"Метод ВЭЖХ, включая ионную хроматографию. Теория и практика:
работа на оборудовании с ПО производства Dionex (часть Thermo Scientific)"
24 – 28 февраля 2014 г., МИТХТ им. *, г. Москва
Программа семинара
Введение
В данном курсе излагается теория хроматографии, современное состояние метода жидкостной хроматографии, включая ионную, с рассмотрением конструктивных особенностей компонентов хроматографа. Освещаются практические аспекты работы с оборудованием и комплектующими. Значительная часть посвящена надлежащей лабораторной практике, а также оптимизации хроматографического разделения. Кроме лекций проводятся практические занятия.
Продолжительность семинара 36 академических часов, в том числе 20 часов лекционный курс, 16 часов - практические занятия.
Тема 1. Теоретические основы хроматографии и особенности жидкостной и ионной хроматографии
Исторический экскурс, основные понятия в хроматографии.
Теория равновесной хроматографии. Граничные условия применимости. Размывание хроматографических пиков и их разрешение. Уравнение Ван-Деемтера. Жидкостная хроматография. Ионная хроматография - особенности метода. Двухколоночный и одноколоночный варианты метода.
Ультра-быстрая Высокоэффективная Жидкостная Хроматография Высокого Давления (ультра-ВЭЖХ или UHPLC). Ультра-быстрая Высокоэффективная Ионная Хроматография Высокого Давления (HPIC).
Влияние природы и состава элюента на эффективность разделения. Сорбенты и элюенты. Общие подходы к оптимизации процесса хроматографического разделения веществ: выбор элюентов, высоты и диаметра хроматографической колонки, размеров частиц сорбента. Особенности капиллярных колонок. Детекторы. Классификация хроматографических методов по механизму удерживания. Влияние pH среды и температуры. Ряды элюирования.
Тема 2. Детектирование в ВЭЖХ и ИХ
Обзор детекторов. Селективные и неселективные детектора.
Спектрофотометрия. Закон Ламберта-Бугера-Беера. Оптическая схема с/ф детектора. Косвенное детектирование. Диодная матрица.
Принцип кондуктометрического детектирования. Подавление фоновой электропроводности. Виды и конструктивные особенности подавителей. Зарядовый детектор. Области применения в ИХ.
Электрохимическое детектирование. Переменно токовый и постоянно токовый режимы, форма волны. Области применения. Выбор оптимального электрода для конкретной аналитической задачи.
Рефрактометрическое детектирование. Области применения.
Масс-селективное детектирование.
Тема 3. Устройство хроматографической системы
Насосы в хроматографии, конструктивные особенности и применение.
Инжектор. Способы ввода проб в инжектор. Автосамплеры. Пробоподготовка с помощью автосамплеров.
Термостат колонок. Назначение и влияние на хроматографию.
Детектор.
Специфические элементы ИХ. Подавление фоновой электропроводности. Виды и конструктивные особенности подавителей. Зарядовый детектор. Области применения в ИХ.
Колонки.
Тема 4. Программное обеспечение
Основной функционал программного обеспечения:
- Управление хроматографом; Сбор и обработка данных (Качественный и количественный анализ и градуировка); Отчет; Архивное хранение данных; Оптимизация хроматографического разделения с помощью опции «Виртуальная колонка».
Тема 5. Надлежащая лабораторная практика.
Принципы надлежащей лабораторной практики в части работы методом хроматографии:
- Диапазон ожидаемых концентраций и выбор метода ввода и подготовки пробы. Особенности определения следовых концентраций; Отбор и подготовка проб к хроматографическому анализу; Правила эксплуатации и подготовка хроматографа к работе; Рабочий журнал событий; Профилактические действия; Планирование ЗиП; Подготовка и проведение поверки; Консервация и реанимация хроматографа.
Диагностика состояния и неисправностей:
- Принципы поиска неисправности; Основные параметры, на которые следует обращать внимание; Методические и приборные проблемы;
Действия по устранению неисправностей:
- Поиск и устранение течи; Замены капилляров, фитингов, ферул; Замены фритов; Замены комплектующих (колонок, подавителей, картриджей и т. п.) ; Замены в головках насоса (опционально); Переборка инжекционного крана (опционально).
Тема 6. Практические занятия
Разделение группы на две подгруппы для работы на хроматографах.
Группа 1 готовит хроматограф к работе для анализа, запускает прибор, выводит его на режим, строит градуировочную зависимость по трем точкам. Далее производится проверка результата по одному из стандартов.
Группа 2 готовит хроматограф к работе для анализа, запускает прибор, выводит его на режим, строит градуировочную зависимость по трем точкам. Далее производится проверка результата по одному из стандартов.
Поиск неисправностей. Для обеих групп заранее будут внесены искусственные неисправности преподавателем. Поиск и устранение неисправностей на этапе вывода на режим и проверка градуировочной зависимости. Обсуждение результатов.
Тема 7. Зачет
Зачет в форме письменного теста.
Тема 8. Обсуждение результатов, обмен мнениями и опытом.
Подведение итогов.
* начало работы курсов 24.02.14 г. в 10:00 (регистрация участников в МИТХТ с 9:30)
** окончание работы курсов 28.02.14 г. в 12:30
