Характер изменений нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови под влиянием терагерцовых волн на частотах оксида азота 150,176-150,664 ГГц (стр. 3 )

● Самцы: 1-я группа интактные животные (n=15) - группа контроля; 2-я группа - животные в состоянии острого иммобилизационного стресса (n=15); 3-я группа - интактные животные, подвергнутые ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут (n=15); 4-я группа - животные, подвергнутые ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на фоне острого иммобилизационного стресса в течение 5, 15 и 30 минут (n=45); 5-я группа - животные, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота до действия стрессора в течение 5, 15 и 30 минут (n=45); 6-я группа - животные, подвергнутые дробному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота, на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса в течение 5, 15 и 30 минут (n=45); 7-я группа - животные в состоянии хронического иммобилизационного стресса (n=15); 8-я группа - животные в состоянии хронического иммобилизационного стресса, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут (n=15); 9-я группа - интактные животные, у которых определялась в крови концентрация кортикостерона (n=10); 10-я группа - животные в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, у которых в крови определялась концентрация кортикостерона (n=20); 11-я группа - остро и хронически стрессированные животные, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, у которых в крови исследовали концентрацию кортикостерона (n=20).

● Самки: 1-я группа - интактные самки в фазе Dioestrus и Oestrus эстрального цикла (n=30); 2-я группа - самки в фазе Dioestrus и Oestrus, подвергнутые острому иммобилизационному стрессу (n=30); 3-я группа - самки в фазе Dioestrus и Oestrus в состоянии острого иммобилизационного стресса, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут (n=30); 4-я группа - самки в фазе Dioestrus и Oestrus эстрального цикла в состоянии острого иммобилизационного стресса, подвергнутые дробному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут (n=30).

Облучение экспериментальных животных проводилось электромагнитными волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на предварительно выбритый участок кожи площадью 3 см над областью мечевидного отростка грудины. Мощность излучения генератора составляла 0,7мВт, а плотность мощности, падающей на участок кожи, равнялась 0,2 мВт/см2. Продолжительность однократного облучения составляла 5, 15 и 30 минут.

Для облучения животных использовался медицинский аппарат “КВЧ-NO”, разработанный в МТА КВЧ (г. Москва) совместно с ФГУП «НПП-Исток» (г. Фрязино) и (г. Саратов).

Все животные при проведении экспериментов находились в одинаковых условиях. Для устранения влияния сезонной и циркадной зависимости на систему гемостаза эксперименты с животными осуществлялись в осенне-зимний период в первой половине дня.

Забор крови у экспериментальных животных для исследования состояния коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза осуществляли путем пункции сердца одноразовым шприцем в пластиковые пробирки. В качестве стабилизатора крови использовался 3,8%-ный раствор цитрата натрия в соотношении 9:1. Эксперименты на животных проводились в соответствии с требованиями Женевской конвенции «International Guiding principles for Biomedical Research Involving Animals» (Geneva, 1990).

Методы исследования

Состояние коагуляционного звена системы гемостаза исследовали с помощью серии тестов, выполненных на гемокоагулометре CGL 2110 «Solar» (Республика Беларусь, г. Минск) с использованием реактивов фирмы НПО “РЕНАМ” (г. Москва, Россия).

Основными исследованными показателями, характеризующими коагуляционное звено системы гемостаза у экспериментальных животных, являлись: активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ); протромбиновое время; международное нормализованное отношение (МНО); тромбиновое время; концентрация фибриногена; активность фактора XIII в плазме крови (, , 1999). Антикоагулянтные свойства крови у экспериментальных животных исследовали путем определения активности естественного антикоагулянта антитромбина III и системы протеина С (, , 1999). Состояние фибринолитической активности крови у экспериментальных животных оценивали путем определения Хагеман-зависимого фибринолиза; индуцированного стрептокиназой эуглобулинового фибринолиза; вычисления индекса резерва плазминогена (, , 1999); концентрации ранних продуктов деградации фибриногена и растворимых фибрин-мономерных комплексов РФМК-тестом (, , 1987) и тестом склеивания стафилококков (, , 1988).

Определение концентрации кортикостерона в сыворотке крови у экспериментальных животных производили утром в одно и то же время методом конкурентного иммуноферментного анализа с применением моноклональных антител (, , 1999).

Статистическая обработка полученных данных проводилась при помощи непараметрического метода U - критерия теста Mann-Whitney (пакет программ Statistica 6.0.).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Изменения коагуляционных и фибринолитических свойств крови у белых крыс, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, и интактных животных под влиянием терагерцового облучения

У крыс-самцов и крыс-самок в фазе Dioestrus эстрального цикла, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, выявлены гиперкоагуляционные изменения в системе гемостаза, снижение антикоагулянтных свойств крови и угнетение фибринолиза. У крыс-самок в фазе Oestrus, подвергшихся острому иммобилизационному стрессу показатели, характеризующие коагуляционную, антикоагулянтную и фибринолитическую активность крови, выражены значительнее, чем у стрессированных самок в фазе Dioestrus. У крыс-самцов в условиях хронического стресса выявлены развитие коагулопатии потребления и активация фибринолитического процесса, обнаружено значительное количество ранних продуктов деградации фибриногена и растворимых фибрин-мономерных комплексов, характерных для внутрисосудистого тромбообразования.

Воздействие ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в непрерывном режиме в течение 30 минут на интактных животных не вызывает изменений в прокоагулянтной, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови крыс - самцов, о чем свидетельствует отсутствие статистически достоверных отличий между группами интактных и облученными животными.

2. Коагуляционные и фибринолитические свойства крови у крыс-самцов, находящихся в состоянии острого стресса, и их изменения при непрерывном режиме облучения терагерцовыми волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц

Воздействие непрерывного ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 5 минут на животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, не вызывает изменений в свертывании крови и фибринолизе. Об этом свидетельствует отсутствие статистически достоверных различий показателей коагуляционного потенциала, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови облученных животных по сравнению с данными группы животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса.

Анализ результатов исследования фибринолитической активности крови и её коагуляционных свойств у животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса и подвергшихся воздействию ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут, показал частичное восстановление показателей антикоагулянтного (рис.1) фибринолитического потенциалов крови и течения всех фаз коагуляционного каскада. Однако при этом отмечалась нормализация протромбинового и тромбинового времени, эуглобулинового фибринолиза, индуцированного стрептокиназой, индекса резерва плазминогена, так как отсутствовало статистически достоверное различие в этих показателях по сравнению с данными группы контрольных животных.

При непрерывном 30-минутном облучении животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ-электромагнитным полем на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц наблюдалось полное восстановление измененных показателей гемокоагуляции, антикоагулянтной активности крови (рис.1) и фибринолиза, что подтверждалось отсутствием статистически достоверных их различий по сравнению с данными группы контроля.

 

Антитромбин III Протеин С

Рис. 1. Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов

под воздействием непрерывного 15 - и 30-минутного облучения ТГЧ – волнами на

частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на фоне острого стресса

Примечание: *- статистически достоверно, по сравнению с группой контроля; # - статистически достоверно по сравнению с группой животных, находящихся в состоянии

острого иммобилизационного стресса.

1-я гр. - интактные животные; 2-я гр.- животные в состоянии иммобилизационного стресса;

3-я гр. - животные, облученные в течение 15 минут на фоне иммобилизационного стресса;

4-я гр. - животные, облученные в течение 30 минут на фоне иммобилизационного стресса.

3. Влияние предварительного непрерывного терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, находящихся в состоянии

острого иммобилизационного стресса

Предшествующее стрессу ТГЧ-облучение животных в течение 5 минут на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц приводит к менее выраженному нарушению функциональной активности коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза, чем у животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса без предварительного непрерывного ТГЧ-облучения. Это выражается в статистически достоверном различии таких показателей коагуляционного каскада, как АЧТВ, тромбиновое время, Хагеман-зависимый эуглобулиновый фибринолиз, индекс резерва плазминогена. При этом не выявлено статистически значимых отличий в остальных показателях коагуляционного каскада, антикоагулянтной (рис. 2) и фибринолитической активности крови у животных, подвергнутых предварительному ТГЧ-облучению, по сравнению с группой стрессированных животных.