FR E-2600 Лютеинизирующий гормон (ЛГ)

Набор реагентов для ИФА для количественного определения ЛГ  в сыворотке человека.

Только для in-vitro диагностики.

1. Дополнительные необходимые материалы и оборудование, не входящие в комплект:

- прецизионные микропипетки с одноразовыми наконечниками на 25- 150 мкл

- дистиллированная или деионизированная вода

- микропланшетный шейкер или инкубатор (37±1) ˚С

- микропланшетный вошер (рекомендуется)

- микропланшетный анализатор с фильтром, установленным  на длине 450 нм и пределом ОП 3.0  или больше

2. Реагенты

Храните реагенты при температуре 2 - 8 ° C до истечения срока годности

TF E-0030

Концентрат промывочного буфера х25

1 х 50 мл

Концентрат; Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость, бесцветная или бледно-желтая, может допускаться осадок, который растворяется при 35-39 ˚С и встряхивании.

TF E-0055

Субстрат

1 х 12 мл

Готов к использованию, содержит раствор тетраметилбензидина (ТМБ)

TF E-0080

Стоп-раствор

1 х 15 мл

Готов к использованию, содержит 0,2 М H2SO4

FR E-2601

Калибратор 0

1 х 2 мл

Готов к использованию

FR E-2602

Калибратор 1

1 х 0,5 мл

Готов к использованию

FR E-2603

Калибратор 2

1 х 0,5 мл

Готов к использованию

FR E-2604

Калибратор 3

1 х 0,5 мл

Готов к использованию

FR E-2605

Калибратор 4

1 х 0,5 мл

Готов к использованию

FR E-2606

Калибратор 5

1 х 0,5 мл

Готов к использованию

FR E-2631

Микропланшет покрытый анти-ЛГ антителами

1 х 96 лунок

Один 96-ти луночный (разборный) планшет покрытый моноклональными антителами ЛГ. После вскрытия следует использовать в течение одного месяца.

FR E-2640

Конъюгат

1 х 12 мл

ЛГ конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP). Содержит 0,1% проклин 300, 0,004% гентамицина сульфата в качестве консерванта. После открытия конъюгат следует использовать в течение одного месяца.

FR E-2651

Контрольная сыворотка

1 х 0,5 мл

Готова к использованию. Сыворотка человека  с определенной величиной свободного ЛГ.

после вскрытия контроли и калибраторы должны быть использованы в течении месяца.

НЕ нашли? Не то? Что вы ищете?

Калибраторы были откалиброваны согласно рекомендациям  ВОЗ  2nd IRP 80/552.

3. Процедура анализа

Перед использованием все реагенты должны достичь комнатной температуры. Стандарты, контроли и образцы проб должны быть исследованы в дублях. Как только процедура начата, все этапы должны быть завершены без перерыва.

Приготовление рабочего промывочного раствора:

Тщательно встряхните концентрат промывочного буфера.  Для приготовления рабочего промывочного раствора нужно взять необходимое количество концентрата и смешать с очищенной водой (в соотношение 1:25) в отдельном флаконе. Тщательно перемешайте раствор. Рабочий промывочный раствор можно хранить в течение 3 дней при температуре 2-8 ° С.

Извлеките необходимое количество стрипов для исследования калибраторов, контроля и сыворотки в дублях. Неиспользованные поместите обратно в алюминиевую упаковку, не удаляйте сухой силикогель,  герметично закупорьте и поместите в полиэтиленовый пакет. Храните при температуре 2-8 ° С в течении месяца. Добавьте 25 мкл каждого стандарта, контроля и исследуемых образцов сыворотки в соответствующие лунки в дублях. Добавьте 100 мкл конъюгата в каждую лунку Инкубируйте в шейкере при 500-800 об./мин. в течение 60 минут  при комнатной температуре или в инкубаторе при температуре (37±1) ˚С в течение 60 минут. Промойте каждую лунку по 5 раз: внося по 300 мкл раствора промывочного буфера, удаляя остатки влаги абсорбирующей бумагой (мы рекомендуем использовать вошер). Добавьте 100 мкл ТМБ-субстрата в каждую лунку через заданные интервалы времени Инкубируйте 20-30 минут при комнатной температуре в темном месте. Добавьте 150 мкл Стоп-раствора в каждую лунку через те же интервалы, что и в этапе 6. Осторожно перемешайте в течении 5-10 секунд. Считайте результат на микропланшетном анализаторе при 450 нм в течении 20 минут после добавления стоп-раствора.

4. Расчет результатов.

рассчитайте среднюю оптическую плотность каждого стандарта в дублях рассчитайте среднюю оптическую плотность каждого неизвестного в дублях. Вычтите среднее значение абсорбции "пустой" из средних значений оптической плотности калибраторов, контроля и образцов сыворотки. Нарисуйте калибровочную кривую на логарифмической бумаге со средней оптической плотности на Y-оси  и концентрацией стандарта на X-оси Рассчитайте значение неизвестных при помощи калибровочной кривой. Если образец получается более 100 мМЕ/мл, то разведите его олученный результат следует умножить на фактор разведения.

5. Типичная таблица данных (не используйте для расчета)


Калибратор

ОП 1

ОП 2

Средняя ОП

Концентрация (мМЕ/мл)

0

0.045

0.041

0

0

1

0.256

0.259

0.214

5

2

0.448

0.472

0.417

10

3

1.009

1.027

0.975

25

4

1.786

1.837

1.7685

50

5

2.763

2.939

2.808

100

Неизвестная

0.364

0.399

0.339

8,44

Типичная калибровочная кривая (не используйте для расчета)

см. оригинал инструкции.

Проверка теста

Анализ считается действительным при соблюдении следующих критериев. Если эти критерии не соблюдаются, то анализ считается недействительным и должен быть повторен.

ОП «пустой»: Оптическая плотность не должна быть более 0,1 при 450 нм. ОП Калибратора 5 (100 мМЕ/мл) не должна быть меньше 1,3. Полученное значение контрольной сыворотки должно быть в пределах установленного диапазона.

Чувствительность:  0.3 мМЕ

Ожидаемые нормальные значения:

Это касается всех клинических анализов: каждая лаборатория должна собирать данные и создавать свои собственные результаты ожидаемых нормальных значений. Ниже приведен основной результат исследования, которое должно использоваться только в качестве ориентира

Группа

Концентрация (мМЕ/мл)

Женщины

Фолликулярная фаза

Середина цикла

Лютеиновая фаза

Постменопауза

< 27

34-90

< 15

10 – 65

Мужчины

1.2 - 9