Изучение криоустойчивости меристем рябины (Sorbus L.),
изолированных из растений in vitro
Балекин Андрей Юрьевич
Институт физиологии растений им. К.А. Тимирязева РАН, Россия, Москва,
e-mail: *****@***ru
В жидком азоте растительный материал, устойчивый к замораживанию, может сохранять свою жизнеспособность десятилетиями. Поскольку криосохранение считают экономически выгодным способом сохранения коллекций растений, в том числе размножаемых вегетативно, исследовали особенности посткриогенного восстановления in vitro растений рябины. Для эксперимента были выбраны два сорта рябины селекции Ивана Владимировича Мичурина (Титан и Мичуринская десертная). Активно растущие весенние побеги растений, высаженных на территории ИФР РАН, использовали для получения культур in vitro. Верхушки побегов (2-3 см) стерилизовали в 1% растворе сулемы 10 минут и промывали стерильной дистиллированной водой. От этих побегов отделяли апексы (2-3 мм) и помещали их на агаризованную среду MS (0,5 мг/л БАП). Через 2 недели апексы формировали побеги, которые затем размножали на среде MS (2 мг/л БАП и 0,1 мг/л ИМК). Полученные в результате размножения побеги (1,5-2,0 см) шесть недель адаптировали к холоду на среде MS (БАП 0,2 мг/л, ИМК 0,02 мг/л и 60г/л сахарозы) при 2°С, 4 часовом дне и освещённости 2-3 клк. От этих побегов отделяли апексы (1-2 мм) и помещали их на модифицированную среду МС, дополненную 0,8 М сахарозы. Через 48 часов апексы переносили на полоски стерильной фольги и подсушивали 4 часа в потоке воздуха ламинар-бокса. Полоски с дегидратированными апексами в криоампулах погружали в жидкий азот на срок не менее часа. Затем растительный материал оттаивали при комнатной температуре. Посткриогенное восстановление роста проводили на агаризованной среде MS (0,5 мг/л БАП) при 18-20°С, 16-часовом дне и освещённости до 1 клк. Долю апексов, восстановивших рост после жидкого азота, оценивали через месяц после их размораживания. После криосохранения жизнеспособные побеги сформировали 71% апексов рябины сорта Мичуринская десертная и 61% апексов сорта Титан. Таким образом, после некоторой модификации метод, который ранее успешно применяли для криосохранения дегидратированных апикальных меристем ежевики и земляники (патент РФ № 000), можно также эффективно эксплуатировать при формировании криоколлекций ценных сортов и клонов рябины без использования дорогостоящих программируемых замораживателей и токсичных криопротекторов.
