Химия природных лекарственных веществ (стр. 6 )

Опыт №3. Получение слизевой кислоты из свекловичного жома. Двугорлую колбу (емкостью 1,5—2 л) с насадкой для улавливания пены соединяют через холодильник с водоструйным насосом (рис.13). В нее насыпают воздушно-сухой жом и наливают раствор, содержащий 280 мл азотной кислоты (плотность 1,36 г/мл) в 220 мл воды и 0,1 г перекиси марганца. Колбу помещают на водяную баню и нагревают 3 н, непрерывно всасывая через капиллярную трубку слабую струю воздуха. Горячий раствор фильтруют через стеклянный фильтр, остаток на фильтре промывают горячей водой.

Фильтрат ставят на холод: выпадает слизевая кислота. Выход 3,5—4 г; т. пл. 207—208°С. Для очистки техническую слизевую кислоту растворяют в 5%-ном растворе едкого натра, раствор осветляют активированным углем и нейтрализуют 15%- ной соляной кислотой. Выпавший после охлаждения осадок отфильтровывают и на фильтре промывают холодной водой до отсутствия ионов хлора в промывных водах. Выход 2,5—3 г; т. пл. 212—213°С.

Рис. 13. Прибор для получения слизевой кислоты

Опыт №4. Получение лимонной кислоты из махорки. Грубоизмельченньте сухие листья махорки насыпают равными порциями в три химических стакана и экстрагируют по принципу противотока 2%-ным раствором серной кислоты при комнатной температуре. В первый стакан наливают 250 мл раствора кислоты, хорошо перемешивают и выдерживают не менее 2 ч. Экстракт переливают во второй стакан, придерживая, а затем отжимая листья фарфоровым шпателем. В первый стакан наливают чистый 2%-ный раствор серной кислоты и оставляют стоять еще 2 ч. Из второго стакана настоявшийся раствор переливают в третий. После того как завершится третий цикл извлечений (из последнего стакана раствор сольют три раза), объединенный экстракт переносят в выпарительную чашку, которую устанавливают на водяной бане, нагретой до 30 – 40С°. Интенсивно перемешивая жидкость, приливают к ней 15 мл насыщенного раствора хлористого кальция. Воду в бане нагревают до кипения. В чашку осторожно вносят тонкоизмельченный мел, пока не прекратится вспенивание. Это служит признаком того, что нейтрализация окончена. Нагревание на кипящей бане продолжают еще около часа. Суспензию трехкальциевой соли лимонной кислоты (цитрата кальция) с примесью гипса переносят на воронку Бюхнера и отсасывают. Осадок на фильтре тщательно промывают горячей водой до отрицательной реакции на ионы хлора (реактив нитрат серебра) и отжимают стеклянной пробкой. Влажный осадок взвешивают на технических весах и переносят в стакан из жаростойкого стекла или фарфора. К осадку приливают серную кислоту, которая разлагает цитрат кальция. Количество серной кислоты вычисляют по уравнению

Са3(С6Н5О7)2 + 3H2SО4 → 2C6H8О7 + 3CaSО4

В стакан приливают воду так, чтобы образовалась легко перемешиваемая масса, затем добавляют порциями серную кислоту, вдвое разбавленную водой, 1 г активированного угля, стакан погружают в баню и нагревают до 75°. После хорошего перемешивания раствор лимонной кислоты фильтруют, отсасывая от гипса и угля через полотняный фильтр. Осадок на фильтре промывают небольшим количеством воды; промывные воды присоединяют к фильтрату и упаривают в два приема на водяной бане. Упаренный наполовину раствор сливают из чашки в колбу для осаждения гипса, осветляют активированным углем, вносят на шпателе небольшое количество сульфида бария и еще раз фильтруют. Вторичным упариванием раствор доводят до сиропообразного состояния, еще горячим сливают в колбочку или кристаллизатор, охлаждают до 6—8°С и вносят кристаллик лимонной кислоты для затравки. Выпавшие кристаллы отделяют от маточника и высушивают на фильтровальной бумаге. Выход лимонной кислоты после первой кристаллизации около 30—40%С. Для идентификации пробу лимонной кислоты (около 0,1 г) растворяют в 5 мл воды, прибавляют 3 мл известкового молока, непродолжительно взбалтывают и фильтруют; 2 мл фильтрата разбавляют 2 мл воды и кипятят 1 мин. Выпадает объемистый хлопьевидный осадок цитрата кальция. Эта реакция позволяет обнаружить лимонную кислоту в присутствии щавелевой и винной кислот.

6. Литература.

, , «Практикум по химии природных соединений», Москва, 1966 г., стр. 11-45. , , «Выделение и анализ природных биологически активных веществ», Томск, 1987 г. ст. 184. , , и др. Биологически активные вещества растений. Выделение, разделение, анализ. Алматы, 2006, 438с.

7. Контроль:

Как выделяют масло из семян подсолнечника? Как получают щавелевую кислоту из древесных опилок? Как получают слизевую кислоту из свекловичного жома? Как получают лимонную кислоту из махорки? Как идентифицируют лимонную кислоту?

Занятие №8

1. ТЕМА: ГЛИКОЗИДЫ И АГЛИКОНЫ

.

2. Цель: Ознакомить студента с основными методами выделения и анализа гликозидов и агликонов

3. Задачи обучения: Студент должен научиться выделять и проводить анализ гликозидов и агликонов

4. Основные вопросы темы:

Получение амигдалина из плодов миндаля Получение рутина и кверцетина из листьев гречиха (или из листьев табака) Получение гицирризиновой кислоты из корней солодки

5. Методы обучения и преподавания: лабораторная работа

Лабораторная работа

Опыт №1. Получение амигдалина из плодов миндаля. Освобожденные от скорлупы ядра косточковых плодов горького миндаля или персика засыпают на 1—2 мин в кипящую воду, чтобы легко удалить с них оболочку. В ступке измельчают 100 г ядер и обезжиривают обычным способом в аппарате Сокслета. Исходное сырье (шрот, жмых) при незначительном количестве в нем жира можно не обезжиривать. Обезжиренный материал кипятят в 100 мл 90%-ного этилового спирта в колбе с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. Экстракт сливают, а затем повторяют ту же обработку еще раз. Объединенную вытяжку отфильтровывают и упаривают в вакууме до небольшого объема. Добавляют к концентрату равный объем эфира. Почти сразу высаживается кристаллический амигдалин. Осадок промывают эфиром, растворяют в небольшом количестве горячей воды, раствор ставят в эксикатор над серной кислотой на кристаллизацию. Кристаллы отфильтровывают и высушивают. Выход, в зависимости от содержания в исходном материале, 2—4 г; т. пл. 200°С.

Опыт №2. Получение рутина и кверцетина из листьев гречиха (или из листьев табака). Измельченные листья гречихи 2 ч обрабатывают в аппарате Сокслета 70%-ным раствором этилового спирта. Растворитель отгоняют на водяной бане под вакуумом из небольшой колбы почти досуха. Остаток обрабатывают дважды эфиром по 10 мл, сливая раствор через воронку с тампончиком ваты. Остаток освобождается от смол и жироподобных веществ. После испарения эфира воздушным продуванием (тампончик также помещают в колбочку) рутин извлекают в два приема кипящей водой по 20—25 мл. Экстракт каждый раз фильтруют. Раствор ставят на кристаллизацию (охлаждение). Выпавшие кристаллы при необходимости можно еще раз перекристаллизовывать из метилового спирта. Выход 0,3—0,4 г. Из воды кристаллизуется тригидрат рутина состава С27Н30О16·3Н2О; т. пл. 192°С. Из абсолютного метилового спирта выпадает свободный рутин; т. пл. 198°С.

Кверцетин, или 3,5,7,3',4'-пентаоксифлавон. В 2 мл спирта растворяют 0,4 г рутина, добавляют к раствору 20 мл 1%-ной соляной кислоты; реакционную смесь выдерживают при 35—40°С. После длительного стояния из гидролизата выпадают кристаллы кверцетина. Из воды и разбавленного спирта он кристаллизуется в виде гидрата. Кверцетин легко растворяется в щелочах. Восстанавливает аммиачный раствор нитрата серебра на холоду и раствор Фелинга при нагревании.

Цветные реакции.

С раствором хлорного железа рутин и кверцетин дают интенсивное зеленое окрашивание. С концентрированной серной кислотой получается желтое окрашивание с зеленоватой флуоресценцией.

Опыт №3. Получение гицирризиновой кислоты из корней солодки

Получение глицирризиновой кислоты. Разрубленные на мелкие кусочки корни солодки заливают пятикратным количеством воды и, поддерживая легкое кипение воды, экстрагируют 6—7 ч. Экстракт сливают и водное извлечение повторяют. Соединенную водную вытяжку кипятят; скоагулировавшие белковые вещества отделяют после охлаждения, процеживая раствор через редкую ткань. Фильтрат упаривают на водяной бане до 350 мл. К охлажденному раствору небольшими порциями при сильном перемешивании добавляют 13 мл концентрированной серной кислоты. Выпадает вязкий коричневый осадок. Жидкость сливают, а осадок разминают, приливая большое количество воды. После двух-трехкратного промывания водой и декантации осадок превращается в порошок, который отфильтровывают и высушивают на воздухе. Выход 20 г. Неочищенную глицирризиновую кислоту помещают в круглодонную колбу, снабженную обратным холодильником. Приливают 200 мл ацетона и нагревают 3 ч. Экстракт сливают, а остаток повторно экстрагируют 100 мл ацетона. Объединенный ацетоновый экстракт фильтруют. К фильтрату, сильно помешивая, добавляют небольшими порциями спиртовой раствор едкого кали (около 2 г в 16 мл) до слабощелочной реакции на индикаторную бумагу. При быстром прибавлении или большом избытке щелочи образуется осадок в виде вязкой массы, что нежелательно. Выпавший в виде мелких хлопьев осадок трикалиевой соли отделяют, промывают на фильтре небольшим количеством ацетона и после высушивания растирают в порошок. Выход около 10 г.

6. Литература.

, , «Практикум по химии природных соединений», Москва, 1966 г., стр. 11-45. Музычкина и реактивы для химического анализа некоторых групп БАВ в лекарственном растительном сырье. Учебное пособие, Алматы, 2002, 92с. , , Покровский кислота // Биоорганическая химия. 1997., том 23, – № 9. – С. 691-709

7. Контроль:

Как получают амигдалин из плодов миндали? Как получают рутин и кверцетин из листьев табака? Как определяют углеводы в маточном растворе после выпадения кристаллов кверцетина? Как определяют рутин и кверцетин цветными реакциями?

Занятие №9