Результаты клинических исследований по IDUNE
Мезотерапия для омоложения кожи:
Оценка субэпидермального низко-эхогенного диапазона ультразвуковым методом с перекрестным сканированием в В-режиме
Франческо Лаккарубба, Аврора Тедеши, Беатрис Нардон, Джузеппе Микали
Дерматологическая клиника, Университет Катании, Катания, Италия
Резюме: Ориентированный на кожу ультразвук является неинвазивным методом, который широко используется для оценки возрастных изменений кожи, а также наличия субэпидермального низко-эхогенного диапазона (СНЭД), который связан с хроническим воздействием ультрафиолетового излучения в нескольких исследованиях. Так как СНЭД связан с фотостарением, цель данного исследования заключалась в оценке с помощью ультразвуковой визуализации воздействия мезотерпаии на фотостарение кожи, которая в настоящее время используется в косметической дерматологии для омоложения кожи.
Двадцать женщин (средний возраст 46,7 лет, диапазон 40-60 лет) с физическими признаками умеренного фотостарения на тыльной поверхности рук были приглашены и обработаны несколькими микроинъекциями соли гиалуроновой кислоты(ГК) биотехнологического происхождения (1000 кД) каждую неделю в течение 4 недель. У всех испытуемых ультразвуковая оценка проводилась при каждом визите и через 1 неделю после окончания лечения, чтобы оценить изменения СНЭД эхогенности в процессе лечения. В конце исследования, статистически значимо (p < 0.001) увеличенная СНЭД эхогенность (со средним увеличением пиксельных чисел до 31,3%)наблюдалась у 15 из 19 субъектов, участвовавших в исследованиях.
Наше предварительное исследование предполагает, что мезотерапия с ГК может быть эффективным средством для лечения фотостарения кожи, что было подтверждено с помощью ультразвука. Последующие исследования на больших группах пациентов необходимы для дальнейшей оценки безопасности, эффективности и продолжительности эффекта этого терапевтического подхода к лечению старения кожи.
Ключевые слова: мезотерапия, биоомоложение, гиалуроновая кислота, ультразвук.
Введение
Старение кожи включает в себя внутреннее старение, главным образом под влиянием генетических, экологических и гормональных факторов; и фотостарение, определяемое, как дополнительное хроническое индуцирование ультрафиолетом (UV) к внутреннему старению, на долю которого приходится большинство изменений кожи, связанных с возрастом(1-3). Изменения в компонентах соединительной ткани, а именно снижение кол-ва фибробластов, коллагена и эластичных волокон, которые ответственны за многие морфологические и механические изменения, приводят к появлению морщин на коже, провисанию, потере эластичности и сухости.(4,5)
Некоторые авторы недавно предложили термин «дерматопороз»(“dermatoporosis”), чтобы включить все аспекты старения кожи, в котором важную роль играет снижение содержания гиалуроната и выраженность основных поверхностных клеточных рецепторов гиалуроната CD44 (3,6).
Ориентированный на кожу ультразвук (7,8) является неинвазивным методом, который широко используется для оценки возрастных изменений кожи. В 1989 году некоторые авторы(9) описали низкоэхогенную волновую структуру, которая называется субэпидермальным низкоэхогенным диапазоном (СНЭД), который располагается непосредственно под эпидермальным входом эхо фотоповрежденной кожи. После этого наблюдения СНЭД имеет дальнейшее описание, в связи с хроническим воздействием ультрафиолетового излучения в нескольких исследованиях (10-13).
Так как СНЭД эхогенность связана с фотостарением (12), целью данного исследования была оценка с помощью ультразвукового воздействия на кожу с фотостарением эффекта от мезотерапии (также называемой биоомоложением, биоревитализацией и мезолифтом), которая в настоящее время используется в косметической дерматологии для омоложения кожи (14-18).
Материалы и методы
В это открытое пилотное исследование были приглашены 20 человек (средний возраст 46,7 лет, диапазон 40-60 лет) после подписания письменного информированного согласия.
Критерии отбора были следующими: женский пол, возраст от 40 до 65 лет, наличие физических признаков умеренного фотостарения на тыльной стороне рук.
Противопоказаниями были: проведение химических пилингов в последние 4 недели, история аллергий и/или воспаленного контактного дерматита на руках, системные заболевания, психические заболевания и беременность.
Каждому пациенту вводилось несколько микроинъекций соли гиалуроновой кислоты (ГК)(натрия хлорида, фосфата натрия хлорида) биотехнологического происхождения (1000 Кд) (Idune®); 10 человек получили соли ГК в концентрации
16 мг/мл и 10 получили в концентрации 20 мг/мл, препарат вводился в тыльную сторону рук каждую неделю на протяжении 4 недель. Каждый сеанс состоял из примерно 30 инъекций на каждой руке с максимальным общим вводимым объемом в 1 мл. Пациенты были проинструктированы применять солнцезащитный крем максимальной концентрации (СПФ 50) на обратную сторону рук в течение всего периода исследования.
У всех пациентов ультразвуковая оценка проводилась при каждом визите 1 раз в неделю после последнего сеанса на площади, соответствующей местоположению второй метакарпальной кости левой руки, исследование проводилось в одинаковых условиях окружающей среды, чтобы оценить изменения СНЭД-эхогенности в процессе лечения.
График лечения и ультразвуковая оценка приведены в Таблице 1.
Таблица 1. График лечения и ультразвуковой оценки
Неделя 0 (базовая линия) Неделя 1 Неделя 2 Неделя 3 Неделя 4
Расписание
лечения X X X X
Ультразвуковая
оценка X X X X X
Перекрестное сканирование в В-режиме сканирования было получено с помощью
Ультразвуковой системы в 22 Мгц (EasyScan Echo®,Business Enterprise, Трапани, Италия). Для каждой рассматриваемой области, амплитуда эхо одного элемента изображения (пиксели) в СНЭД прописывалась на цифровой шкале (0-255) и средний серый объем измерялся программным обеспечением общественного публичного домена ImageJ (доступного на http://rsb. info. nih. gov/ij/). Наконец, статистические анализы данных, полученных до и после лечения, проводились с использованием параметрического т-теста для парных образцов. Р-значение 0,05 считалось статистически значимым.
Результаты
В начале исследования, перед инъекциями ГК, ультразвук показал присутствие СНЭД у всех пациентов (рис.1)
Рис 1.
Ультразвуковое изображение фотоповрежденной кожи: наличие субэпидермального низкоэхогенного диапазона (СНЭД), расположенного ниже эпидермального входа эхо.
В тот же визит, после инъекций ГК, ультразвук показал отсутствие нормальной структуры кожи за счет присутствия микропапул в результате микроинъекций. Затем, ультразвуковая оценка была сделана через 1 неделю после первой инъекции сразу перед следующими инъекциями ГК. Девятнадцать человек завершили участие в исследовании и их данные были оценены.
Очевидное увеличение эхогенности СНЭД наблюдалось у 15 из 19 пациентов со средним увеличением пиксельных чисел, равных 31,3% (p< 0.001)(Табл.2, рис.2-3).
Никакой разницы не было обнаружено между двумя концентрациями ГК.
Таблица 2. Результаты субэпидермального низко-эхогенного диапазона (СНЭД) эхогенности каждого исследуемого участка в начале и после 4 недель лечения, и процентное изменение.
СНЭД эхогенность в начале СНЭД эхогенность после Изменения
исследования (пиксели) 4 недель (пиксели) (%)
Пациент 1 12.265 17.319 + 41.2
Пациент 2 15.653 21.728 + 38.8
Пациент 3 14.938 21.201 + 41.9
Пациент 4 12.146 12.454 –
Пациент 5 10.186 12.513 + 22.8
Пациент 6 8.310 12.488 + 50.2
Пациент 7 21.801 21.429 –
Пациент 8 20.198 24.674 + 22.16
Пациент 9 21.494 29.679 + 38.08
Пациент 10 11.501 14.622 + 27.13
Пациент 11 12.471 14.991 + 19.56
Пациент 12 9.391 11.681 + 24.38
Пациент 13 20.821 20.901 –
Пациент 14 11.024 13.756 + 24.78
Пациент 15 15.855 15.826 –
Пациент 16 9.823 15.101 + 53.73
Пациент 17 13.339 16.334 + 22.45
Пациент 18 16.926 20.214 + 19.42
Пациент 19 6.598 10.210 + 54.74
Рисунок 2 пациент 2. Ультразвук тыльной стороны руки. Субэпидермальный низко-эхогенный диапазон (СНЭД) находится на исходном уровне (а). Повышенная СНЭД эхогенность после 4 недель лечения (b)
Рис.3. Пациент 12. Ультразвук тыльной стороны руки. Субэпидермальный низко-эхогенный диапазон (СНЭД) находится на исходном уровне (а). Повышенная СНЭД эхогенность после 4 недель лечения (b).
Рисунок 4 показывает изменение СНЭД эхогенности на протяжении лечения. (фото в оригинале)
Обсуждения
В течение последнего десятилетия увеличилось число исследований в разработке новых методов лечения и/или предотвращения признаков фотостарения кожи.
В этой связи наиболее желательной для исследований in vivo является количественная, точная и неинвазивная оценка фотостарения кожи.
Мезотерапия является умеренно инвазивной процедурой, не связанной с увеличением объемов тканей, и состоит из инъекций через дермальные мульти-проколы биологически активных веществ, таких как ГК в жидком виде. (16-18)
Недавняя конференция экспертного комитета поддержала лечение с помощью нативной ГК, назвав его полезной терапевтической процедурой для лечения фотостарения кожи. (17)
Мезотерапия с ГК при фотоповрежденной коже восстанавливает метаболическую функцию, восстанавливает функцию задержки воды в коже и увлажнение, восстанавливает тонус и эластичность кожи: все служит для уменьшения видимых признаков фотостарения. ГК способствует «омоложению» кожи путем воссоздания благоприятных условий, способствующих активации фибробластов и содействует обмену и взаимодействию между клетками во внеклеточном матриксе
(5,14,16–18).
Использование высокочастотного ультразвука в последнее время служит для визуализации и количественной оценки возрастных кожных изменений. Он показывает, что некоторые характеристики тканей, в частности, тип дермального коллагена, содержание и ориентация, влияет на эхогенность кожи. Эти факторы определяют количество коллаген-матричных интерфейсов и, следовательно, степень рассеивания звука. Дермальное эхо генерируется на границах между коллагеновыми волокнами и окружающей богатой водой основной субстанцией, изменения в волокнах и в жидком компоненте способствуют эхогенности. В частности, эластоз и базофильная деградация коллагена являются основными причинами снижения эхогенности и образования СНЭД, что подтверждается при сравнении ультразвуковых изображений с гистопатологическими характеристиками.(10,12)
В нашем исследовании, статистически значимое увеличение СНЭД эхогенности, наблюдалось у 15 из 19 человек. Ультразвуковые изменения, которые мы получили, вероятно, связаны с повышением плотности кожных коллагеновых волокон в результате активации фибробластов после лечения. Интересно, что мы заметили у четырех пациентов минимальные изменения, либо полное отсутствие изменений в эхогенности, и предполагаем, что не все пациенты одинаково реагируют на мезотерапию с ГК, и некоторые могут вообще не реагировать на нее.
ГК – это молекула, которая участвует в процессе старения кожи.(19) Она также содержится во многих косметических средствах для лечения старения кожи (4,17)
Некоторые авторы предполагают, что с возрастом происходит прогрессирующее уменьшение внеклеточного матрикса и его основного компонента ГК( которая играет
важную роль в стабилизации межклеточных структур через формирование вязкоэластичной сети вместе с коллагеновыми и эластиновыми волокнами), и приводит к потере механических свойств кожи.(3)
Соотношение между ГК и его поверхностными клеточными рецепторами CD44 недавно были оценены в исследованиях in vitro и in vivo. (3,6,19,20). Ультрафиолетовое облучение значительно сократило и содержание ГК и выраженность CD44 в эпидермисе лысых мышей (20). Кроме того, было обнаружено, что CD44 и уровень ГК уменьшается в процессе старения кожи по сравнению с кожей молодых людей(19). В связи с этим, дефекты во взаимодействии ГК и CD44 следует рассматривать, как новую цель для разработки новых терапевтических стратегий в дерматологических условиях, характеризующихся атрофией кожи и изменениями внеклеточного матрикса.(3) Недавнее исследование показало, что фрагменты ГК могут дать интересные терапевтические возможности в лечении атрофии кожи с помощью CD44- зависимых механизмов.(20)
Наши предварительные исследования показывают, что мезотерапия с ГК может быть эффективным средством для лечения фотостарения кожи, что было подтверждено с помощью ультразвука.
Молекулярный вес продукта, используемого в данном исследовании, составлял 1 млн Дальтон, очень похож на молекулярный вес эндогенной ГК, и продукт является биосовместимым. Последующие исследования на больших количествах пациентов необходимы для дальнейшей оценки безопасности, эффективности и продолжительности эффекта данного терапевтического подхода к фотостарению кожи.
Адрес для корреспонденции и запросов: Джузеппе Микали, доктор мед. наук, отделение дерматологии и венерологии, Департамент медико-хирургических наук Университета Катании, Via Santa Sofia 78,Катания, Италия, 95124 или на электронный адрес: *****@***it
Раскрытие информации/конфликт интересов: не заявлено
Ссылки
1. Yaar M, Gilchrest BA. Фотостарение: механизм, профилактика и терапия.
Br J Dermatol 2007:15: 874–887.
2. Verdier-Sévrain S, Bonté F, Gilchrest B. Биология эстрогенов в коже: последствия для старения кожи Exp Dermatol 2006: 15: 83-94
3. Lübeck RP, Berneburg M, Trelles M, et al. Самые лучшие способы остановить и/или
повернуть вспять УФ-индуцированное старение кожи: стратегии, факты и вымысел.
4. Ramos-e, - Silva M, da Silva Carneiro SC. Возрастная кожа и ее омоложение. Анти - эйдж препараты и процедуры. J Cosmet Dermatol 2007:6: 40–50.
5. Kerscher M, Bayrhammer J, Reuther T. Омолаживающее влияние стабилизированной гиалуроновой кислоты на основе геля неживотного происхождения на процессы старения кожи.
6. Kaya G, Saurat JH. Дерматопороз, синдром хронической кожной недостаточности/хрупкости. Клиникопатологические функции, механизмы, профилактика и потенциальное лечение. Дерматология 2007:215: 284–294.
7. Jemec GBE, Gniadecka M, Ulrich J. Ультразвук в дерматологии. Eur J Dermatol 2000:10: 492–497.
8. Rallan D, Harland CC. Ультразвук в дерматологии – основные принципы и применение. Clin Exp Dermatol 2003:28: 632–638.
9. de Rigal J, Escoffer C, Querleux B, et al. Оценка старения кожи человека с помощью ультразвуковой визуализации in vivo. J Invest Dermatol 1989:93: 621–624.
10. Gniadecka M, Jemec GBE. Количественная оценка хронологического старения и фотостарения in vivo: исследования эхогенности и толщины кожи. Br J Dermatol 1998:139 815–821.
11. Gniadecka M. Эффекты старения с помощью дермальной эхогенности. Skin Res Tech
2001: 7: 204-207.
12. Sandby-Moller J, Wulf HC. Ультразвуковой субэпидермальный низкоэхогенный диапазон, зависимость от возраста и участка тела. Skin Res Tech 2004: 10: 57–63.
13. Waller JM, Maibach HI. Возраст, структура и функции кожи(I): кровоток, толщина и ультразвуковая эхогенность. Skin Res Tech 2005: 11: 221-235
14. Andre P. Гиалуроновая кислота и ее использование в качестве «омолаживающего» агента в косметической дерматологии. Semin Cutan Med Surg 2004: 23:218-222
15. Verpaele A, Strand A.. Restylane SubQ Гель нестабилизированной гиалуроновой кислоты неживотного происхождения для мягкого увеличения тканей средней и нижней части лица. Aesthet Surg J. 2006: 26: 510-517.
16. Lacarrubba F, Nardone B, Tedeschi A, Nordstrom R, Micali G. Ультразвуковое исследование мезотерапии для омоложения кожи In: Tosti A, De Padova MP, eds. Атлас мезотерапии для омоложения кожи, Лондон. Informa Healthcare Ltd,2007
17. Wiest L, Kerscher M. Нативная гиалуроновая кислота в дерматологии – результаты собрания экспертов. J Dtsch Dermatol Ges 2008: 6: 176-180.
18. Iorizzo M, De Padova MP, Tosti A. Биоомоложение: теория и практика. Clin Dermatol 2008: 26: 177-181
19. Calikoglu E, Sorg O, Tran C, et al. UVA и UVB уменьшение выраженности CD44 и гиалуроната в эпидермисе мышей, которые противодействуют топическим ретиноидам. Photochem Photobiol 2006: 82: 1342-1347.
20. Kaya G, Tran C, Sorg O, et al. Обратная атрофия кожи фрагментами гиалуроната с помощью CD-44зависимого механизма. PLoS Med 2006: 3: е493.
