
Ф. И.О.: Татьяна Борисовна Никоненко
Телефон: сот. 8-952-62-37-159, раб. 8(39546) 5-62-27
E-mail:*****@***ru
Должность: Ведущий ветеринарный врач (эпизоотолог) ОГБУ «Черемховская станция по борьбе с болезнями животных» Службы ветеринарии Иркутской области
Направление подготовки: 36.06.01 Ветеринария и зоотехния
Специальность: 06.02.02 Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология
Тема научного исследования: «Ассоциированное течение вирусных болезней собак в условиях Прибайкалья»
Научный руководитель: Пётр Иванович Барышников д. в.н., профессор, заведующий кафедрой микробиологии, эпизоотологии, паразитологии и ВСЭ





1. ОБОСНОВАНИЕ ВЫБОРА НАПРАВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Актуальность темы:
В последние годы получает широкое распространение изучение вопросов ассоциативных (ассоциированных) болезней ( с соавт., 2000; , 2009; с соавт., 2011 и др.), составляющих большую часть болезней инфекционной природы и представляющие большую опасность для животных (, 1982; с соавт., 1989; , 1990; с соавт., 1995; , 1995; с соавт., 1995; , 1998; , 1999; , 1999; с соавт., 2000; , 2000; , 2000; , 2004; , 2004; с соавт., 2004; , 2005; , 2005; Burki F. et al.,1986). Наблюдается увеличение роли ассоциированных инфекций, вызванных комплексом различных этиологических агентов (, 1984; с соавт., 1984; с соавт., 1995; , 1995; , 1996; ,1998; с соавт., 1998; , 2003; , 2005;, 2007; , 2008; Латышев С. Н., 2009; с соавт., 2011).
Одной из причин распространения ассоциированных инфекций явилось появление антибиотикорезистентных микроорганизмов(, 1992; с соавт., 2010). В настоящее время резистентные и множественно резистентные формы встречаются практически у всех клинически значимых микроорганизмов (, 2002; с соавт., 2004). Как указывают (2005), (2006), в настоящее время наблюдается отсутствие эффективности многих препаратов последних поколений, которые никогда не назначали не только животным, использованным в эксперименте, но и в целом в ветеринарной медицине. В связи с этим распространение антибиотикорезистентных штаммов в ветеринарии требует изучения чувствительности возбудителей инфекционных заболеваний животных, в т. ч. собак, к антимикробным препаратам (АМП) различных поколений и фармакологических групп, а также рациональной организации антибиотикотерапии (, 2010).
Учитывая рост смешанных инфекций, перед специалистами ветеринарной медицины возникают новые требования при проведении диагностических исследований. Правильно оценить сложившуюся эпизоотическую ситуацию, эффективно спланировать профилактические и лечебные мероприятия возможно лишь в случае полного представления о структурном составе этиологически значимых инфекционных агентов, входящих в состав ассоциаций.
Цель: Выявить структурный состав этиологически значимых инфекционных агентов, входящих в состав ассоциаций при вирусных болезнях собак (чума плотоядных, парвовирусный энтерит и др.) с целью разработки комплексной системы диагностики, лечения и профилактики ассоциативных инфекционных болезней собак.
Задачи:
Изучить нозологический профиль вирусных инфекционных болезней собак на территории Иркутской области на основе сбора и систематизации данных государственной ветеринарной статистической отчетности Службы Ветеринарии и ветеринарных лабораторий. Изучить таксономическую характеристику и свойства микроорганизмов микробиоценоза здоровых собак. Выявить структурный состав этиологически значимых инфекционных агентов при ассоциированных и моно-инфекциях вирусной этиологии у собак на изучаемой территории. Изучить биохимические характеристики и фенотипические маркеры патогенности микроорганизмов у собак (антилизоцимная, адгезивная, гемолитическая, протеолитическая активность, продукция щелочной фосфатазы и ДНКазы). Дать сравнительную оценку биологической активности микроорганизмов в микробных ассоциациях и в монокультурах. Определить антибиотикорезистентность микроорганизмов, выделенных от собак при ассоциированных и моно-инфекциях, с целью определения эффективного антимикробного препарата при лечении больных собак. Определить иммунобиологическую реактивность организма собак при вирусных ассоциированных инфекциях. Разработать программу учёта и регистрации собак в ветеринарных клиниках г. Иркутск и Иркутской области. Разработать схему диагностики ассоциированных вирусных инфекций. Разработать практические предложения для оптимизации схемы лечения и профилактики ассоциативных вирусных инфекций.Предмет исследования: вирусные ассоциированные болезни собак.
Объект исследования: собаки, лабораторные животные (белые мыши, морские свинки, кролики).
2. МЕТОДЫ И МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ:
1. Определение численности и структуры популяции собак на территории Иркутской области – Рекомендации по определению численности и структуры популяции собак территориально-административных образований (), утвержденные Департаментом ветеринарии, 1999
2. Отбор проб, выделение культур микроорганизмов и их идентификация – Справочник…/ под ред. , 1982; Методические указания…, 1984; Определитель бактерий Берджи, 1997; , 2002; Медицинская микробиология, 2002; , 2006; «Методические указания по лабораторной диагностике стафилококкоза животных», утвержденных ГУВ Госагропрома СССР № 000-3 от 01.01.2001 года; «Методические указания по лабораторной диагностике стрептококкоза животных», утвержденных ГУ. вет. инспекцией при Госкомиссии СМ СССР по продовольствию и закупкам 25.09.1990 года; «Методические указания по ускоренной индикации морганелл, сальмонелл и энтеропатогенныхэшерихий с адгезивными антигенами в патологическом материале, кормах, объектах внешней среды в реакции коагглютинации», утвержденных департаментом ветеринарии МСХ и ПРФ №13-7-2/1758 от 01.01.2001 года; «Методические указания по лабораторной диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогеннымиэнтеробактериями» утвержденные департаментом ветеринарии МСХ и ПРФ №13-7-2/1759 от 01.01.2001 года; «Методические указания по бактериологической диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных» утвержденные департаментом ветеринарии МСХ и ПРФ №13-7-2/2117 от 01.01.2001 год, тест-системы для биохимической идентификации (пластины биохимические дифференцирующие для энтеробактерий (ПБДЭ), пластины биохимические дифференцирующие для стафилококков (ПБДС), а также «Enterotest» фирмы Lachema (Чехия).
3. Определение адгезивной активности микроорганизмов – метод с соавт. (Способ оценки…, 1991), протеолитической, ДНКазной и фосфатазной активности – Частная медицинская микробиология…, 2005; «Методика определения дезоксирибонуклеазной (ДНКазной) активности стафилококков», утвержденная ГУВ Госагропрома СССР № 000-3 от 01.01.2001; антилизоцимной активности (АЛА) - , 1999.
4. Определение антибиотикорезистентности микроорганизмов и проведение оценки результатов в соответствии с МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» диско-диффузионным методом с использованием паспортизованных наборов дисков (производства НИЦФ, г. С-Петербург) и среды Мюллер-Хинтона.
5. Определение вирулентностимикроорганизмов – invivo метод биопроб «Методические указания по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогеннымиэнтеробактериями» 9 г. и «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденными МЗ СССР (1977) и «Международные рекомендация по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1986).
6. Постановка диагноза на чуму плотоядных и парвовирусный энтерит собак – «Инструкция по применению набора для выявления антигена вируса чумы собак иммуноферментным анализом (ИФА), регистрационный номер ПВР-1-1.0/00308», утвержденной Россельхознадзором 12.08.2010 г. и «Инструкция по применению набора для выявления антигенов парвовируса собак, вирусов энтерита норок и панлейкопении кошек иммуноферментным анализом (ИФА), регистрационный номер ПВР-1-1.0/00325», утвержденной Россельхознадзором 12.08.2010 г. Применение тест-систем VetExpert (иммунохроматографический анализ).
7. Определение иммунологической реактивности организма собак – определение лизоцимной активности – , 1968; бактерицидной активности – , 1966; , 2011.
8. Статистическая обработка ретроспективных данных и результатов микробиологических исследований (, 1980; 1999). Корреляционный анализ с определением коэффициента множественной корреляции. Для определения динамики изменения частоты встречаемости отдельных видов бактерий в структуре микроорганизмов будет применятся линия тренда и коэффициент регрессии. Для оценки различий полученных результатов будет использован критерий Стьюдента.
Исследуемый материал:
Для ретроспективного анализа: сводные данные по инфекционной патологии собак за 2004–2014 гг. сводной годовой отчетности (1-вет, 1-вет А, 4-вет, 7-вет) Службы Ветеринарии и ветеринарных лабораторий Иркутской области.
Для бактериологического исследования: выделения из влагалища, препуция, смывы с кожи, конъюнктивы глаз и ушных раковин, слизистой оболочки носовой полости, из прямой кишки, фекалии.
Для вирусологического исследования: смывы с конъюнктивы глаз и со слизистой носовой полости, смывы из прямой кишки и фекалии.
3. КАЛЕНДАРНЫЙ ПЛАН ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
№ пп | Наименование работ | Место проведения исследования | Срок исполнения | Исполнители |
Обзор литературы и составление картотеки | Библиотеки АГАУ иИрГАУ им. |
по июнь 2016 | ||
Сбор и систематизация данных государственной ветеринарной статистической отчетности для ретроспективного анализа | Отчеты 1-вет, 1-вет А, 7-вет – Управление ветеринарии Иркутской области; 4-вет – Ветеринарные лаборатории Иркутской области | с сентября 2015 по июнь 2016 | ||
Определение численности и структуры популяции собак на территории Иркутской области | Управление ветеринарии Иркутской области | с сентября 2015 по июнь 2016 | ||
Отбор проб материала для бактериологического и вирусологического исследований | Ветеринарные клиники г. Иркутск и Иркутской области | с января 2016 по декабрь 2017 | ||
Идентификация выделенных микроорганизмов | ФГБУ «Иркутская межобластная ветеринарная лаборатория» | с января 2016 по декабрь 2017 |
| |
Формирование музея культур микроорганизмов | ФГБУ «Иркутская межобластная ветеринарная лаборатория» | с января 2016 по декабрь 2017 |
| |
Определение биохимических свойств микроорганизмов (гемолитической, адгезивной, протеолитической, антилизоцимной, фосфотазной и ДНК-азной активностей) | ФГБУ «Иркутская межобластная ветеринарная лаборатория»; ФГБНУ «Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека» | с января 2016 по декабрь 2017 | ||
Определение антибиотикорезистентности микроорганизмов | ФГБУ «Иркутская межобластная ветеринарная лаборатория» | с января 2016 по декабрь 2017 | ||
Определение вирулентности (биопроба) микроорганизмов | ФГБУ «Иркутская межобластная вет. лаборатория» | с января 2016 по декабрь 2017 |
| |
Диагностика чумы плотоядных и парвовирусного энтерита | ФГБУ «Иркутская межобластная ветеринарная лаборатория» | с января 2016 по декабрь 2017 |
| |
Определение иммунологической реактивности организма собак (лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови, фагоцитарная активность крови) | ФГБУ «Иркутская межобластная ветеринарная лаборатория» | с января 2016 по декабрь 2017 | ||
Формирование базы данных учёта и регистрации больных собак Иркутской области | Ветеринарные клиники г. Иркутск и Иркутской области | с января 2016 по декабрь 2017 | ||
Разработка схемы лечения больных животных вирусными болезнями | Ветеринарные клиники города Иркутска и Иркутской области | с января 2016 по декабрь 2017 | ||
Статистическая обработка ретроспективных данных и результатов микробиологического исследования | ФГБОУ ВО «ИрГАУ им. Ежевского» | с января по июнь 2018 | ||
Обобщение экспериментальных данных | Кафедра микробиологии, эпизоотологии, паразитологии и ВСЭ ФГБОУ ВО «АГАУ» | с января по июнь 2018 |
4. ПРИМЕРНЫЙ ПЛАН ВЫПУСКНОЙ КВАЛИФИКАЦИОННОЙ РАБОТЫ
Введение | |
ГЛАВА 1. Обзор литературы | |
1.1 | Вирусные инфекционные болезни собак |
1.2 | Ассоциированное течение инфекций у животных и собак |
1.3 | Особенности диагностики ассоциациированных вирусных болезней собак |
1.4 | Сравнение схем лечения при инфекционных болезнях собак |
1.5 | Заключение по обзору литературы |
ГЛАВА 2.Материалы, объекты и методы исследования. | |
2.1 | Микробиологические методы |
2.1.1 | Методы идентификации микроорганизмов (морфологические, культуральные, биохимические, серологические) |
2.1.2 | Определение биологических свойств выделенных микроорганизмов (гемолитическая, адгезивная, протеолитическая активность, факторы персистенции, продукция ДНКазы и фосфатазы) |
2.1.3 | Определение резистентности микроорганизмов к антимикробным препаратам |
2.1.4 | Определение вирулентности микроорганизмов методом биопроб |
2.2 | Вирусологические исследования |
2.3 | Статистические методы |
ГЛАВА 3.Результаты исследования | |
3.1 | Ретроспективный анализ инфекционной патологии собак в Иркутской области в период с 2004 по 2017 гг. |
3.2 | Характеристика микробиоценоза здоровых собак |
3.2.1 | Морфологические, культуральные, биохимические свойства микроорганизмов |
3.2.2 | Патогенные свойства микроорганизмов |
3.3 | Характеристика микробиоценозов собак при парвовирусном энтерите и чуме плотоядных в городе Иркутске |
3.3.1 | Обследование на парвовирусный энтерит и чуму плотоядных |
3.3.2 | Микробиоценозы моно - и ассоциированные |
3.3.1 | Лизоцимная активность сыворотки крови |
3.3.2 | Бактерицидная активность сыворотки крови |
3.5 | Программа для учета и регистрации собак в ветеринарных клиниках |
3.6 | Схема диагностики при вирусных ассоциированных инфекциях |
3.7 | Оптимизация терапии при вирусных ассоциированных инфекциях собак |
ГЛАВА 4. Заключение | |
ВЫВОДЫ | |
Практические рекомендации | |
Список использованной литературы | |
ПРИЛОЖЕНИЕ |
5. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
Прослушан курс по дисциплине «Педагогика и психология высшей школы», получен «ЗАЧЕТ» 25.12.2015 года.
Сданы кандидатские экзамены
дисциплина «История и философия науки» 02.06.2016 - «Отлично»
дисциплина «Иностранный язык» 15.06.2016 - «Отлично»


