Влияние гипоксии на состав мембранно-связанных белков в человеческих эритроцитах
Сидоренко1), Лунева1), Пономарчук1, 2),
Тверской 1), Алексеева 1), Деев1), Ричард Григорчик 2)
1)Биологический факультет Московского государственного университета им. , Воробьевы горы д. 1, корп. 12, Москва 199899;
2) Dept. of Medicine, University of Montreal, 900 rue St-Denis, Montreal (Quebec) H2X0A9, Canada;
Ключевые слова: эритроциты, деокcигенация, выброс АТФ, гемолиз, мембраносвязанные белки
Аннотация
Кровеносные сосуды увеличивают диаметр в ответ на снижение парциального давления кислорода. Было установлено, что это функция изолированных сосудов реализуется только в условиях, когда перфузируемая жидкость содержит эритроциты.
Выброс АТФ из эритоцитов играет ключевую роль в вызванном гипоксией повышении тока крови в кровяном русле. Мы ранее показали, что гемолиз – является одним из возможных механизмов выброса АТФ из эритоцита, вызванный несколькими стимулами, включая гипоксию, но молекулярные механизмы увеличения хрупкости мембраны при гипоксии не изучены.
В этом исследовании мы сравнили действие гипоксии на уровень гемолиза, выброс АТФ и на состав мембранных белков в человеческих эритоцитах в условиях нормоксии/гипоксии.
Двадцати минутная инкубация человеческих эритоцитов в бескислородной среде увеличила содержание внеклеточного гемоглобина в ~1.5 раза (p <0.01). Параллельные измерения значений свободного гемоглобина и содержания АТФ в образцах, показал положительную корреляцию между гемолизом и выбросом АТФ (R=0.46392; p <0.6811), что подтверждает гемолитический механизм выброса АТФ. Сравнительный анализ 2D-электрофореза теней эритоцитов, полученных при гипоксии и нормоксии, показал двухкратное увеличение содержания мембранно-связаного белка с Mw ~60 кДа.
Таким образом, деоксигенация человеческих эритоцитов влияет на состав мембранных белков. Чтобы идентифицировать белок с Mw 60 кДа и его возможную роль в нарушении целостности эритоцитов в гипоксических условиях, необходимо выполнить дополнительные эксперименты.
