Учебно-методические рекомендации к занятию № 3
Тема занятия: «Физиология групп крови и системы гемостаза. Лабораторные методы определения групп крови и Rh».
Цель занятия:
1. Изучить основные характеристики групп крови человека и лабораторные методы определения групп крови и Rh.
2. Изучить механизмы гемостаза и фибринолиза.
Структура занятия | Продолжительность, мин |
Тестовый контроль | 10 |
Теоретическая часть | 45 |
Перерыв | 10 |
Практическая часть | 35 |
Рекомендуемая литература:
1. Учебник «Физиология человека» (под ред. и ). - М.: Медицина, 2001(Т.1); 2003; 2011.
2. Учебник «Нормальная физиология» (под ред. и ). - М.,2006.
3. Атлас по нормальной физиологии (под ред. и ). - М., Высшая школа, 1986.
Студенты должны знать:
Характеристики групп крови и фаз гемостаза для ответов на тестовые вопросы:• Агглютиногены содержатся в мембране эритроцитов;
• Агглютинины содержатся в плазме крови.
• В крови группы 0 (первой группы) содержатся б - и в-агглютинины;
• В крови группы А (второй группы) содержатся А-агглютиногены и в-агглютинины;
• В крови группы В (третьей группы) содержатся В агглютиногены и б-агглютинины;
• В крови группы АВ (четвертой группы) содержатся А - и В-агглютиногены;
• Резус-антигены (Rh-агглютиногены) содержатся в мембране эритроцитов;
• Антирезус-агглютинины (антитела) образуются в организме реципиента с Rh-отрицательной кровью при переливании ему Rh-положительной донорской крови;
• Резус-конфликтная беременность наступает, если у женщины с Rh-отрицательной кровью развивается плод с Rh-положительной кровью;
• При переливании Rh-отрицательной донорской крови реципиенту с Rh-положительной кровью резус-конфликт отсутствует;
• При переливании реципиенту с Rh-положительной кровью эритроцитарной массы, полученной от донора с Rh-отрицательной кровью, резус-конфликт отсутствует;
• Совокупность физиологических процессов, обеспечивающих остановку кровотечения, называется гемостазом.
• Сосудисто-тромбоцитарный гемостаз реализуется с участием эндотелия сосудов и тромбоцитов;
• Одним из показателей состояния сосудисто-тромбоцитарного гемостаза является
определение времени капиллярного кровотечения (проба Дюка).
• В первую фазу коагуляционного гемостаза происходит образование протромбиназы.
• Во вторую фазу коагуляционного гемостаза происходит образование тромбина.
• Протромбин образуется в печени;
• В третью фазу коагуляционного гемостаза происходит образование фибрина;
• Превращение растворимого фибрин-полимера в нерастворимый фибрин обеспечивает фибринстабилизирующий фактор;
• Для протекания всех фаз гемокоагуляции необходимо участие ионов кальция;
• Правильная последовательность фаз коагуляционного гемостаза: образование протромбиназы – образование тромбина – превращение фибриногена в фибрин;
• Ретракцией кровяного сгустка называется сокращение и уплотнение кровяного сгустка;
• Функциональная роль процесса фибринолиза заключается в растворении тромба и восстановлении просвета (реканализации) сосудов;
• Если нарушается процесс фибринолиза, возникает угроза развития тромбоэмболии;
• Расщепление фибрина осуществляется ферментом плазмином;
• Правильная последовательность процессов фибринолиза: образование кровяного активатора плазминогена; превращение плазминогена в плазмин, расщепление фибрина до пептидов и аминокислот;
• Вещества, блокирующие разные фазы коагуляции крови, называются антикоагулянтами.
• В тучных клетках и базофилах вырабатывается активный антикоагулянт гепарин;
• Свертывающая способность крови повышается под влиянием симпатической нервной системы.
• Свертывающая способность крови повышается при повышенном содержании в крови адреналина.
2. Ответы на вопросы для собеседования:
1. Группы крови у людей по системе АВО.
2. Методика определения групповой принадлежности крови с помощью цоликлонов.
3. Резус-фактор крови.
4. Метод определения резус-принадлежности крови с помощью цоликлона.
5. Правила проведения гемотрансфузии.
6. Гемостаз, ее стадии.
7. Тромбоцитарные факторы гемостаза.
8. Плазменные факторы гемостаза.
9. Фазы сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, их характеристика.
10. Фазы коагуляционного гемостаза, их характеристика.
11. Противосвертывающая система крови.
12. Фибринолиз, фазы фибринолиза.
13. Первичные и вторичные антикоагулянты.
14. Регуляция гемостаза и фибринолиза.
Студенты должны уметь:
1. Решить ситуационные задачи:
1. Перед проведением гемотрансфузии врач определил группу и резус-принадлежность крови пациента, и подобрал одноименную донорскую кровь.
Какие пробы необходимо провести прежде, чем приступить к гемотрансфузии? Какие проявления при проведении этих проб будут свидетельствовать о несовместимости переливаемой крови?
2. Известно, что у человека при интенсивных физических нагрузках или при резкой боли изменяется время свертывания крови.
Укажите направленность изменения свертывания крови при этих состояниях. Назовите этапы гемостаза.
2. Выполнить лабораторные работы:
Работа № 1. Определение группы крови по системе АВО с помощью моноклональных антител (цоликлонов анти-А и анти-В).
Цель: изучить методику определения группы крови человека по системе АВО.
Оборудование: цельная кровь или эритроцитарная масса, цоликлоны анти-А и анти-В, лабораторная тарелка (планшет), стеклянные палочки, пипетки, физиологический раствор.
Ход работы: Для определения группы крови по системе АВО в настоящее время используются цоликлоны: анти-А и анти-B.
Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15-25°С. В разные лунки планшета индивидуальными пипетками под соответствующими надписями наносятся по одной капле цоликлоны анти-А и анти-В. Рядом с каплями цоликлонов пипеткой наносят по одной капле исследуемой крови. Далее капли смешивают чистыми концами стеклянных палочек и наблюдают в течение 3 минут за ходом реакции, покачивая при этом планшет. Результаты реакции в каждой капле могут быть положительными, что выражается агглютинацией эритроцитов, или отрицательными. Агглютинация видна невооруженным глазом. Выглядит они в виде мелких красных агрегатов быстро сливающихся в крупные хлопья. Для исключения ложной агглютинации добавляют физиологический раствор. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.
Интерпретация результатов реакции агглютинации исследуемой крови с цоликлонами представлена в таблице:
Реакция агглютинации эритроцитов в растворе с цоликлонами | Исследуемая кровь принадлежит к группе | |
анти-А | анти-В | |
– | – | 0(I) |
+ | – | A(II) |
– | + | B(III) |
+ | + | AB(IV) |
Примечание: "+" положительный результат – агглютинация эритроцитов
"- " отрицательный результат – нет агглютинации
Рекомендации к оформлению работы: наблюдаемые результаты исследования описывают в протоколе и зарисовывают реакцию агглютинацию. Делают вывод о групповой принадлежности крови.
Работа № 2. Определение резус-принадлежности крови с помощью цоликлона анти-D.
Цель: изучить методику определения резус-принадлежности крови.
Оборудование: цельная кровь или эритроцитарная масса, цоликлон анти-D, лабораторная тарелка (планшет), стеклянная палочка, пипетка, физиологический раствор.
Ход работы: В лунку планшета наносят каплю цоликлона анти-D. Рядом с помощью пипетки помещают каплю исследуемой крови. Далее капли смешивают стеклянной палочкой и наблюдают в течение 3 минут за ходом реакции, покачивая при этом планшет. Результат реакции может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов и свидетельствует о наличии антигена D в исследуемой крови. Для исключения ложной агглютинации добавляют физиологический раствор. Отрицательная реакция свидетельствует об отсутствии антигена D в исследуемой крови.
Рекомендации к оформлению работы: наблюдаемые результаты исследования описывают в протоколе и зарисовывают увиденную реакцию агглютинации. Делают вывод о Rh-принадлежности исследованной крови.
Правила проведения гемотрансфузии.
Гемотрансфузия – лечебный метод, заключающийся во введении в кровеносное русло больного человека (реципиента) цельной крови или ее компонентов, заготовленных от донора или самого реципиента (аутогемотрансфузия). В настоящее время гемотрансфузию следует расценивать как операцию по трансплантации ткани со всеми вытекающими из этого последствиями (возможность отторжения клеточных, плазменных компонентов крови, развития аллосенсибилизации к антигенам крови и белкам плазмы).
Порядок проведения гемотрансфузии:
1. Соблюдать правила асептики и антисептики.
2. Иметь гарантию, что донорская кровь и ее компоненты получены у человека, не болевшего СПИД-ом, ВИЧ-инфекцией, сифилисом и гепатитом.
3. Определить группу крови реципиента по системе АВО и сверить полученный результат с данными об этом в истории болезни.
4. Определить группу крови донора, а если донорская кровь консервированная сверить полученный результат с данными об этом на этикетке флакона или контейнера.
5. Определить резус-принадлежность крови реципиента и сверить полученный результат с данными об этом в истории болезни.
6. Определить резус-принадлежность крови донора, а если донорская кровь консервированная сверить полученный результат с данными об этом на этикетке флакона или контейнера.
7. Если имеются расхождения между полученными врачом результатами о групповой и/или Rh-принадлежности крови реципиента и/или донора, исследование следует повторить.
8. Провести пробы на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента. Эта проба в клинических условиях выполняется с сывороткой крови реципиента, получаемой путем центрифугирования, и кровью донора. В условиях лабораторного занятия с этой целью используют имеющиеся стандартные сыворотки различных групп крови (в качестве сыворотки крови реципиента) и консервированную донорскую кровь. На предметное стекло, под которое подкладывают белую бумагу, наносят 5 капель сыворотки реципиента, к которой добавляют 1 каплю одногруппной консервированной крови донора и перемешивают их. Затем в течение 5 мин стекло покачивают и наблюдают за реакцией. Отсутствие агглютинации свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента. Появление агглютинации указывает на их индивидуальную несовместимость и на недопустимость переливания данной донорской крови.
9. Провести биологическую пробу. Эту пробу проводят следующим образом: струйно переливают 10-15 мл крови (эритроцитарной массы, ее взвеси, плазмы). Затем в течение 3 мин наблюдают за состоянием больного. При отсутствии клинических проявлений реакции и осложнений (снижение артериального давления, учащение пульса, дыхания, гиперемия лица и т. д.) струйно вводят вновь 10-15 мл крови и в течение 3 мин наблюдают за больным. Эту процедуру проводят в 3-ий раза, после чего принимают решение о возможности переливания данной крови.
