УДК 504+597.8+591.8
, , Г. Е. Әдеханова
Казахский государственный национальный университет им. аль-Фараби
E-mail: Zura. *****@***kz
Гистохимическое изучение яичников у овец разных пород после гормональной обработки в эстральный сезон
Аннотация. Изучение гистохимических методов заключается в способности локализовать субстанцию и биохимические реакции в тканях, клетках и органеллах без разрушения нормальной структуры. В результате проведенных морфологических исследований картина органов животных при применении фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) показала гистохимические изменения яичников в зависимости от дозы введенного препарата у овец разной породы. При гистохимической реакции с альциановым синим наблюдалось, что кислые мукополисахариды широко представлены в тканях яичника. Наибольшее их количество содержится в клетках гранулезы и соединительнотканной теки нормальных и атретических фолликулов. В фолликулярной жидкости также присутствуют гликозоаминогликаны. Анализ гистохимической реакции с бромфеноловым синим и альциановым синим показал, что суммарные белки и кислые мукополисахариды встречаются в оболочках яйцеклетки, в фолликулярной жидкости и в строме органа
Әр түрлі тұқымды қойлардың аналық бездерін күйлеу кезеңінде гормондық өңделуден кейін гистохимиялық зерттеу
Аннотация: Гистохимиялық әдістерді зерттеу ұлпаларда, клеткаларда және органеллаларда олардың қалыпты құрылымын өзгертпей субстанция мен биохимиялық реакцияларды шектеу қасиетіне негізделген. Жүргізілген морфологиялық зерттеулердің нәтижесі фолликулстимулдаушы гормонды (ФСГ) қолданғанда жануар органдарында әр түрлі тұқымды қойларға енгізілген препараттар дозасына байланысты аналық безде гистохимиялық өзгерістер болатынын көрсетті. Альцианды көкпен жүргізілген гистохимиялық реакцияда аналық без ұлпаларында қышқыл мукополисахаридтер көп болатындығы анықталған. Олардың көп мөлшері гранулеза клеткаларында қалыпты және атретикалық фолликулдардың дәнекер ұлпалы текалары клеткаларында кездеседі. Фолликулярлы сұйықтықта сонымен қатар глюкозоаминогликандар болады. Бромфенолды көк және альцианды көкпен жүргізілген реакциялармен жүргізілген гистохимиялық реакциялар анализі жиынтық нәруыздар мен қышқыл мукополисахаридтер жұмыртқа клеткасының қабықшасында, фолликулярлы сұйықтықта және орган стромасында кездесетінін көрсетті.
Кілтті сөздер: жұмыртқа бездері, қойлар, стимуляция, гормональды өңдеу, фолликулалар, морфология, гистохимия, гистология, фолликулдыстимуляциялау гормон (ФСГ), лютиндеуші гормон ЛГ).
Histochemical studying of ovaries in sheep of different breeds after hormonal treatment in estrous season
Annotation: The study of histochemistry methods consists in ability to localize a substance and biochemical reactions in fabrics, cages and organoids non-destructive normal structure. As a result of undertaken morphological studies the picture of organs of animals at application of follicle-stimulating hormone (FSH) showed the histochemistric changes of ovaries depending on the dose of the entered preparation for the sheep of different breed. At a histochemistry reaction with alcian observed blue, that sour mucopolisacharides is widely presented in tissues of ovary. Their most quantity is contained in the cages of granulose and connective tissue thecies of normal and atretic follicles. In a follicle liquid also there are glycosoaminoglicans. Analysis of histochemistry reaction with bromophenol blue and alcian showed that total proteins and sour mucopolisacharides met in the shells of ovule, in a follicle liquid and in duct of organ.
Key words: ovaries, sheep, stimulation, hormonal treatment, follicles, morphology, histochemistry, histology, follicle-stimulating hormone, luteinizing hormone.
Введение
Способность сельскохозяйственных животных к размножению - один из основных показателей, определяющих их хозяйственную ценность. Высшие животные размножаются половым путем, при котором новый организм развивается из зиготы, образующейся в результате слияния мужской и женской половых клеток - гамет. Образование половых клеток и все последующие процессы, обусловливающие появление на свет нового индивидуума, осуществляются системой органов размножения. Половое созревание - это морфологическое и функциональное оформление полового аппарата, когда самец становится способным оплодотворить самку, а самка - забеременеть. Непосредственной причиной, побуждающей процесс полового созревания животных, является увеличение секреции гонадотропных гормонов гипофизом (ФСГ и ЛГ), ведущее к увеличению размеров гонад, повышению их генеративной и гормональной активности. Вырабатываемые половые гормоны, помимо их влияния на развитие экстрагенитальных половых признаков, необходимы для процессов спермиогенеза и овогенеза. ФСГ повышает синтез эстрадиола гранулезными клетками за счет образования ароматических производных андрогенов, секретирующихся из текальных клеток под действием ЛГ [1-5]. Для биохимических методов характерна изысканность и высокая точность. Изучение гистохимических методов заключается в способности локализовать субстанцию и биохимические реакции в тканях, клетках и органеллах без разрушения нормальной структуры. Более того, гистохимический анализ может обеспечить информацией о физиологической активности и патологических состояниях, что трудно или невозможно получить другим путем. Это специфическое преимущество крайне необходимо при изучении такого органа как яичник, структура которого сложна и быстро меняется в зависимости от биологических ритмов организма. Большинство биохимических методов in vivo и in vitro оказываются не в состоянии обнаружить структурные субъединицы, отвечающие за определенные физиологические функции. При использовании гистохимических методов, возможно, определить активность ферментов в отдельных желтых и атретических телах, фолликулах, сети яичника и т. п. [6-7]. Целью исследовательской работы является выявление гистохимических особенностей строения яичников у животных.
Методы исследования
Объектом исследования служили яичники взрослых (4-6 лет) овцематок едильбайевской и казахской тонкорунной породы. Исследуемый материал был получен в эстральный сезон сентябрь-октябрь месяцах в одинаковых стандартных условиях экспериментальной базы «Института экспериментальной биологии им. ». Для выявления общих белков была проведена гистохимическая реакция по Даниэли с бромфеноловым синим, а для определения гликозоаминогликанов (кислых мукополисахаридов) использовали реакцию с альциановым синим по Стидмену.
Гистохимическая обработки материала проводились традиционными методами микроскопической техники приготовления тонких срезов [8]. Срезы окрашивали гемотаксилином – эозином, бромфеноловым синим и альциановым синим. Просмотр и фотографирование гистологических препаратов осуществляли при помощи светового микроскопа Leica DMLS с цифровой камерой Leica DFS 280.
Результаты и обсуждение
Для выявления общих белков была проведена гистохимическая реакция по Даниэли с бромфеноловым синим, а для определения гликозоаминогликанов (кислых мукополисахаридов) использовали реакцию с альциановым синим по Стидмену. Гистохимическая реакция с альциановым синим у овцы Едильбайевской породы в возрасте 4 года показала, что кислые мукополисахариды широко представлены в тканях яичника. Наибольшее их количество содержится в клетках гранулезы и соединительнотканной теки нормальных и атретических фолликулов. В фолликулярной жидкости также присутствуют гликозоаминогликаны (рис. 1-2).
Рис. 1 - Яичник едильбаевской овцы (4 года) видна атрезия фолликулов.
Альциановый синий. Ув х100.
Рис. 2 - Яичник овцы Едильбай (4 года): преовуляторные фолликулы.
Альциановый синий. Ув х100.
Морфологическое исследование яичников овцы казахской тонкорунной в возрасте 3 года имело обычное строение, характерное для самок млекопитающих. Строма яичника состояла из двух зон: корковой и мозговой. В наружном слое корковой зоны располагались примордиальные фолликулы. Они были самыми мелкими из фолликулов и имели снаружи плоский слой фолликулярных клеток. Обращало на себя внимание обилие антральных фолликулов (рис.3). При окраске на суммарный белок в антральном фолликуле четко выявлялись яйцеклетка с блестящей оболочкой, слои фолликулярных клеток с появляющимися мелкими полостями. Суммарный белок присутствовал во всех структурах яичника. Кроме фолликулов, хорошо окрашивалась и соединительнотканная строма органа. Фолликулярная жидкость преовуляторного фолликула также содержала белки. Помимо фолликулов разной степени зрелости в строме яичника присутствовали желтые тела. Сеть яичника в мозговой части была без особенностей.
Рис. 3 - Яичник овцы КТ 3 года: преовуляторный фолликул.
Бромфеноловый синий. Ув х100.
Гистохимическая реакция с бромфеноловым синим и альциановым синим показала, что суммарные белки и кислые мукополисахариды встречаются в оболочках яйцеклетки, в фолликулярной жидкости и в строме органа. Таким образом, овцы КТ 3-х и 8-летнего возраста являются способными к размножению, так как в их яичниках идет нормальное развитие фолликулов.
Выводы. Гистохимическая реакция с бромфеноловым синим и альциановым синим у овец показала, что суммарные белки и кислые мукополисахариды встречаются в оболочках яйцеклетки, в фолликулярной жидкости и в строме органа.
Список использованной литературы
1. Лифшиц анализы в клинике: справочник / , 11. ; 2-е изд – М.: Мед. информационное агентство, 2001. – 303 с.
2. Назаренко оценка результатов лабораторных исследований / , - М. : Медицина, 2006 – 543 с.
3. Chernecky C. C. Laboratory tests and diagnostic procedures / C. C. Chernecky, B. J. Berger; 5th ed. – Saunder Elsevier, 2008. – 1232 с.
4. Падучева, A. JI. Гормональные препараты в животноводстве / ; М.: Россельхозиздат, 1979. С. 102.
5. Теоретические и практические аспекты трансплантации зигот в племенном овцеводстве / , Е. Беталханов, Б. Орзалиев и др. // Генетика и селекция сельскохозяйственных животных. — Алма-Ата, 1986. — С. 5356.
6. Deaver R. D., Stilley N. J., Dailey R. A. Concentration of ovarian and pituitary hormones following prostaglandin F // J. Anim. Sei. 1986. - V. 62. — P. 422427.
7. Greve T., Lehn-Jensen H., Rasbech N. O. Morphological evolution of bovine embryos recovered non-surgically from superovulated dairy cows on days 6,5 to 7,5. A field study. // Ann. Biol. Anim. Biochim. Biophys. 1979. - V.19. - N5. - P. 1599-1611.
8. , Елецкий гистологии с гистологической техникой. – М.: Медицина, 1982. – 304с.
Reference
Lifshits V. M. Biochemical analyses in clinic: reference book / V. M. Lifshits, 11. V. I. Sidelnikova; the 2nd prod. – M.: Medical news agency, 2001. – 303 pages. (in Russian) Nazarenko G. I. Klinicheskaya an assessment of results of laboratory researches / G. I. Nazarenko, A. A. Kishkun - M.: Medicine, 2006 – 543 pages. (in Russian) Chernecky C. C. Laboratory tests and diagnostic procedures / C. C. Chernecky, B. J. Berger; 5th ed. – Saunder Elsevier, 2008. – 1232 с. (in Russian) Paducheva, A. JI. Hormonal preparations in animal husbandry / A. L. Paducheva; M.: Rosselkhozizdat, 1979. Page 102. (in Russian) Theoretical and practical aspects of transplantation of zygotes in breeding sheep breeding/M. M. Toyshibekov, E. Betalkhanov, B. Orzaliyev, etc.//Genetics and selection of farm animals. — Alma-Ata, 1986. — Page 5356. (in Russian) Deaver R. D., Stilley N. J., Dailey R. A. Concentration of ovarian and pituitary hormones following prostaglandin F // J. Anim. Sei. 1986. - V. 62. — P. 422427. Greve T., Lehn-Jensen H., Rasbech N. O. Morphological evolution of bovine embryos recovered non-surgically from superovulated dairy cows on days 6,5 to 7,5. A field study. // Ann. Biol. Anim. Biochim. Biophys. 1979. - V.19. - N5. - P. 1599-1611. Volkova O. V., Yelets Yu. K. Fundamentals of histology with histologic equipment. – M.: Medicine, 1982. – 304s. (in Russian)
Авторлар туралы мәлімдеме
Есимсиитова Зура Бүркітқызы – әл-Фараби атындағы Қазақ ұлттық университетінің, биология және биотехнология факультетінің, биоалуантүрлілік және биоресурстар кафедрасының доценті, б.ғ.к., ішкі 12-18, эл. адрес: Zura. *****@***kz
Базарбаева Жаннат Мүслімқызы – әл-Фараби атындағы Қазақ ұлттық университетінің, биология және биотехнология факультетінің, биоалуантүрлілік және биоресурстар кафедрасының доценті, б.ғ.к., ішкі 12-13, эл. адрес: Zhannat. *****@***kz
Манкибаева Сандугаш Аманжолқызы – әл-Фараби атындағы Қазақ ұлттық университетінің, биология және биотехнология факультетінің, биоалуантүрлілік және биоресурстар кафедрасының оқытушысы, ішкі 12-13, эл. адрес: Sandugash. *****@***kz
Аблайханова Нуржанат Татухановна – әл-Фараби атындағы Қазақ ұлттық университетінің, биология және биотехнология факультетінің, биомедицина және биофизика кафедрасының доцент қызметін атқарушысы ішкі 12-08, эл. адрес: Nurzhanat. *****@***kz
