На правах рукописи

АСТАХОВА

Светлана  Александровна

ИНАКТИВАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

УЛЬТРАФИОЛЕТОВЫМ ИЗЛУЧЕНИЕМ ЭКСИЛАМПЫ

С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПЕРОКСИДА ВОДОРОДА И НАНОДИСПЕРСНЫХ ЧАСТИЦ ДИОКСИДА ТИТАНА

03.00.23 – «биотехнология»

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Улан-Удэ, 2009

Работа выполнена в Байкальском институте природопользования  Сибирского отделения Российской академии наук

Научный руководитель: 

доктор биологических наук  

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

кандидат химических наук, доцент Балдынова Федосия Прокопьевна

Ведущая организация:

МУП «Водоканал», г Улан-Удэ

Защита состоится  «22» октября г. в  10  часов на  заседании  Регионального  диссертационного  Совета  ДМ. 212.039.02 при Восточно-Сибирском государственном технологическом университете г. Улан-Удэ, а.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВСГТУ.

Отзывы в двух экземплярах, заверенные печатью учреждения, просим отправлять по указанному адресу ученому секретарю Совета.

Автореферат разослан « 18 » сентября 2009г.

Ученый секретарь

Регионального диссертационного Совета,

доктор технических наук, 

профессор  Хамнаева  Н. И.

Актуальность работы. 

В настоящее время проблема эффективного обеззараживания питьевой воды остается актуальной в связи с сохранением риска возникновения и распространения заболеваний, связанных с употреблением недоброкачественной питьевой воды. На практике наиболее распространены три способа обеззараживания воды: реагентная обработка (хлором или его соединениями), ультрафиолетовое (УФ) облучение и озонирование.

НЕ нашли? Не то? Что вы ищете?

Технологическая простота хлорирования и доступность хлора обусловили его широкое использование в практике водоснабжения. Серьезным недостатком хлорной обработки воды является образование ряда токсичных побочных продуктов (хлорированных фенолов, тригалометанов, диоксинов и др.). Кроме того, хлор (жидкий и газообразный) относится к токсичным веществам, что требует соблюдение повышенной техники безопасности при его транспортировании, хранении и использовании (Луцевич, 2003). Озонирование является более дорогим, но экологически безопасным методом обеззараживания воды. Использование озона, в связи с его высокими реагентными свойствами, требует повышенных мер безопасности для персонала  (Фалендыш, 2009).

Обработка УФ-излучением, как известно, не имеет проблемы передозировки и не вызывает образование токсичных соединений. В качестве источников УФ-из­лучения традиционно используют ртутные лампы низкого, среднего или высокого давления. Существенным недостатком ртутных бактерицидных ламп, ограничивающим их применение, является высокое содержание металлической ртути в свободном состоянии, которая, как  известно, является опасным поллютантом (Aucott et al., 2003). Современной альтернативой ртутным лампам являются УФ-эксилампы. Это новый класс источников спонтанного УФ - и вакуумного УФ-излучения, основное достоинство которых заключается в том, что до 80% и более общей мощности излучения сосредоточено в относительно узкой полосе (не более 10 нм на полувысоте) излучения (Sosnin et al., 2006).

В последнее десятилетие бурное развитие получили новые окислительные технологии, или АОТ (Advanced Oxidation Technologies), которые нашли широкое применение для очистки сточных вод от органических загрязнителей (Zona et al., 2002). К ним относится обработка воды УФ-излучением в присутствии сильных окислителей (например, озона, пероксида водорода) и (или) фотокатализаторов. Применение АОТ имеет большой потенциал для инактивации патогенных микроорганизмов в водной среде. В связи с этим большой научный и технологический интерес представляет бактерицидный эффект УФ-излучения эксиламп в присутствии пероксида водорода (H2O2) и/или нанодисперсного фотокатализатора диоксида титана (TiO2).

Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Байкальского института природопользования СО РАН по научному направлению 5.4. «Химические аспекты современной экологии и рационального природопользования, включая проблемы утилизации и безопасного хранения радиоактивных отходов». 

Цель работы. Исследование эффективности инактивации бактериальных клеток Escherichia coli (далее E. coli) и Bacillus cereus (далее B. cereus) УФ-излучением KrCl-эксилампы в присутствии окислителя (пероксида водорода) и (или) нанодисперсного фотокатализатора (наночастиц диоксида титана) в водной среде.

Основные задачи:

    установить эффективность УФ-излучения эксилампы для инактивации бактерий  E. сoli и B. cereus; изучить комбинированное бактерицидное действие УФ-излучения эксилампы и пероксида водорода (УФ/H2O2); изучить комбинированное бактерицидное действие УФ-излучения эксилампы и наночастиц диоксида титана (УФ/TiO2); определить бактерицидный эффект УФ-излучения эксилампы при совместном присутствии пероксида водорода и наночастиц диоксида титана (УФ/H2O2/TiO2); разработать принципиальную схему обеззараживания воды с  помощью KrCl-эксилампы и окислителя H2O2.

Научная новизна работы. В работе установлена эффективность УФ - излучения KrCl-эксилампы при 222 нм для инактивации бактерий  E. сoli и B. cereus. На примере данных тест-организмов впервые показан высокий бактерицидный эффект УФ-излучения эксилампы в комбинации с окислителем H2O2 и нанодисперсным фотокатализатором TiO2.

Практическая значимость. В работе показана применимость узкополосного УФ-излучения эксилампы при 222 нм в присутствии окислителя H2O2 для высокоэффективного обеззараживания питьевой воды. В зависимости от исходной численности клеток в воде для достижения эффективности обеззараживания 100% рекомендованы УФ-облучение или комбинированная (УФ/окислитель) обработка. Разработанная схема может применяться для эффективного обеззараживания питьевой воды.

Результаты исследований включены в отчеты Байкальского института природопользования СО РАН.

Апробация работы. Результаты работы представлялись на международных и всероссийских конференциях: V школе-семинаре молодых ученых России «Проблемы устойчивого развития региона» (Улан-Удэ, 2009), III International Conference on Chemical Investigation and Utilization of Natural Resources (Ulaanbaatar, 2008), XV Международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» (Москва, 2008), IX Всероссийской научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых (Красноярск, 2008), II Всероссийской научно-практической конференции «Развитие физико-химической биологии и биотехнологии на современном этапе» (Иркутск, 2008), IV школе-семинаре молодых ученых России «Проблемы устойчивого развития региона» (Улан-Удэ, 2007).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 13  работ.

Структура и объем диссертации.  Диссертационная работа состоит из введения, 5 глав, выводов и списка использованных источников (115 наименований). Работа изложена на 97 страницах машинописного текста, иллюстрирована 27 рисунками и 9 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Для изучения бактерицидного действия УФ KrCl-эксилампы объектами являлись бактериальные культуры E. coli и B. cereus. Культуру E. coli получали при растворении сухого колибактерина Colibacterinum siccum. Культура B. cereus выделена ранее из ила пруда-аэратора Байкальского ЦБК (Матафонова и др., 2007). 

Источником УФ-излучения являлась эксилампа барьерного разряда на молекулах KrCl, излучающая на длине волны 222 нм.

Фотокатализатором служил нанодисперсный порошок TiO2 (кристаллическая модификация анатаз, средний диаметр частиц 23.3 нм ( “Старт”, г. Пермь)). Для диспергирования наночастиц TiO2 в воде (Халявка, 2007) их подвергали предварительной ультразвуковой обработке с помощью прибора “УЛЬТРАЭСТ–М” (частота ультразвука − 45 кГц, мощность − 50 Вт) в течение 15 мин. Концентрация TiO2 в облучаемом растворе составила 0.5 г/л. В качестве окислителя использовали пероксид водорода с концентрацией 1 г/л.

Для облучения по схемам УФ/H2O2 и УФ/TiO2 клетки были приготовлены в стерильной воде из соответствующих односуточных культур методом предельных разведений (Егоров, 1995). Полученные бактериальные суспензии, содержащие от 102 до 107 колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 мл,  последовательно  облучали в течение 5–300 с при температуре 23–25 0C в режиме перемешивания на магнитной мешалке (для равномерного распределения дозы облучения во всем объеме) в кювете, расположенной под выходным окном эксилампы. Интенсивность УФ-излучения при данных условиях составила в среднем 2.2 мВт/см2.

При обработке по комбинированным схемам, 1 мл раствора H2O2 и (или) суспензии TiO2 помещали в кювету перед внесением бактериальной суспензии. После облучения 100 мкл аликвоты высевали в чашки Петри с агаризованным питательным бульоном и инкубировали при 37 0C (B. cereus) или 28 0C (E. coli) в течение 24 ч в 3−5 повторностях для определения числа КОЕ выживших клеток. 

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Инактивация E. сoli и B. cereus УФ-излучением KrCl-эксилампы

На первом этапе проведены эксперименты по обработке бактериальных суспензий УФ-излучением KrCl-эксилампы без участия окислителя и катализатора (прямой фотолиз).

Результаты УФ-обработки клеток E. coli KrCl-эксилампой представлены на рисунке 1. Как видно из рисунка при исходной численности 102–106 КОЕ/мл полная инактивация E. coli достигалась после 10–30 с облучения, что соответствует дозе облучения 22–66 мДж/см2. При максимальной исходной численности клеток E. coli в воде (107 КОЕ/мл) наблюдалось снижение эффективности инактивации. В данном случае большое влияние приобретают поглощение излучения средой и рассеяние излучения на клетках, имеющих размеры, сопоставимые с длиной волны. Это обусловлено эффектом экранирования, отмеченным ранее при облучении суспензий с высокой численностью клеток (Muranyi et al., 2007). 

Доза излучения, мДж/см2р

Рис. 1. Изменение численности клеток E. coli в воде после УФ-облучения KrCl-эксилампой.

Тем не менее, доза УФ-излучения 66 мДж/см2 (30 с), обеспечивала снижение численности на 3,5 порядка, что соответствует эффективности обеззараживания 100%. Полная же инактивация клеток была достигнута после облучения в течение 120 с. 

Для инактивации суспензии, содержащей относительно низкие концентрации клеток B. cereus (102–103 КОЕ/мл), необходимой является доза 66–132 мДж/см2, достигаемая за 30–60 с облучения (Рис. 2).

Доза излучения, мДж/см2р

Рис. 2. Изменение численности клеток B. cereus в воде после УФ-облучения KrCl-эксилампой.

При облучении суспензии, содержащей более высокие исходные численности клеток B. cereus также наблюдается снижение эффективности инактивации, что можно объяснить эффектом экранирования отмеченным ранее.

При исходной численности B. cereus  106 КОЕ/мл полная инактивация осуществлялась при дозе облучения 396 мДж/см2, которая достигалась за  180 с УФ-обработки KrCl-эксилампой. При исходной численности клеток 107 КОЕ/мл инактивация 99.9% достигается при дозе облучения 660 мДж/см2, которая соответствует  300 с облучения.

Таким образом, установлена высокая эффективность УФ-излучения KrCl-эксилампы для инактивации E. сoli и B. cereus. Несмотря на эффект экранирования, возникающий при облучении высококонцентрированных бактериальных суспензий, инактивация 100% клеток наблюдалась в течение 2–5 мин обработки.

Известно, что некоторые микроорганизмы способны восстанавливаться после облучения ультрафиолетовым излучением.

Наиболее частый способ восстановления – фотореактивация, осуществляемая ферментами фотолиазами. Эти ферменты начинают активизироваться под воздействием энергии света, лежащего в спектре, смежном с ультрафиолетовым, а также в фиолетово-голубом спектре (Зоммер и др., 2005). Происходит и темновая реактивация, при выдерживании клеток в темноте.

Результаты наших исследований показали, что при выдерживании в темноте облученных клеток, не происходил рост клеток  E. сoli и B. cereus. При выдерживании облученной суспензии на свету реактивация (фотореактивация) клеток E. сoli и B. cereus также не наблюдалась.

Таким образом, УФ-облучение воды, содержащей бактерии, обеспечивает необратимый,  устойчивый эффект инактивации бактерий.

Инактивация E. сoli и B. cereus УФ-излучением KrCl-эксилампы

в присутствии пероксида водорода

На первом этапе были проведены эксперименты по выявлению оптимальной концентрации H2O2 для эффективной инактивации микроорганизмов УФ-излучением KrCl-эксилампы. В результате исследований установлено, что оптимальной концентрацией является 1 г/л. 

Далее были проведены эксперименты по выявлению бактерицидного действия пероксида водорода на E. сoli и B. cereus без УФ-обработки. В результате установлено, что пероксид водорода не оказывает бактерицидного влияния на микроорганизмы без УФ-облучения KrCl-эксилампой.

В результате комбинированной УФ-обработки клеток E. coli с участием H2O2 наблюдалось заметное повышение эффективности инактивации по сравнению с УФ-обработкой без окислителя. Так, при максимальных исходных численностях клеток 106 и 107 КОЕ/мл полная инактивация зафиксирована уже после 20-25 с (44-55 мДж/см2) облучения (Рис. 3).

Доза излучения, мДж/см2р

Рис. 3. Изменение численности клеток E. coli в воде после УФ-облучения эксилампой в присутствии H2O2.

При более низких исходных численностях 102-105 КОЕ/мл полная инактивация клеток достигается при облучении дозой 11-33 мДж/см2.

Далее были проведены эксперименты по комбинированной обработке  B. cereus. Установлено, что доза облучения необходимая для инактивации  клеток при исходных численностях  102–104 КОЕ/мл при обработке по схеме УФ/Н2О2 в 2 раза ниже дозы облучения, найденной при УФ-облучении без участия H2O2. Так, для комбинированной инактивации 99,9% клеток B. cereus при низкой исходной численности 102-103 КОЕ/мл, достаточной является доза 33-66 мДж/см2 соответственно, достигаемая за 15-30 с облучения (рис. 4), как для инактивации клеток при этой исходной численности без окислителя необходимой дозой является 66-132 мДж/см2.

Доза излучения, мДж/см2р

Рис. 4. Изменение численности клеток B. cereus в воде после УФ-облучения эксилампой в присутствии H2O2.

Известно, что в результате фотолиза H2O2 образуются реакционноспособные гидроксильные радикалы (OH•), инактивирующие клетку по двум основным механизмам: 1- окисление и разрушение клеточной стенки и мембраны с последующей дезинтеграцией клетки и 2- диффузия радикалов в клетку, приводящая к инактивации ферментов, повреждению органелл, нарушению синтеза белка и т. д. (Mamane et al., 2007).  Известно, что наибольший выход OH• генерируется излучением в области 200–280 нм (Litter, 2005). Поскольку максимум поглощения H2O2 составляет 220 нм, целесообразно использовать УФ лампы, излучающие в диапазоне 210–240 нм.

Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности комбинированного метода УФ-обработки в присутствии пероксида водорода  для инактивации клеток  E. сoli и B. cereus.

Далее были проведены эксперименты по исследованию реактивации бактерий после УФ/H2O2 обработки. В результате было выявлено, что темновая реактивация бактерий  E. сoli и B. cereus не обнаружена. При выдерживании облученных суспепензий на свету также не наблюдался рост клеток E. сoli и B. cereus.

Таким образом, комбинированная УФ-обработка в присутствии пероксида водорода  воды, содержащей E. сoli и B. cereus, обеспечивает необратимый, устойчивый эффект инактивации бактерий.

Инактивация E. сoli и B. cereus УФ-излучением KrCl-эксилампы

в присутствии наночастиц TiO2.

На первом этапе были проведены эксперименты по выявлению оптимальной концентрации нанодисперсного фотокатализатора TiO2 для комбинированной УФ/TiO2 обработки KrCl-эксилампой бактерий. В результате была найдена оптимальная концентрация 0,5 мг/л. фотокатализатора TiO2.

Для выяснения роли TiO2 в процессе инактивации бактерий была проведена серия экспериментов по изучению эффективности инактивации  E. сoli и  B. cereus без УФ-обработки. В результате было установлено, что наночастицы TiO2 не обладают бактерицидными свойствами по отношению к клеткам E. сoli и  B. cereus в отсутствие УФ-облучения KrCl-эксилампой.

Далее были проведены эксперименты по изучению совместного бактерицидного действия УФ-излучения KrCl-эксилампы и наночастиц TiO2 на микроорганизмы.

В случае комбинированной обработки  - с участием фотокатализатора диоксида титана – наблюдается высокая эффективность инактивации, достигаемая в течение значительно меньшей продолжительности облучения. Так, при исходной численности  102 и 103 КОЕ/мл полная инактивация клеток E. сoli зафиксирована уже после 5 и 10 сек обработки, соответственно. В результате облучения зараженной воды при максимальной исходной численности клеток эффективность инактивации составила 99.9% уже после 25 сек обработки (55 мДж/см2).

При исходной численности E. coli 102–103 КОЕ/мл полная инактивация УФ-излучением KrCl-эксилампы в присутствии наночастиц TiO2 происходила за 5-10 с (Рис. 5). В результате облучения суспензии при максимальной исходной численности клеток эффективность инактивации составила 100% уже при дозе облучения 55 мДж/см2, которая достигается за  25 с обработки.

Доза излучения, мДж/см2р

Рис. 5. Изменение численности клеток E. coli в воде после УФ-облучения эксилампой в присутствии наночастиц TiO2.

Известно, что в результате взаимодействия УФ-излучения и TiO2 в воде генерируются реакционноспособные окислительные частицы, такие как OH•, O2•, HO2•, из которых гидроксильный радикал OH• считается наиболее важным окисляющим агентом, обеспечивающим инактивацию клетки (Hirakawa et al., 2007).

На рис. 5 показано, что кривые выживания клеток  в течение первых 15 с облучения суспензии, содержащей 104-107 КОЕ/мл, характеризуются наличием плато, которое отражает относительно низкую эффективность инактивации. Предполагается, что в этот период реакционноспособные частицы начинают атаковать клетку и окислять клеточную мембрану с сохранением ферментативных механизмов ее самовосстановления (Benabbou et al., 2007). В конце этого периода происходит разрушение клеточной мембраны, что приводит к дезинтеграции внутриклеточных компонентов и увеличению эффективности инактивации. Также мы полагаем, что здесь определенный вклад вносят эффекты поглощения и рассеяния УФ-излучения. Кроме того, небольшое рассеяние падающего излучения может происходить и на самих частицах катализатора.

При комбинированной инактивации (УФ/TiO2) высококонцентрованных водных суспензий клеток B. cereus, (107 КОЕ/мл), доза 396 мДж/см2, достигаемая за 180 с облучения, является достаточной для инактивации 99.9% клеток. Для полной инактивации B. cereus при невысоких исходных численностях клеток (102-103 КОЕ/мл) необходимой является доза 66-132 мДж/см2, достигаемая за 30-60 с облучения (Рис. 6).

Доза излучения, мДж/см2р

Рис. 6. Изменение численности клеток B. cereus в воде после УФ-облучения эксилампой в присутствии наночастиц TiO2.

Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности инактивации узкополосного УФ-излучения при 222 нм и наночастиц TiO2 при обработке воды, содержащей до 107 КОЕ/мл E. coli и B. cereus. Что касается клеток, с низкой исходной численностью,  эффект инактивации наблюдается уже в пределах 5-10 с облучения для E. coli  и 60 с облучения для B. cereus, что соответствует дозам 11-132 мДж/см2.

Таким образом, мы предполагаем перспективность применения УФ-эксилампы и наночастиц TiO2 для инактивации суспензий E. coli и B. cereus.

При выдерживании облученных клеток E. сoli и B. cereus на свету реактивация не наблюдалась. Темновая реактивация также отсутствовала. 

Таким образом, УФ-обработка в присутствии фотокатализатора TiO2  суспензии клеток E. сoli и B. cereus, обеспечивает необратимый, устойчивый эффект инактивации.

Инактивация E. сoli и B. cereus УФ-излучением KrCl-эксилампы

при совместном присутствии H2O2 и наночастиц TiO2.

В результате инактивации клеток E. сoli излучением KrCl-эксилампой при совместном присутствии пероксида водорода и наночастиц TiO2 установлено, что при максимальной исходной концентрации клеток 107 КОЕ/мл доза УФ-излучения 33 мДж/см2 (15 с), обеспечивала снижение численности клеток на 3,2 порядка (Рис. 7). Полная же инактивация клеток E. сoli была достигнута при дозе облучения  55 мДж/см2, которая достигается за  25 секунд обработки.

Доза излучения, мДж/см2р

Рис. 7. Изменение численности клеток E. сoli в воде после УФ-облучения эксилампой в присутствии H2O2 и

наночастиц TiO2.

Похожие результаты получены и при обработке в присутствии только пероксида водорода, или только TiO2. Поэтому можно сказать, при УФ-обработке клеток при совместном присутствии H2O2 и наночастиц TiO2 не происходит увеличение эффективности инактивации и отсутствует синергетический эффект, как предполагалось. Возможно, это связано с тем, что происходит увеличение концентрации ОН° радикалов в результате фотолиза H2O2 и взаимодействия УФ-излучения и TiO2. Как известно, при избыточном содержании ОН° радикалов в растворе протекают конкурирующие реакции: образующиеся ОН° радикалы подвергаются  димеризации (1) или вступают в реакции (2, 3):

ОН° + ОН° → Н2О2  (1)

ОН° + Н2О2 → НО2° + Н2О  (2)

ОН° + НО2°→ Н2О + О2  (3)

Поскольку гидроксопероксидные радикалы НО2° являются менее реакционноспособными, чем ОН° радикалы (Daneshvar et al., 2008), повышение их концентрации не оказывает заметного влияния на скорость инактивации.

При инактивации клеток B. cereus также не происходит увеличение эффективности инактивации и полученные результаты подобны результатам, полученным при обработке в присутствии либо пероксида водорода, либо фотокатализатора TiO2. Так, полная инактивация B. cereus при 106–107 КОЕ/мл наблюдалась после облучения дозой  264 мДж/см2  при 120 с облучения, рис. 8.

Доза излучения, мДж/см2р

Рис. 8. Изменение численности клеток B. cereus в воде после

УФ-облучения эксилампой в присутствии H2O2 и наночастиц TiO2.

Таким образом, при совместном присутствии H2O2 и наночастиц TiO2 не наблюдается увеличение эффективности УФ-инактивации клеток E. coli и B. cereus.

Разработка принципиальной схемы обеззараживания воды с  помощью KrCl-эксилампы в комбинации с H2O2.

В результате исследований нами было установлено, что эффективная инактивация клеток E. сoli и B. cereus осуществляется комбинированными методами УФ/H2O2 и УФ/TiO2. Поскольку  удаление наночастиц диоксида титана из воды требует дополнительных энергозатрат и технологических операций, поэтому нами рекомендуется применять данный фотокатализатор совместно с УФ-облучением  для обеззараживания  и очистки сточных вод.

Нами предложена следующая принципиальная схема обеззараживания воды с помощью KrCl-эксилампы в комбинации с  H2O2.

Схема обеззараживания воды включает  в себя установку, где на первом этапе вода поступает на УФ-обработку (рисунок 9). Обеззараживание может осуществляться в широком температурном интервале (при температуре 5–35 0C).

  102-103 КОЕ/мл         104-107 КОЕ/мл

       

       

Рисунок  9 - Принципиальная  схема обеззараживания питьевой воды с  помощью KrCl-эксилампы в присутствии H2O2 .

При высоком исходном содержании  в воде микроорганизмов 104-107 КОЕ/мл  предварительно в зараженную воду подается пероксид водорода. Концентрация H2O2 в облучаемой воде составляет 1 г/л. В этом случае оптимальная продолжительность облучения для достижения 100% обеззараживания составляет 180 секунд. На следующем этапе  обеззараживания микроорганизмы удаляют из воды фильтрованием. В качестве фильтра можно использовать фильтр с керамзитовой загрузкой (размер зерен 0,8-5,0 мм).

При невысокой исходной численности бактерий 102-103 КОЕ/мл УФ-обработка зараженной воды происходит без подачи катализатора и окислителя. На следующем этапе осуществляется фильтрование. Эффективность обеззараживания 100% в этом случае достигается за 60 с облучения (рис. 9).

Данная схема обеззараживания позволяет не только повысить эффективность обеззараживания, но и исключить условия для образования хлорорганических соединений в питьевой воде.

ВЫВОДЫ:

Показана высокая эффективность УФ-излучения KrCl-эксилампы для инактивации бактерий E. coli и  B. cereus (прямой фотолиз). Инактивация 99.9% клеток E. coli достигалась при дозе облучения 49 мДж/см2 ,а клеток B. cereus при 220 мДж/см2. Выявлено, что клетки B. cereus являются более резистентными к воздействию УФ-излучения KrCl-эксилампы, чем E. coli. Установлено, что комбинированная обработка клеток E. coli и  B. cereus УФ-излучением KrCl-эксилампы в присутствии пероксида водорода приводит к увеличению эффективности инактивации.  Для инактивации 99.9% клеток E. coli необходимой является доза облучения 30 мДж/см2, клеток B. cereus - 118 мДж/см2. Установлена высокая антибактериальная активность узкополосного УФ-излучения при 222 нм и наночастиц TiO2 при обработке воды, содержащей до 107 КОЕ/мл  E. coli и B. cereus.  Доза облучения необходимая для инактивации 99,9% клеток E. coli и B. cereus составляет 37 мДж/см2 и 120 мДж/см2, соответственно. Обнаружено что, при инактивации клеток E. сoli и B. cereus  УФ-облучением KrCl-эксилампой (прямой фотолиз), УФ-обработкой в присутствии пероксида водорода (или наночастиц TiO2)  не наблюдалась темновая и световая реактивация клеток. Предложена принципиальная схема обеззараживания питьевой воды с  помощью KrCl-эксилампы в присутствии H2O2 .











Основные положения диссертации опубликованы в работах:

, , Батоев патогенной микрофлоры ультрафиолетовым излучением эксилампы в присутствии пероксида водорода //Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Экология и безопасность жизнедеятельности. – 2008. – Т. 2. – С. 79–84. Matafonova G. G., Batoev V. B., Astakhova S. A., Gomez M., Christofi N. Efficiency of KrCl excilamp (222 nm) for inactivation of bacteria in suspension //Letters in Applied Microbiology, 2008, 47. P. 508–513.  , , Батоев эффект KrCI-эксилампы в присутствии пероксида водорода //Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии. – 2008. – Т.2(11). – С. 84–87. , ,  , Gуmez M., Christofi N. Эффективность инактивации бактерий в воде УФ-излучением эксилампы //Известия Иркутского государственного университета. Серия «Биология. Экология». – 2008, Т.1, №1. – С. 22-25. , , Батоев эффект излучения KrCI – эксилампы //Материалы IV Школы-семинар молодых ученых России “Проблемы устойчивого развития региона”. – Улан-Удэ: Изд-во БНЦ СО РАН, 2007. – С. 141-142.  , Матафонова эффект KrCI – эксилампы //Материалы докладов XV Международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» — М.: Издательство МГУ; СП МЫСЛЬ, 2008. – С. 3. , , УФ-инактивация бактериальных суспензий Escherichia coli ультрафиолетовым излучением эксилампы //Материалы IX Всероссийской научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых (с международным участием). – Красноярск, 2008. – Ч.1. – С. 41-42. Астахова  С. А., Матафонова воды ультрафиолетовым излучением эксилампы //Материалы международной научно-практичской конференции в области экологии и безопасности жизнедеятельности. – Комсомольск-на – Амуре: ГОУВПО «КиАГТУ», 2008. – С. 218-219. Batoev V. B., Astakhova S. A., Shirapova G. S., Matafonova G. G. Photocatalytic oxidation of bacteria using UV KrCl  exilamp and TiO2 nanoparticles //Abstracts of the 3rd International Conference on Chemical Investigation and Utilization of Natural Resources. – Mongolia (Ulaanbaatar), 2008. – P.54. , , Батоев эффект УФ - эксилампы и наночастиц //Материалы первой Международной дистанционной научной конференции «Инновации в медицине». – Курск: ГОУ ВПО КГМУ Росздрава, 2008. -  С. 11-12. Астахова  С. А., Матафонова воды ультрафиолетовым излучением //Материалы Международной научно-практической конференции «Современная экология – наука ХХI века». – Рязань: РГУ, 2008. -  С. 174-176. , , Батоев эффект УФ-эксилампы и наночастиц //Материалы молодежной научной конференции «Молодежь и наука Забайкалья». – Чита, 2008, С. 84-86. , , Батоев инактивация Escherichia coli ультрафиолетовым излучением эксилампы //Материалы V Школы-семинар молодых ученых России “Проблемы устойчивого развития региона”. – Улан-Удэ: Изд-во БНЦ СО РАН, 2009. – С. 149-151.


















Автор выражает искреннюю благодарность научному руководителю д. б.н. , сотрудникам БИП СО РАН к. б.н. и к. т.н. за оказанную поддержку при выполнении работ. Автор также приносит глубокую благодарность заведующему кафедрой биотехнологии ВСГТУ д. б.н., проф. за  ценные консультации и за помощь в микробиологических исследованиях.