Результаты научных исследований включены в методические рекомендации «Диагностика заболеваний мочевыделительной системы у кошек на примере экспериментального гидронефроза» (рассмотрены и одобрены Государственной ветеринарной инспекцией Пермского края, 2012). Материалы диссертационной работы используются в ветеринарных клиниках города Перми и в учебном процессе на факультетах ветеринарной медицины Вятской и Пермской сельскохозяйственных академий в качестве научного обеспечения учебной дисциплины «Болезни мелких домашних животных».
Публикации результатов исследования. Основные положения диссертационной работы отражены в 5 научных статьях, в том числе 3 – в ведущих научных рецензируемых журналах и изданиях, перечень которых утвержден Высшей аттестационной комиссией Российской Федерации (журнал «Аграрный вестник Урала», Ученые записки Казанской ГАВМ им. Н. Э. Баумана).
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Методика воспроизведения экспериментального гидронефроза у кошек.
2. Изменения лабораторно-клинических и биохимических показателей крови и мочи у кошек на ранних стадиях развития гидронефроза.
3. Морфологическая характеристика почек у кошек в эксперименте на ранних стадиях развития гидронефроза посредством ультразвукового и рентгенологического исследований.
4. Гистологическая картина гидронефротической трансформированной и контралатеральной почек у кошек на ранних стадиях развития экспериментальной патологии.
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 116 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждений полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, приложений, списка литературы. Диссертация содержит 14 таблиц, 32 рисунка. Список литературы включает 195 источников, в том числе 39 на иностранных языках.
Материалы и методы исследования.
Исследования проводились в период 2007-2011 г. на базе ФГБОУ ВПО Пермская ГСХА, ГБУ ВПК «Пермская СББЖ». Объектом исследований служили беспородные кошки в возрасте от года до 5 лет, разнополые, весом 3500-4500 г, 16 животных. Все животные клинически здоровы.
Для изучения патологий мочевыделительной системы и различных способов диагностики данных заболеваний, нами был смоделирован экспериментальный гидронефроз путем иммобилизации левого мочеточника в нижней трети наложением лигатуры. Для этого сформировали две группы животных по методу сбалансированных групп - контрольную (n =8) и опытную (n=8).
У животных были проанализированы их габитус, морфологические, биохимические показатели крови и общий анализ мочи, результаты рентгенологического, ультразвукового исследования в 1-й и 10-й день эксперимента. На 10-й день после операции у животных проводили забор почек для патологоанатомического исследования.
Методы. В крови определяли: количество эритроцитов и лейкоцитов – счётчиком форменных элементов крови «Пикоскель ПС-4М», гемоглобин – гемоглобинометром «Мини ГЕМ-540», гематокрит - общепринятыми методами, скорость оседания эритроцитов (СОЭ) – по Панченкову, лейкоцитарную формулу – счётчиком лабораторным СЛ-1 (мазки окрашивали по Романовскому-Гимза). В сыворотке крови оценивали биохимические показатели: общий билирубин - методом Ендрашика-Грофа, сахар - глюкозооксидазным методом, аланинаминотрансферазу (АлАТ) и аспартатаминотрансферазу (АсАТ) – унифицированным методом Райтмана-Френкеля, калий – нефелометрическим методом без депротеинизации и натрий - колориметрическим, альфа-амилазу – унифицированным методом Каравея, мочевину – уреазным фенол-гипохлоритным методом, креатинин – методом Яффе с депротеинизацией, общий белок – биуретовым методом. При общем анализе мочи учитывали цвет, прозрачность, удельный вес (рефрактометр), рН (индикаторные бумажки); белок, эритроциты, лейкоциты, мочевой осадок с помощью центрифугирования и микроскопии. Для рентгенологического исследования использовали аппарат 12П5, контрастное вещество урографин 76%. Ультразвуковое исследование почек проводили на аппарате эхотомоскоп «РАСКАН» ЭТФ-Д-05П. Гистологическое исследование почки с фиксацией в 10% растворе нейтрального формалина. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином по Гроту, по Ван Гизону и Вейгерта.
Цифровой материал обрабатывали статистически с использованием программ Mikrosoft Offise – Mikrosoft Word и Mikrosoft Excel с вычислением среднего арифметического, средней ошибки и вычисления вероятности (Р) с использованием критерия Стьюдента.
Собственные исследования
1. Клинико-гематологический анализ кошек.
Обследование (термометрия, измерение частоты дыхания и пульса) животных контрольной и опытной групп проводили до развития экспериментальной почечной патологии и после неё. В 1-й день обследования изменений не наблюдалось. На 10-й день у животных опытной группы наблюдалось общее угнетение, снижением аппетита. При пальпации брюшной полости в области почек наблюдалось беспокойство животных, увеличение размеров почки с левой стороны.
Нами был проведен анализ клинического, биохимического исследования крови и анализ мочи животных контрольной и опытной групп на 1-й и 10-й дни эксперимента. В работе использовали нормативы по П. (2004).
Из данных таблицы 1 следует, что гематологические показатели у животных контрольной и опытной группы в 1-й день эксперимента находились на одинаковом уровне.
На 10-е сутки концентрация гемоглобина, гематокрита, эозинофилов, сегментоядерных нейтрофилов у кошек обеих групп не имела статистически достоверных различий. Содержание эритроцитов у животных контрольной и опытной групп было меньше нижнего нормативного показателя на 11% и 15 % соответственно. Содержание лейкоцитов ниже на 19% у животных опытной группы по сравнению с контрольной и меньше на 7% по сравнению с нормой. У животных опытной группы снизилось количество лимфоцитов на 11% по сравнению с контрольными и на 23% - по сравнению с нормой. Наблюдалось увеличение уровня моноцитов и СОЭ по сравнению с контролем на 29% и по сравнению с верхней границей нормы на 27%.
Таблица 1 – Клинический анализ крови кошек (n=16), (X±sx)
Показатель | 1-й день | 10-й день | Норма | ||
Контрольная группа | Опытная группа | Контрольная группа | Опытная группа | ||
Эритроциты, х10¹²/л | 4,45+0,03 | 4,47+0,04 | 4,49+0,04 | 4,27+0,33* | 5,0-10,7 |
Гемоглобин, г/л | 101,70+0,38 | 99,63+7,06 | 115,4+0,04 | 103,88+12,3 | 100-140 |
Гематокрит, % | 41,50+0,33 | 41,80+0,78 | 39,57+0,52 | 40,6+0,08 | 35-45 |
Лейкоциты, х109/л | 7,97+0,31 | 7,75+0,26 | 10,05+0,11 | 8,26+0,04* | 10-15 |
Базофилы, % | 0 | 0 | 0 | 0 | 0-2 |
Эозинофилы, % | 4,14+0,51 | 3,02+0,04 | 4,21+0,22 | 3,97+0,02 | 2-6 |
Палочкояд. нейтроф, % | 3,82+0,24 | 4,08+0,19 | 3,70+0,18 | 4,41+0,18* | 3-9 |
Сегментояд. нейтроф, % | 55,65+0,95 | 55,31+0,99 | 50,82+0,30 | 52,87+1,24 | 40-45 |
Лимфоциты, % | 23,85+1,89 | 24,50+0,66 | 27,01+0,59 | 24,50+0,98* | 36-51 |
Моноциты,% | 4,57+0,16 | 5,34+0,18 | 4,21+0,15 | 5,99+0,14* | 1-5 |
СОЭ, мм/ч | 8,40+0,43 | 8,35+0,26 | 5,60+0,22 | 9,38+0,20* | 7-9 |
*P <0,05 - P <0,001 - различия между животными опытной и контрольной гр.
Таким образом, развитие экспериментальной почечной патологии повлияло на морфологию крови, особенно на количество лейкоцитов, палочкоядерных нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов. Существенно повысилась СОЭ, что возможно связано с воспалительным процессом в организме. Данные показатели имеют существенные различия по сравнению с дооперационным периодом, тем не менее, полученные нами данные явным образом не свидетельствуют о почечной патологии.
2. Результаты биохимического анализа крови кошек. В первый день эксперимента биохимические показатели крови кошек разных групп были в пределах нормы. Данные таблицы 2 показывают, что на 10-й день у кошек опытной группы уровень глюкозы был ниже на 26% по сравнению с контрольной, но оставался в пределах нормы. Содержание щелочной фосфатазы у них было достоверно выше, как в сравнении с контрольной группой, так и с показателями нормы (на 43% и 13% соответственно).
Таблица 2 - Биохимические показатели крови кошек (n=16), (X±sx)
Показатель | 1-й день | 10-й день | Норма | ||
Контрольная группа | Опытная группа | Контрольная группа | Опытная группа | ||
Билирубин общий, мкмоль | 6,68±0,16 | 7,00+0,54 | 5,60+0,19 | 5,40+0,26 | 2-8 |
Глюкоза, ммоль/л | 5,06+0,15 | 4,88+0,10 | 4,84+0,25 | 3,59+0,09* | 3,4-6,9 |
Щел. фосфатаза, ммоль/ч. л | 64,75+1,86 | 66,40+1,49 | 63,28+5,59 | 73,60+1,46 | 12-65 |
АсАТ, ммоль/ч. л. | 38,87+1,75 | 39,85+1,93 | 35,20+0,98 | 47,0+1,72* | 9-39 |
АлАТ, ммоль/ч. л. | 49,92+2,17 | 51,80+2,76 | 45,20+2,04 | 41,33+1,34 | 8-52 |
Калий сыворотки, ммоль/л | 4,82+0,06 | 4,91+0,31 | 4,70+0,06 | 4,85+0,05* | 3,8-5,3 |
Натрий сыв-ки, ммоль/л | 141,95+0,23 | 143,30+0,69 | 144,85+0,15 | 148,40+0,52* | 146-158 |
Амилаза, ммоль/ч. л. | 920,0+5,39 | 909,0+4,8 | 1024,0+13,2 | 1095,50+1,81 | 371-1192 |
Мочевина, ммоль/л | 8,52+0,20 | 9,16+0,16 | 8,12+0,09 | 11,42+0,18* | 5-11 |
Креатинин, ммоль/л | 0,15+0 | 0,15+0 | 0,14+0,01 | 0,16+0,02* | 0,04-0,15 |
Общий белок, г/л | 63,45+1,69 | 61,41+1,90 | 62,16+1,45 | 65,76+1,02 | 55-80 |
ЛДГ, ед/л | 236,60+2,97 | 240,20+3,63 | 240,0+0,14 | 243,60+2,59 | 32-225 |
*P <0,05 - P <0,001 - различия между животными опытной и контрольной гр.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 |
Основные порталы (построено редакторами)