Антихламидийная активность рекомбинантных пептидогликан-распознающих белков человека
, ,
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Научно-исследовательский институт физико-химической медицины Федерального медико-биологического агентства», Россия, Москва, *****@***com
Пептидогликан-распознающие белки человека (PGRP) являются компонентами врожденного иммунитета, активирующими, по литературным данным, двухкомпонентные системы бактерий, что вызывает их гибель. В данной работе впервые было исследовано действие рекомбинантных PGRP на внутриклеточную патогенную бактерию Chlamydia trachomatis. Были получены стабильные линии HeLa, синтезирующие рекомбинантные PGRP1, PGRP3 и PGRP4 в культуральную жидкость. Чтобы оценить эффективность заражения клеток HeLa C. trachomatis, элементарные тельца хламидий инкубировали в культуральной жидкости, содержащей PGRPs, в течение 3 часов, и заражали клетки HeLa. Через 48 часов клетки фиксировали, окрашивали антителами с флуоресцентной меткой и подсчитывали количество хламидийных включений. Активацию транскрипции генов двухкомпонентной системы ответа на стресс хламидий изучали с помощью ПЦР в режиме реального времени. В ходе работы было показано, что после инкубации элементарных телец хламидий с культуральной жидкостью, содержащей PGRPs, количество хламидийных включений в клетках HeLa через 48 часов после заражения уменьшается на 65-87% по сравнению с контролем. Также, продемонстрировано снижение инфекционной способности дочерних элементарных телец после контакта с PGRP на два порядка. В работе исследовали активацию транскрипции генов двухкомпонентной системы хламидий после взаимодействия элементарных телец с PGRP. Показано увеличение транскрипционной активности генов двухкомпонентной системы хламидий в 10-15 раз после взаимодействия элементарных телец с PGRP, при этом максимум продукции мРНК наблюдается через 2 часа после контакта элементарных телец с пептидогликан-распознающими белками человека. Таким образом, наши результаты показывают, что рекомбинантные пептидогликан-распознающие белки ингибируют развитие инфекции C. trachomatis.
