Фармацевтический факультет (ФГОС-3)
Аналитическая химия
Занятие 9 2 курс Модуль I
Лабораторная работа: «Разделение и обнаружение галогенид-ионов методом одномерной восходящей тонкослойной хроматографии»
Аппаратура. Разделительная камера представляет собой соответствующий размеру пластинки с тонким слоем (силуфол) сосуд, например, обычный кристаллизатор с плоским дном. Высота камеры при размере пластинки 20 х 20 см примерно 25 см. Пластинку поддерживают в вертикальном положении с помощью подставки – стеклянной палочки. На задней стенке камеры прикрепляют смоченную растворителем (подвижной фазой) полоску фильтровальной бумаги, доходящую до дна камеры, для лучшего высыхания камеры парами растворителя. Сверху камеру закрывают пришлифованной крышкой или стеклом.
Состав подвижной фазы: 65 мл ацетона, 20 мл н-бутанола, 10 мл конц. аммиака, 5 мл дистиллированной воды и 0,5 мл ацетилацетона, который способствует лучшему формированию пятен, уменьшению «хвостов».
Нанесение образца на пластинку. На пластинке с готовым слоем сорбента (силуфол) острой иглой проводят стартовую линию на расстоянии 2 см от нижнего края. На стартовую линию наносят пробу (объёмы проб по 5 мкл) анализируемой смеси галогенид-ионов (F-, Cl-, Br-, I-) и одновременно растворы сравнения этих же анионов по 5 мкл 1,00 моль/л растворов NaF, NaCl, KBr, KI). Расстояние между каплями должно быть не менее 1 см. Для надёжности идентификации капли подсушивают.
Получение хроматограммы. Пластинку помещают в камеру для хроматографирования. Нижний край её погружают в растворитель не более, чем на 5 мм. Хроматографирование продолжают 1,5 – 2 часа. Анионы продвигаются по пластинке в виде аммонийных солей, катионы щелочных металлов остаются на старте. После этого пластинку вынимают, отмечают линию фронта, тщательно высушивают над песочной баней.
Обнаружение анионов. Для обнаружения пятен (после развития хроматограммы и высушивания пластинки) хроматограмму опрыскивают 0,1%-ным раствором бромкрезолпурпурного в этаноле, к которому добавлена 1 капля аммиака или 1,0%-ным раствором аммиачного раствора нитрата серебра и 0,1%-ным раствором флуоресцеина в этаноле. В первом случае аммонийные соли дают желтые пятна, а ионы щелочных металлов – ярко-синие (на старте). Во втором случае обнаружение ведут в УФ-свете. Для обнаружения фторид-ионов пластинку опрыскивают 0,1%-ным раствором циркониевоализаринового лака. При этом наблюдается исчезновение красного окрашивания лака.
Рассчитывают Rf анионов по формуле: Rf = l / L, где l – расстояние, пройденное анионом при хроматографировании, L – расстояние, пройденное растворителем при хроматографировании. Rf анионов уменьшаются в ряду:
F - > Cl - > Br - > I-.
