Интегральная антиоксидантная емкость мицеллярных экстрактов специй по данным гальваностатической кулонометрии

Статья публикуется по материалам доклада на “Международном научном форуме

Бутлеровское наследие – 2015”. http://foundation. /bh-2015/

Поступила в редакцию 18 декабря 2014 г. УДК 543.258:543.8.

Интегральная антиоксидантная емкость мицеллярных экстрактов специй по данным гальваностатической кулонометрии

© Зиганшина Эндже Ришатовна, Зиятдинова+ Гузель Камилевна,

Нгуен Конг Фук и Будников* Герман Константинович

Кафедра аналитической химии. Химический институт им. . Казанский федеральный университет. Ул. Кремлевская, 18. г. Казань, 420008. Республика Татарстан. Россия.

Тел.: [phone]. E-mail: [e-mail]

_______________________________________________

*Ведущий направление; +Поддерживающий переписку

Ключевые слова: гальваностатическая кулонометрия, мицеллярные среды, неионогенные ПАВ, антиоксидантная емкость, специи, анализ пищевых продуктов.

Аннотация

Найдены стехиометрические коэффициенты реакций индивидуальных антиоксидантов специй (галловой, п-кумаровой, кофейной и розмариновой кислот, а также рутина, кверцетина, эвгенола, куркумина, капсаицина, тимола, танина, катехина и сиреневого альдегида) с электрогенерированным бромом в мицеллярной среде Brij® 35. Установлено, что максимальное извлечение активных компо-нентов из специй достигается при однократной экстракции раствором 0.1 М Brij® 35 в течение 10 мин с ультразвуковой обработкой. Соотношение сырье/экстрагент, обеспечивающее максимальное извле-чение, устанавливали для каждой специи индивидуально. Оценена интегральная антиоксидантная емкость мицеллярных экстрактов 21 специи, которую выражали в пересчете на 1 г сухого веса. Уста-новлено, что наибольшая антиоксидантная емкость наблюдается для гвоздики и корицы (433±4 и 290±15 Кл/г, соответственно), а наименьшая – для тмина (23±2 Кл/г), что обусловлено природой активных компонентов специй.

Введение

В настоящее время для характеристики того или иного объекта часто используют так называемые обобщенные показатели. Этот подход, как правило, позволяет проводить быст-рую оценку суммарного содержания ряда структурно родственных соединений или веществ с близкими свойствами, что позволяет осуществлять оперативный скрининг объектов анализа по тем или иным критериям. В ряде случаев это значительно упрощает и удешевляет проце-дуру химического анализа [1]. Одной из таких обобщенных характеристик является суммар-ное содержание антиоксидантов. Среди объектов анализа, к которым применяют эти харак-теристики, на первый план выходят продукты питания, лекарственное растительное сырье, биологически активные добавки и т. д.

Оценка антиоксидантных свойств специй растительного происхождения представляет несомненный интерес. Специи сложны по составу и содержат большое число антиоксидантов различной природы: витаминов, флавоноидов, терпенов, каротиноидов, фитоэстрогенов, что и обуславливает их применение в качестве консервантов пищевых продуктов [2].

Для интегральной оценки антиоксидантных свойств специй используют ряд общепри-нятых подходов, основанных на свойствах антиоксидантов окисляться и вступать в радикаль-ные реакции.

В основе способа определения эквивалентов Тролокса (Trolox equivalent antioxidant capacity assay (TEAC)) лежит реакция антиоксидантов с долгоживущим катион-радикалом 2,2-азинобис(3-этилбензотиазолина-6-сульфоната) (АБТС•+), приводящая к ингибированию его светопоглощения при 600 нм. В качестве стандарта использют Тролокс – водорастворимый аналог α-токоферола [3].

Другой параметр – антирадикальная активность, которую оценивают по реакции анти-оксидантов образца стабильным радикалом 2,2-дифенил-1-пикригидразилом (ДФПГ•) в среде метанола с фотометрической индикацией при 515 нм [4]. Мерой антирадикальной активности является концентрация радикала, оставшегося после реакции с антиоксидантами.

Следует упомянуть простой и чувствительный способ оценки антирадикальной актив-ности, основанный на реакции антиоксидантов с ДФПГ• в мицеллярных средах поверхностно-активных веществ (ПАВ). Оценено влияние природы и концентрации ПАВ, рН и концентра-ции буферного раствора. Наилучшие характеристики получены в среде 2 мM цетилтриметил-аммоний бромида в 0.1 M ацетатном буферном растворе pH 4.6. Показано, что реакция в мицеллярной среде протекает с большей скоростью, чем в метаноле [5].

Поскольку специи содержат значительные количества фенольных антиоксидантов, то для количественной характеристики часто используют термин «общее содержание фенолов», определяемое методом Фолина-Чокальтеу по реакции со смесью солей фосфомолибденовой и фосфовольфрамовой кислот. В щелочной среде при взаимодействии с фенольными соедине-ниями соли восстанавливаются с образованием окрашенных в синий цвет комплексов, содер-жание которых оценивается спектрофотометрически при 765 нм [6].

Существуют и другие способы оценки антиоксидантных свойств специй, основанные на реакциях с пероксильными и гидроксильными радикалами, супероксид анион-радикалом, а также реакции обесцвечивания кроцина и β-каротина, основные принципы, достоинства и –недостатки которых обобщены в работах [7-10].

Одним из используемых параметров является железовосстанавливающая способность (ЖВС), основанная на реакции антиоксидантов с окислителем (2,4,6,-трипиридил-S-триази-новым комплексом Fe(III)) со спектрофотометрической индикацией восстановленной формы комплекса при 593 нм [11].

Другой подход основан на окислении антиоксидантов на электроде. Он позволяет оценить антиоксидантную емкость объекта анализа. Так, разработан вольтамперометрический способ оценки антиоксидантной емкости (АОЕ) специй, основанный на окислении их анти-оксидантов на стеклоуглеродном электроде на фоне 0.1 М LiClO4 в этаноле. АОЕ метаноль-ных экстрактов специй выражали в эквивалентах галловой кислоты в пересчете на 1 г сухой специи [12].

Для сопоставления результатов, полученных с использованием различных методов, па-раметры, характеризующие антиоксидантные свойства образца, выражают в эквивалентах индивидуальных антиоксидантов, чаще всего галловой кислоты.

Настоящая работа посвящена оценке интегральной антиоксидантной активности ми-целлярных экстрактов специй, основанной на реакции их компонентов с электрогенериро-ванным бромом в условиях гальваностатической кулонометрии.

Экспериментальная часть

Использовали 95%-ный рутин тригидрат (Fluka, Germany), 98%-ный кверцетин дигидрат (Sigma, Germany), 98%-ный катехин гидрат (Sigma, Germany), танин фармакопейной чистоты (Fluka, Germany), 99%-ную галловую (Sigma, Germany), 98 %-ную кофейную (Sigma, Germany), 98%-ную розмариновую (Sigma, China) и 98%-ную п-кумаровую (Sigma, Germany) кислоты, 98%-ную сиреневого альдегида (Sigma, Japan), 70%-ный куркумин из Curcuma longa (Sigma, Germany), 50%-ный капсаицин (Sigma, India), 99%-ный эвгенол (Aldrich, Germany) и 99.5%-ный тимол (Sigma, Germany). Остальные реактивы были марки х. ч., метанол (х. ч.) и этанол ректификат.

Стандартные 1 мМ растворы антиоксидантов готовили, растворяя точную навеску в 1 мл 0.1 М Brij® 35 (Sigma, Germany).

Кулонометрические определения проводили на анализаторе Эксперт-006 (-Эксперт»). Электрогенерацию брома осуществляли из 0.2 М KBr в 0.1 М H2SO4 на Pt электроде при постоянной силе тока 5.0 мА. Катодом служила свернутая спиралью Pt проволока. Катодную камеру, в которой находился вспомогательный электрод, отделяли от анодной стеклянной пористой перегородкой. Конечную точку титрования определяли амперометрически с двумя поляризованными платиновыми электродами (DЕ = 200 мВ).

В электрохимическую ячейку на 50 мл вносили 20.0 мл фонового электролита и аликвоту раствора исследуемого соединения или экстракта специй, помещали рабочий, вспомогательный и индикаторные электроды. Для титрования брали аликвоты с таким расчетом, чтобы время титрования не превышало 2 мин. Теоретически рассчитанное количество вещества, выделяющееся на элект-роде (г) при электролизе, находили по закону Фарадея.

Экстракция мицеллярной средой Brij® 35. Точную навеску (0.1000±0.0005 г) специй поме-щали в пробирки на 15.0 мл, добавляли от 2.0 до 10.0 мл 0.1 М раствора Brij® 35 и помещали в ультразвуковую ванну (Sonorex Super RK 100H) на 10 мин. Экстракт отфильтровывали и использовали для оценки антиоксидантных свойств.

Статистическую обработку результатов проводили для 5 измерений при доверительной веро-ятности 0.95. Результаты представляли как X±ΔX, где X – среднее значение и ΔX – доверительный интервал, и величина относительного стандартного отклонения (sr).

Результаты и их обсуждение

Поскольку специи содержат большое число компонентов, проявляющих антиоксидант-ные свойства, изучены их реакции с электрогенерированным бромом в условиях гальваноста-тической кулонометрии.

Как известно [13], окисление бромид-ионов в кислой среде на платиновом электроде приводит к образованию Br3-, Br2, а также короткоживущих радикалов брома (Br·эл.), адсорби-рованных на поверхности платинового электрода. Это позволяет охватить широкий круг реак-ций этих частиц реагента с антиоксидантами различной природы.

Изучены реакции индивидуальных фенольных антиоксидантов специй, галловой, п-ку-маровой, кофеиновой, розмариновой кислот рутина, кверцетина, катехина, танина, тимола, эвгенола, куркумина, капсаицина и сиреневого альдегида, с вышеуказанным титрантом в мицеллярной среде Brij® 35. Для установления стехиометрии реакций проводили кулономет-рическое титрование их стандартных растворов.

Установлено, что все исследуемые антиоксиданты реагируют с электрогенерированным бромом быстро и количественно Число электронов, участвующих в реакциях с электрогенери-рованным бромом, определенные методом кулонометрического титрования, представлено в табл. 1.

Электрогенерированный бром вступает в реакции окисления, а также электрофильного присоединения по кратным связям и замещения в ароматическое кольцо, что объясняет большое число электронов, участвующих в реакциях с исследуемыми антиоксидантами. В первую очередь протекают реакции окисления гидроксильных групп с образованием соот-ветствующих хинонов. Для флавоноидов (катехина, рутина и кверцетина) сначала окисляются гидроксильные группы кольца Б [14].

На основе полученных результатов электрогенерированный бром предложен как реагент для оценки антиоксидантных свойств мицеллярных экстрактов специй.

Экстракция активных компонентов специй мицеллярной средой Brij® 35. Мицеллярная среда неионогенного ПАВ Brij® 35 выбрана в качестве экстрагента. Brij® 35 является доступ-ным и недорогим ПАВ которое обеспечивает растворимость широкого круга гидрофобных соединений в водной среде, что представляет интерес для анализа специй.

Найдены условия экстракции активных компонентов специй с помощью 0.1 М раствора Brij® 35 с ультразвуковой обработкой. Установлено, что максимальное извлечение достига-ется при однократной экстракции в течение 10 мин. Соотношение сырье/экстрагент устанав-ливали для каждой специи индивидуально. Эффективность экстракции оценивали кулономет-рически по реакции с электрогенерированным бромом и выражали как количество электри-чества, затраченное на титрование экстракта (рис. 1).

Как видно из данных рис. 1, среди специй можно выделить три группы. Так, для семи специй (гвоздики, имбиря, ягод можжевельника, черного и белого кардамона, аниса звезд-чатого и красного перца) максимальное извлечение активных компонентов наблюдается при соотношении сырье/экстрагент 1:20. Для других шести специй – аниса, черного и белого перца, базилика, корицы, черной куркумы – 1:60. Для третьей группы соотношение сырье/ экстрагент варьируется в широких пределах (от 1:30 для мускатного ореха до 1:90 для розмарина).

На основе полученных результатов оценена интегральная антиоксидантная емкость (АОЕ) экстрактов специй по реакции с электрогенерированным бромом (табл. 2).

Табл. 1. Число электронов, участвующих в реакциях антиоксидантов специй

с электрогенерированным бромом по данным кулонометрического титрования

Соединение	Структурная формула	Число электронов, участвующих в реакции
Галловая кислота		4
Танин		30
Катехин		9
Кверцетин		10
Рутин		8
Куркумин		11
Капсаицин		6
Тимол		4
Эвгенол		4
п-Кумаровая кислота		4
Кофейная кислота		4
Розмариновая кислота		4
Сиреневый альдегид		2
Ванилин		2

Рис. 1. Влияние объема экстрагента на эффективность экстракции

активных компонентов из специй

Все специи показали достаточно высокую интегральную антиоксидантную емкость по сравнению с описанной ранее ЖВС [15]. Это связано с тем, что электрогенерированный бром является более сильным окислителем, чем гексацианоферрат(III) ионы и вступает не только в реакции окисления, но и отмеченные выше реакции электрофильного присоединения и замещения. Это позволяет охватить более широкий круг соединений, вступающих в реакцию с титрантом.

Гвоздика и корица проявили максимальную интегральную АОЕ в рассматриваемом ряду, что обусловлено высоким содержанием гидроксикоричной кислоты и эвгенола в корице [16] и галловой кислоты и эвгенола в гвоздике [17], а также ряд терпеновых соединений, имеющих в своей структуре реакционноспособные двойные связи, в том числе сопряженные. Полученные результаты согласуются с литературными данными по антиоксидантной актив-ности этих специй [18, 19].

Достаточно высокая АОЕ получена для мускатного ореха, красного перца, желтой кур-кумы, орегано и красного перца сладкого, содержащих флавоноиды, каротиноиды и терпе-новые спирты [20]. Кроме того, мускатный орех содержит эвгенолы [21], перец – капсаицины, аскорбиновую, пальмитиновую, миристиновую и гидроксикоричные кислоты [22]. Орегано содержит также розмариновую и гидроксикоричные кислоты [12, 23].

Кориандр, базилик, белый и черный перцы, черная куркума занимают промежуточное положение в рассматриваемом ряду. Базилик и кориандр содержат большое количество нена-сыщенных липофильных соединений [24, 25], а также соединения фенольной природы, кото-рые экстрагируются мицеллярной средой Brij® 35 и вступают в реакции с электрогенерированным бромом.

Следующая группа специй представлена кумином, имбирем, анисом и анисом звезд-чатым, черным кардамоном и ягодами можжевельника. Кумин и имбирь содержат фенольные монотерпеноиды, которые экстрагируются мицеллярной средой и вступают в реакцию с титрантом. Для кумина это тимол, α-терпинеол, куминовый спирт [26]. Имбирь содержит гингеролы, шогаолы, парадолы и зингерон [27]. Основным компонентом аниса и аниса звезд-чатого является транс-анетол [28], а также терпеноиды, фенольные кислоты, флавоноиды и ряд других соединений. Ягоды можжевельника содержат широкий круг фенольных антиокси-дантов, в частности, флавоноиды, стильбены [29] и фенольные кислоты [30]. Все эти компо-ненты вступают в реакцию с титрантом.

Табл. 2. Интегральная антиоксидантная емкость экстрактов специй

(n = 5, P = 0.95). Экстрагент – 0.1 М Brij® 35.

Специя	Торговая марка	АОЕ, Кл/1 г	sr
Гвоздика	“Appetita”	433±4	0.007
Корица	“Appetita”	290±15	0.040
Мускатный орех	“Interjarek”	130±3	0.016
Красный перец	“Galeo”	115±2	0.013
Желтая куркума		113±2	0,014
Красный перец сладкий	“Волшебное дерево”	109±3	0.020
Орегано	“Galeo”	98±1	0.009
Кориандр	“Appetita”	67±4	0.051
Белый перец		62.9±0.8	0.010
Базилик	“Appetita”	62±3	0.034
Черный перец	“Волшебное дерево”	61±2	0.029
Черная куркума		59±3	0.036
Кумин	“Магия востока”	52±4	0.056
Анис звездчатый		48±2	0.039
Имбирь	“Волшебное дерево”	47±1	0.020
Черный кардамон		45±2	0.040
Ягоды можжевельника	“Appetita”	44±2	0.032
Анис	“Appetita”	38±4	0.080
Белый кардамон		27±2	0.052
Розмарин	“Appetita”	27±1	0.030
Тмин	“Волшебное дерево”	23±2	0.069

Последними в рассматриваемом ряду специй оказались белый кардамон, розмарин и тмин. Главными компонентами белого кардамона являются 1,8-цинеол и α-терпинил ацетат [31]. Розмарин содержит карнозол и карнозиновую, розманол и розмариновую кислоту и ряд родственных соединений – эпи - и изорозманол, розмаридифенол и розмадиаль [32]. Тмин богат петроселиновой кислотой [33], также содержит эфирные масла, основные из них – D-карвон и D-лимонен [34]. Главные компоненты этих специй, проявляющие антиоксидантные свойства, составляют небольшой процент от общего состава, чем и можно объяснить полу-ченные невысокие значения антиоксидантной емкости.

Таким образом, кулонометрическое титрование мицеллярных экстрактов специй элект-рогенерированным бромом позволяет оценить интегральную АОЕ специй и этот метод можно рекомендовать для быстрого скрининга их антиоксидантных свойств.

Заключение

Проведенные исследования показали, что мицеллярная среда неионогенного поверх-ностно-активного вещества может использоваться для извлечения активных компонентов из специй и является хорошей заменой органическим растворителям. Кулонометрическое титро-вание мицеллярных экстрактов специй электрогенерированным бромом позволяет определить суммарное содержание антиоксидантов в них и оценить их антиоксидантную емкость.

Выводы

1.  Найдены стехиометрические коэффициенты реакций электрогенерированного брома с природными антиоксидантами специй – галловой, п-кумаровой, кофеиновой, розмари-новой кислотами, рутином, кверцетином, эвгенолом, куркумином, капсаицином, тимолом, танином, катехином и сиреневым альдегидом.

2.  Найдены условия экстракции активных компонентов специй с помощью 0.1 М раствора Brij® 35 с ультразвуковой обработкой. Установлено, что максимальное извлечение дости-гается при однократной экстракции в течение 10 мин. Соотношение сырье/экстрагент зависит от вида специй.

3.  Оценена интегральная антиоксидантная емкость мицеллярных экстрактов 21 специи. Уста-новлено, что наибольшая антиоксидантная емкость характерна для гвоздики и корицы (433±4 и 289.5±14.5 Кл/г, соответственно), а наименьшая для тмина (23.2±2.0 Кл/г), что обусловлено природой активных компонентов специй и экстрагента.

Благодарности

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (проект 14-03-31173).

Литература

[1]  , , Будников показатели объектов анализа и возможности электрохимических методов. Вестник ТО РЭА. 2004. №1. С.54-61.

[2]  Calucci L., Pinzono C., Zandomeneghi M., Capocchi A., Ghiringhelli S., Saviozzi F., Tozzi S., Galleschi L. Effects of gamma-irradiation on the free radical and antioxidant contents in nine aromatic herbs and spices. J. Agric. Food Chem. 2003. Vol.51. No.4. P.927-934.

[3]  Pellegrini N., Serafini M., Colombi B., del Rio D., Salvatore S., Bianchi M., Brighenti F. Total antioxidant capacity of plant foods, beverages and oils consumed in Italy assessed by three different in vitro assays. J. Nutr. 2003. Vol.133. No.9. P.2812-2819.

[4]  Brand-Williams W., Cuvelier M. E., Berset C. Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity. LWT – Food Sci. Technol. 1995. Vol.28. No.1. P.25-30.

[5]  Noipa T., Srijaranai, Tuntulani S. T., Ngeontae W. New approach for evaluation of the antioxidant capacity based on scavenging DPPH free radical in micelle systems. Food Res. Intern. 2011. Vol.44. No.3. P.798-806.

[6]  Waterhouse A. L. Determination of total phenolics. In: Current protocols in food analytical chemistry. R. E. Wrolstad (Ed). New York: John Willy & Sons. 2002. Vol.247. P.237-241.

[7]  Karadag А., Ozcelik B., Saner S. Review of methods to determine antioxidant capacities. Food Anal. Meth. 2009. Vol.2. No.1. P.41-60.

[8]  MacDonald-Wicks L. K., Wood L. G., Garg M. L. Methodology for the determination of biological antioxidant capacity in vitro: a review. J. Sci. Food Agric. 2006. Vol.86. No.13. P.2046-2056.

[9]  Magalhães L. M., Segundo M. A., Reis S., Lima J. L. Methodological aspects about in vitro evaluation of antioxidant properties. Anal. Chim. Acta. 2008. Vol.613. No.1. P.1-19.

[10]  Gülçin İ. Antioxidant activity of food constituents: an overview. Arch Toxicol. 2012. Vol.86. No.3. P.345-391.

[11]  Benzie I. F., Strain J. J. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of «antioxidant power»: the FRAP assay. Anal. Biochem. 1996. Vol.239. No.1. P.70-76.

[12]  Ziyatdinova G. K., Budnikov H. C. Evaluation of the antioxidant properties of spices by cyclic voltammetry. J. Anal. Chem. 2014. Vol.69. No.10. P.990-997.

[13]  , , Гайсина бром - реагент для определения антиоксидантной способности соков и экстрактов. Зав. лаб. Диагн. матер. 2002. Т.68. №9. С.12-15.

[14]  , , Будников бром – кулонометрический реагент для оценки биодоступности полифенолов. Журн. аналит. химии. 2011. Т.66. №3. С.308-316.

[15]  Нгуен , Зиятдинова способность мицеллярных экстрактов специй. Всеросс. школа-конф. студентов, аспирантов и молодых ученых "Материалы и технологии XXI века". Казань. 2014. С.285.

[16]  Wu T. S., Leu Y. L., Chan Y. Y., Yu S. M., Teng C. M., Su J. D. Lignans and an aromatic acid from Cinnamomum philippinense. Phytochemistry. 1994. Vol.36. No.3. P.785-788.

[17]  Leela N. K., Sapna V. P. Clove. In: Chemistry of spices. – CABI. 2008. P.190-210.

[18]  Shan B., Cai Y. Z., Sun M., CORKE H. Antioxidant capacity of 26 spice extracts and characterization of their phenolic constituents. J. Agric. Food Chem. 2005. Vol.53. No.20. P.7749-7759.

[19]  Mathew S., Abraham T. E. Studies on the antioxidant activities of cinnamon (Cinnamomum verum) bark extracts, through various in vitro models. Food Chemistry. 2006. Vol.94. No.4. P.520-528.

[20]  Eds. Parthasarathy V. A., Chempakam B., Zachariah T. J. Chemistry of spices. CABI. 2008. 445p.

[21]  Gupta A. D., Bansal V. K., Babu V., Maithil N. Chemistry, antioxidant and antimicrobial potential of nutmeg. J. Gen. Eng. Biotech. 2013.Vol.11. No.1. P.25-31.

[22]  Nadeem M., Anjum F. M., Khan M. R., Saeed M., Riaz A. Antioxidant potential of bell pepper (Capsicum annum L.)-A Review. Pak. J. Food Sci., 2011. Vol.21. No.1-4. P.45-51.

[23]  Škerget M., Kotnik P., Hadolin M., Hraš A. R., Simovic M., Knez Z. Phenols, proanthocyanidins, flavones and flavonols in some plant materials and their antioxidant activities. Food Chem. 2005. Vol.89. No.2. P.191-198.

[24]  Lee S.-J., Umano K., Shibamoto T., Lee K.-G. Identification of volatile components in basil (Ocimum basilicum L.) and thyme leaves (Thymus vulgaris L.) and their antioxidant properties. Food Chem. 2005. Vol.91. No.1. P.131-137.

[25]  Parthasarathy V. A., Zachariah T. J. Coriander. In: Chemistry of spices. – CABI. 2008. P.190-210.

[26]  Amin Gh. Cumin. In: Handbook of herbs and spices. V.1. – Boca Raton: CRC Press. 2004. P.164-167.

[27]  Vasala P. A. Ginger. In: Handbook of herbs and spices. V.1. – Boca Raton: CRC Press. 2004. P.195-206.

[28]  Padmashree A., Roopa N., Semwal A. D., Sharma G. K., Agathian G., Bawa A. S. Star-anise (Illicium verum) and black caraway (Carum nigrum) as natural antioxidants. Food Chem. 2007. Vol.104. No.1. P.59-66.

[29]  Miceli N., Trovato A., Dugo P., Cacciola F., Donato P., Marino A., Bellinghieri V., La Barbera T. M., Güvenç A., Taviano M. parative analysis of flavonoid profile, antioxidant and antimicrobial activity of the berries of Juniperus communis L. var. communis and Juniperus communis L. var. saxatilis Pall. from Turkey. J. Agric. Food Chem. 2009. Vol.57. No.15. P.6570.

[30]  Miceli N., Trovato A., Marino A., Bellinghieri V., Melchini A., Dugo P., Cacciola F., Donato P., Mondello L., Güvenç A., De Pasquale R., Taviano M. F. Phenolic composition and biological activities of Juniperus drupacea Labill. berries from Turkey. Food Chem. Toxicol. 2011. Vol.49. No.10. P.2600.

[31]  Chempakam B., Sindhu S. Small cardamom. In: Chemistry of spices. – CABI. 2008. P.41-58.

[32]  Brewer M. S. Natural antioxidants: sources, compounds, mechanisms of action, and potential prehensive reviews in Food Sci. and Food Safety. 2011. Vol.10. No.4. P.221-247.

[33]  Laribi B., Kouki K., Mougou A., Marzouk B. Fatty acid and essential oil composition of three Tunisian caraway (Carum carvi L.) seed ecotypes. J. Sci. Food Agric. 2010. Vol.90. No.3. P.391-396.

[34]  Charles D. J. Caraway. In: Antioxidant properties of spices, herbs and other sources. New York: Springer. 2013. P.198-206.