Giolitti Cantoni Broth Base Основа бульона Жиолитти-Кантони | M584 |
Этот бульон с добавлением теллурита калия используют для селективного обогащения Staphylococcus aureus в материале от персонала «пищевых» объектов.
Состав**: |
Ингредиенты | грамм/литр |
Гидролизат казеина Мясной экстракт Дрожжевой экстракт Маннит Натрия хлорид Лития хлорид Глицин Натрия пируват Конечное значение рН (при 25єС) 6,9 ± 0,2 | 10,00 5,00 5,00 20,00 5,00 5,00 1,20 3,00 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление: |
Размешать 54,2 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть (осторожно) для полного растворения частиц. Разлить по 19 мл в пробирки для тестирования (20 мм х 200 мм). Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121єС) в течение 15 мин. Быстро остудить до комнатной температуры и асептично добавить в каждую пробирку по 0,3 мл 3,5%-ного раствора теллурита калия (FD047). Для тестирования мяса и мясных продуктов добавить 0,03 мл раствора. Тщательно перемешать перед использованием.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: хлорид лития ядовит. Избегать прикосновения и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно смыть большим количеством воды.
Принцип и оценка результата: |
Основу бульона предложили Giolitti и Cantoni (1), а Mossel и соавт. (2) рекомендовали использовать его для определения Staphylococcus aureus в сухом детском молоке и других пищевых продуктах для малышей, где не допускается наличие стафилококка при испытании 1 г продукта. Комитетом ISO (3) он рекомендован также для проверки мяса и мясных продуктов.
Маннит и пируват натрия действуют в качестве стимуляторов роста для стафилококков, что важно при низкой концентрации клеток в материале (4). Хлорид лития подавляет рост грамотрицательных бактерий, ферментирующих лактозу (5). Теллурит калия и глицин подавляют рост грамположительных бактерий. Добавление стерильного вазелинового масла поверх засеянной среды подавляет рост микрококков, т. к. создаются анаэробные условия. Концентрация теллурита калия должна уменьшаться в соответствии с массой исследуемого образца (0,1–0,01 г). Желательно засевать среду как можно скорее после остывания, так как она насыщается кислородом при хранении и если посевы делают позже, может потребоваться выдерживание пробирок в течение 15-20 мин в струе пара.
В 2 пробирки с бульоном засевают по 1 г или 1 мл соответствующего разведения образца. Поверх среды вносят 5 мл стерильного вазелинового масла и инкубируют при 37єС в течение 24-48 ч с ежедневном просмотром результатов. Почернение среды (обычно у дна пробирки) в течение указывает на присутствие Staphylococcus aureus. Из «почерневших» пробирок материал высевают штрихами на Агар Бэйд-Паркера (М043), на котором стафилококк образует черные колонии, окруженные прозрачными зонами (6).
Контроль качества: |
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий коричневато-желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет янтарную окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25єС водный раствор (5,42% вес/об) имеет рН 6,9 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 37єС.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) Staphylococcus aureus (25923) Escherichia coli (25922) Micrococcus luteus (10240) | Рост Обильный Подавляется Подавляется | Реакция* + – – |
Примечание: + = почернение среды (у дна или по всей среде в пробирке).
Ссылки: |
Условия и сроки хранения: |
Порошок хранить при температуре ниже +25єС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8єС.
