Исследование кинетических параметров и термостабильности формиатдегидрогеназы из термотолерантных дрожжей
1,2
аспирант 2 г/о
1Химический факультет МГУ им. , 119991 Москва
2 и высокие технологии МГУ», 109559, Москва
E-mail: zarubina. *****@***com
Формиатдегидрогеназа (ФДГ, КФ 1.2.1.2.) катализирует реакцию прямого переноса гидрид-иона с субстрата (формиат-иона) на никотинамидное кольцо кофермента NAD(P)+. На практике ФДГ используется в процессах тонкого органического синтеза с участием оксидоредуктаз, использующих NAD(P)H в качестве косубстрата. ФДГ восстанавливает окисленную форму кофермента, которая образуется в ходе основной реакции. В результате использования процесса регенерации NAD(P)H происходит значительное удешевление биотехнологического процесса. В нашей лаборатории в течение многих лет ведутся систематические исследования по изучению NAD+-зависимой ФДГ из различных источников. Недавно нами был клонирован новый ген ФДГ из дрожжей Ogataea parapolymorpha (OpaФДГ). Особенностью этого организма является то, что эти дрожжи являются термотолерантными и способны расти при 42 0С.
В рамках данной работы были определены кинетические параметры, зависимость активности от pH среды и изучена температурная стабильность OpaФДГ. Были изучены зависимости остаточной активности от времени при различных значениях температуры, pH и ионной силы буфера. Показано, что данный фермент имеет довольно близкие значения KM, как по NAD+, так и по формиату к таковым для формиатдегидрогеназ из растений, но не дрожжей и бактерий, однако при этом по термостабильности OpaФДГ превосходит растительные ФДГ. Полученные данные свидетельствуют о перспективности использования данного фермента на практике.
Автор выражает благодарность научным руководителям: к. х.н., н. с. Алексеевой А. А. и д. х.н., проф.
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (гранты 14-04-01625-а) и Российского научного фонда (грант 16-14-00043).
