание темы

Часы

Раздел 2. Клетка. Понятие о патологии клетки. Типы эпителия.

2.1

Структурные компоненты животной клетки. Клеточный цикл. Воспаление. Виды воспаления. Реакция клеток на воспаление.

Микроскопия разных стадий острого, хронического и специфического воспаления. Отличительные признаки гранулематозного воспаления. Выявление измененных клеточных структур, определение стадии воспалительного процесса. Определение цитологических различий грануляционной и грануломатозной ткани. Зарисовка видимой морфологической картины в альбом.

2

2.2

Морфология эпителиальной ткани. Гистофункциональные особенности клеток эпителия различных органов. Опухоли, классификация, цитологические признаки опухолевых клеток. Дифференциальная диагностика воспалительных предопухолевых и опухолевых заболеваний.

Характерные признаки злокачественности в отдельных клетках: полиморфизм форм и размеров клеток, характерные изменения ядра, аномалии деления клетки, изменения взаимоотношений опухолевых клеток между собой. Выявление цитологических признаков злокачественности в клетках, зарисовывка измененных клеток.

2

Всего по разделу

4

Раздел 3. Способы получения клеточного материала для цитологического исследования.

3.1

Основные способы получения клеточного материала для цитологического исследования. Особенности технических приемов. Аппаратура. Способы фиксации, правила транспортировки и маркировки материала.

Способы получения материала для цитологического исследования: эксфолиативный, пункционный, эндоскопический, биопсийный. Их общая характеристика. Инструментарий для получения цитологического материала при гинекологических осмотрах (шпатель Эйра, щеточка, канюля, ершик), шприцы и иглы для производства пункций.

Приготовление стекол для получения мазков. Правила подготовки новых стекол и повторно используемых предметных стекол. Смесь Никифорова, ее назначение, моющие растворы. Белково-глицериновый раствор для стекол.

Способы маркировки стекол в лабораторных условиях. Маркировка флаконов с жидким материалом. Сопроводительные документы, бланки направления материала на цитологическое исследование.

Правила транспортировки. Очередность доставки материала в лабораторию - первоочередная доставка жидких материалов (мочи, промывных вод, мокроты и т. д), возможность хранения высушенных мазков. Контейнерная система упаковки и доставки материала.

Фиксация полученного материала, сущность процесса и важность этапа для дальнейшего исследования. Фиксирующие растворы для мазков (метанол, спирт, смесь Никифорова) Фиксаторы для биологических жидкостей с примесью крови (жидкость Карнуа), состав, приготовление. Красители – фиксаторы. Фиксирующие растворы для цитохимических реакций.

2

3.2

Эксфолиативная цитология и ее биосубстраты. Пункционная цитология.

Метод эксфолиативной цитологии или цитологии «слущивания», биологический материал, получаемый этим методом - жидкости, мазки с поверхности кожи, слизистых оболочек. Применение метода и способы получения материала в гинекологии, урологии, пульмонологии, гастроэнтерологии, дерматологии. Техника приготовления мазков.

Метод пункционной (тонкоигловой) аспирационной биопсии, преимущество метода перед эксфолиативным. Область применения. Инструментарий. Пункция инфильтрата, опухоли, приготовление мазка. Пункция кистозной полости, этапы приготовление мазка.

2

3.3

Цитологическое исследование биопсийного материала, эндоскопического материала. Получение мазков-отпечатков.

Метод биопсии в медицине. Получение мазков-отпечатков при трепан-биопсии, ножевой биопсии, с операционного материала. Необходимость одновременного гистологического и цитологического исследования биопсийного материала. Роль и значение при этом цитологического анализа.

Эндоскопические исследования. Информативность метода. Современная аппаратура, специальные приборы для взятия материала в процессе эндоскопического исследования. Техника получения мазков щеточкой, мазков-отпечатков с биопсийного материала, взятого в ходе эндоскопии. Мазки с ватных тампонов. Виды эндоскопических исследований: бронхоскопия, эзофагоскопия, гастроскопия, колонофиброскопия.

2

Всего по разделу

6

Раздел 4. Цитологические методики.

4.1

Красители. Классификация. Приготовление красителей. Артефакты. Методы микроскопии. Перспективные направления цитологических методов исследования.

Основные физические и химические факторы лежащие в основе окраски цитологических структур. Тинкториальные свойства клеточных структур. Метахромазия. Классификация красителей. Группа основных или ядерных красителей, понятие «базофилии». Кислые красители – цитоплазматические, понятие «ацидофилии». Нейтральные красители. Индифферентные красители.

Оценка качества цитологического препарата, равномерность окраски, отсутствие осадка, сморщивания клеток и т. д. Артефакты, возможные причины возникновения, возможные действия по их устранению.

Лабораторное оборудование для окраски больших партий мазков; лабораторная посуда, «батарея» для окраски малого количества препаратов.

Стандартная световая микроскопия фиксированных, окрашенных мазков. Разрешающая способность светового микроскопа. Микроскопия нативных нефиксированных и неокрашенных препаратов, цель исследования. Фазово-контрастная микроскопия, люминесцентная микроскопия мазков

Нормативные документы, регламентирующие правила хранения и работы с химическими реактивами и красителями.

2

4.2

Распространенные методы окраски цитологических препаратов: Окраска гематоксилин-эозиновыми; азур-эозиновыми красителями.

Знакомство с устройством цитологической лаборатории, организацией ее работы; оборудование, приборы, посуда, реактивы. Особенности работы с цитологическими мазками.

Распространенные методы окраски мазков, используемые в современных цитологических лабораториях.

Окраска гематоксилин-эозиновыми красителями. Виды гематоксилиновых красителей: гематоксилин Эрлиха, Майера, Караци, техника приготовления краски Майера, Эрлиха, Караци. Созревание гематоксилиновых красителей. Сроки их хранения, длительность использования. Приготовление рабочего раствора эозина. Результат окраски. Эмпирический метод выбора продолжительности окраски мазка гематоксилином.

В учебном практикуме студенты самостоятельно по прописям готовят раствор гематоксилина Майера, изучают алгоритм приготовления растворов Эрлиха и Караци, обращается внимание на длительность процесса созревания данных красок. Определяют степень зрелости растворов гематоксилина. По прописи готовят раствор эозина. Согласно алгоритму, осуществляют фиксацию мазков, закрепляя полученные на предыдущем занятии умения.

Отрабатывают алгоритм окраски мазков гематоксилин-эозином. Особое внимание уделяется обучению студентов умению эмпирического подбора времени окраски мазка гематоксилином. Для этого используются рисунки в атласах, слайды, демонстрационные препараты.

Окраска азур-эозиновыми красителями. Техника окраски по Романовскому-Гимзе, состав красителей, приготовление рабочего раствора. Результат окраски.

По алгоритму учащиеся готовят рабочий раствор готовой краски Романовского-Гимзе. Для работы получают мазки разного биологического субстрата. Фиксируют мазки. В соответствии с алгоритмом проводят окрашивание мазков. Студенты должны самостоятельно составить схему окраски мазков, в зависимости от характера окрашиваемого материала (мазки-отпечатки, пунктаты, жидкости). Определяют качество готового мазка.

Метод Паппенгейма, особенность фиксации мазка перед окраской данным методом, приготовление краски-фиксатора Май-Грюнвальда. Техника окраски. Результат окраски.

Окраска по Лейшману, приготовление раствора краски - фиксатора, техника окраски мазков. Результат окраски мазков.

Студенты согласно прописям готовят реактивы, необходимые для окраски. Составляют схему окраски мазков. Самостоятельно проводят окрашивание препаратов. Отрабатывают умение определения качества окрашенного мазка.

Решают тестовые задания, ситуационные задачи по теме окраски гематоксилин-эозиновыми методиками и азур-эозиновыми методами.

8

4.3

Экспресс – методы окраски цитологических препаратов: окраски по ; по Папаниколау. Полихромная окраска.

Существует два метода окраски по . Учащимся предлагается изучить оба метода. Студенты осваивают схему интраоперационной окраски мазков, по прописям готовят растворы краски Май-Грюнвальда, азура II, эозина. По схеме проводят окраску. Оценивают полученный результат.

Отрабатывают алгоритм окраски мазка вторым методом, по прописи готовят реактивы. Зарисовывают в альбом окрашенный мазок.

По прописям готовят реактивы для окраски по Папаниколау. Предварительно фиксированный мазок окрашивают согласно методики окраски. Оценивают полученный результат. Определяют ядра, хроматин, ядрышки, пикноз, лизис. Отрабатывают умение определения тинкториальных свойств цитоплазмы. Зарисовывают видимую морфологическую картину в альбом.

Окраска по Папаникалау в модификации . Студенты сравнивают два метода. Готовят реактивы и красители по прописи, составляют схему окраски и отрабатывают умение окраски мазков. Оценивают полученный результат. Зарисовывают видимую морфологическую картину в альбом.

Метод, применяемый в гормональной кольпоцитологии. Назначение метода полихромной окраски. Студенты знакомятся с методом полихромной окраски по . По прописи готовят реактивы и растворы. Проводят окраску предварительно фиксированного мазка. Оценивают полученный результат, используя демонстрационные образцы. Зарисовывают видимую морфологическую картину в альбом.

8

4.4

Основные методы цитохимических исследований применяемых в практике. Выявление ДНК, РНК; гликогена; жиров; слизи.

Цитохимические методы исследование, цель, назначение. Цитохимические реакции. Материал, предназначенный для цитохимического исследования.

ШИК-реакция. Определение гликогена, гликопротеинов. Методы выявление ферментов, оценки их активности.

Методы выявления ДНК по Фельгену, РНК по Браше. Принцип методов. Постановка реакции.

Обнаружение гликогена по методу Мак Мануса. Принцип данного метода. Набор реактивов. Студенты по прописи готовят реактив Шиффа. Действуя по алгоритму, проводят окраску мазков. Оценивают полученный результат.

Выявление слизи. Окрашивание жиров. Цель и назначение метода окраски на слизь. Методика окраски альциановым синим. Учащиеся самостоятельно по прописям готовят раствор, проводят по схеме окраску мазка.

Метод окраски жиров. Студенты самостоятельно готовят спиртовой раствор судана III. Осуществляют поэтапную окраску мазка. В процессе микроскопии отрабатывают навык определения жира и жироподобных веществ в цитоплазме.

4

Всего по разделу

22

Всего часов:

32

Тематический план самостоятельной работы студентов по учебной дисциплине основы цитологии

Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7