ОБЩИЙ СО2
340 нм
____________________________________________
Кат № :
СD 127 СD 128 СD 129 СD 122 | 10 х 10 мл 5 х 20 мл 10 х 50 мл 6 х 500 мл | 1. Буфер 2. СO2-Реагент 3. Стандарт 1. Буфер 2. СO2-Реагент 3. Стандарт 1. Буфер 2. СO2-Реагент 3. Стандарт 1. Буфер 2. СO2-Реагент 3. Стандарт | 1 х 105 мл 10 х 10 мл 1 х 5 мл 1 х 105мл 5 х 20 мл 1 х 5 мл 10 х 50 мл 10 х 50 мл 1 х 5 мл 6 х 500 мл 6 х 500 мл 1 х 5 мл |
ПРИНЦИП МЕТОДА
PEPC
Phosphoenolpyruvate + HCO3--------> oxaloacetate + H2PO4 -
MDH
oxaloacetate + NADH + H+---------→ malate + NAD+
Снижение абсорбции при 340 нм зависит от окисления NADH, что, в свою очередь, пропорционально концентрации СО2 в пробе.
ПРОБА
Сыворотка или гепаринизированная плазма.
ЭДТА, цитрата и оксалата не должны быть использованы в качестве антикоагулянтов, так как они влияют на результат. В процессе сбора проб необходимо минимизировать контакт проб с воздухом.
_РЕАГЕНТЫ
Состав | Концентрация р-ра |
1. Буфер Трис буфер 2. СО2 Реагент Фосфоенолпируват (PEP) NADH Фосфоенолпируват Карбоксилаза (PEPC) Малат Дегидрогеназа (МDH) Mg2+ 3. Стандарт | 25 ммоль/л, pH 6.5 6.3 ммоль/л 0.45 ммоль/л 200 Е/л 600 Е/л 8.0 ммоль/л 25 ммоль/л |
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ
1. Буфер
Готов для употребления. Стабилен в течение срока, указанного на этикетке при +2 - +8оС.
2. СО2 Реагент
СD 127 10 х 10 мл, CD 128 5 х 20 мл
Растворить содержимое одного флакона СО2 Реагента 2 в соответствующем объеме Буфера 1:
10 мл 20 мл | для для | 10 х 5 х | 10 мл 20 мл | набор (СD 127) набор(CD 128) |
Стабилен 15 дней при +2 - +8оС в нераспакованном флаконе, 70 ч при +2 - +8оС или 25 часов при +15 - +25оС вскрытый, но в оригинальном контейнере или в контейнере с узкой горловиной. Перед использованием дать постоять 15 мин.
СD 129 10 х 50 мл, CD 122 6 х 500 мл
Развести содержимое одного флакона СО2 Реагента 2 в аликвоте Буфера 1. Перенести, несколько раз ополаскивая, содержимое флакона 2 во флакон 1. Стабилен 15 дней при +2 - +8оС в нераспакованном флаконе, 70 ч при +2 - +8оС или 25 часов при +15 - +25оС вскрытый, но в оригинальном контейнере или в контейнере с узкой горловиной. Перед использованием дать постоять 15 мин.
ПРИМЕЧАНИЕ:
Не встряхивайте реагент при растворении, так как это может вызвать повышенную абсорбцию СО2. Достаточно мягкое поворачивание флакона
3. Стандарт
Готов для употребления. Стабилен в течение срока, указанного на этикетке при +2 - +8оС.
ПРОЦЕДУРА
Длина волны Температура Кювета Измерение | 340 нм 37оС Световой путь 1 см Против дистиллированной Н2О |
Внести в кювету:
Тест (мл) | Бланк (мл) | Стандарт (мл) | |
Проба DDH2O Стандарт Реагент | 0.05 - - 1.00 | - 0.05 - 1.00 | - - 0.05 1.00 |
Смешать, инкубировать 5 мин при 37оС. Измерить абсорбцию стандарта (Астандарт), пробы (Апробы) и реагент-бланка (Абланка)
ВЫЧИСЛЕНИЕ
ΔАпробы = Абланка - Апробы
ΔАпроба
Общий CO2 (ммоль/л) = ---------- х конц. стандарта
ΔАстандарта
НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Взрослые: Артериальное 21-28 ммоль/л
Венозное 22-29 ммоль/л
Артериальное: Новорожденные 17.2-23.6 ммоль/л
Дети 19.0-23.9 ммоль/л
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля качества и воспроизводимости рекомендуют использовать предлагаемые фирмой RANDOX сыворотки с нормальным, пониженным и повышенным содержанием CO2.
ЛИНЕЙНОСТЬ
Линейность метода до концентраций 50 ммоль/л. Образцы с превышающими значениями развести 1 + 1 с 0.9% NaCL и результат умножить на 2.
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Не держите реагент на воздухе дольше чем это необходимо, плотно закрывайте.
2. Не пипетируйте ртом.
3. Для измерения при 380 нм используйте наборы СО2 (Общий) Кат. № CD 116, CD 117, CD 119, CD 136, CD 137, CD 169.
4. При разведении не всряхивайте сильно реагент - это может вызвать избыточное поглощение СО2.
