Teloxys aristata (L.) Moq. - лекарственное растение тибетской медицины

Публикация доступна для обсуждения в рамках функционирования постоянно

действующей интернет-конференции “Бутлеровские чтения”. http:///readings/

Поступила в редакцию 28 марта 2017 г. УДК 615.40:54.

Teloxys aristata (L.) Moq. – лекарственное

растение тибетской медицины

© Корнопольцева1*+ Татьяна Владимировна, Петров1 Евгений Васильевич

и Ботоева2 Елена Аполлоновна

1 Лаборатория медико-биологических исследований. Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. . г. Улан-Удэ. Россия. Тел.: [phone]. E-mail: *****@***ru

2 Кафедра акушерства и гинекологии с курсом педиатрии. Бурятский государственный университет.  ул. Смолина, 24а. г. Улан-Удэ. Россия.

_______________________________________________

*Ведущий направление; +Поддерживающий переписку

Ключевые слова: биологически активные вещества, стандартизация, цинарозид.

Аннотация

Исследование посвящено поиску и разработке новых эффективных препаратов, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний почек. Источниковедческий анализ тибетского медицинского трактата Чжуд-ши позволил выявить несколько композиций сборов, наиболее часто упоминаемых при терапии органов мочеполовой системы, в частности при заболеваниях почек. Одной из композиций является трехкомпонентный сбор, под условным названием “3 красных”, состоящий из марены красильной (Rubia tinctorum L.), бадана толстолистного (Bergenia crassifolia (L.) Fritsch и мари остистой Teloxys aristata (L.) Moq. Препараты и извлечения из корней марены и листьев бадана в научной и народной медицине используются в качестве спазмолитических и мочегонных средств, что указывает на целесообразность применения их в данной композиции в качестве средства для профилактики и терапии заболеваний почек.

Химический состав извлечений мари остистой изучен недостаточно. В извлечениях Teloxys aristata (L.) Moq. обнаружены углеводы (D-глюкоза), аминокислоты, полисахариды (водорастворимые в холодной и горячей воде (1.79 и 0.72%, соответственно)), пектины 5%, гемицеллюлозы 1%),  дубильные вещества 4%, сапонины тритерпеновой группы, кумарины, алкалоиды (стахидрин) 0.1%, фенолкарбоновые кислоты (хлорогеновая) 1%. Хроматографическими методами установлено наличие 6 веществ по качественным реакциям отнесенных к классу флавоноидов. После кислотного гидролиза с использованием аутентичных образцов доказано наличие кверцетина и кемпферола в качестве агликонов. УФ-спектры спиртового извлечения мари  остистой близки к УФ спектрам поглощения ГСО цинарозида (лютеолин-7-О-глюкозид), снятого в аналогичных условиях.  Разработана методика количественного определения флавоноидов в пересчете на цинарозид-стандарт, которая может быть использована для определения подлинности сырья. Содержание суммы флавоноидов  в пересчете на цинарозид-стандарт в надземной части мари остистой в пересчете на цинарозид-стандарт  составило 0.83%. Относительная ошибка метода “введено-найдено” не превышает относительной ошибки методики и результаты эксперимента можно считать удовлетворительными.

Введение

Профилактика и лечение заболеваний почек является актуальной проблемой современной медицины, однако выбор препаратов, оказывающих нефропротекторное действие, в настоящее время весьма ограничен, что определяет актуальность разработки новых эффективных препаратов, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний почек.

Источниковедческий анализ тибетского медицинского трактата Чжуд-ши [10] позволил выявить несколько композиций сборов, наиболее часто упоминаемых при терапии органов мочеполовой системы, в частности при заболеваниях почек. Одной из этих композиций является трехкомпонентный сбор, под условным названием “3 красных”. В состав прописи входят корни марены красильной (Rubia tinctorum L.), листья эриоботрии японской (Eryobotria japonica (Thunb.) Lindl.) и продукт жизнедеятельности насекомых – шеллак (Resina Lacca). Данная композиция входит в виде отдельного блока в состав многокомпонентных прописей, таких как “прославленный красный” и других.

В Забайкалье в качестве заменителей эриоботрии использовались рододендрон золотистый (Rhododendron aureum Georgi), свидина белая (Swida alba (L.) Opiz), грушанка круглолистная (Pyrola rotundifolia L.) и бадан толстолистный (Bergenia crassifolia (L.) Fritsch. В данном случае замена подлинного сырья растениями из местной флоры произведена по принципу “подобия окраски листьев”. Шеллак же заменяли Teloxys aristata (L.) Moq. [3].

Шесть  вариантов сбора были получены и переданы на фармакологическую экспертизу, в результате которой была установлена композиция, которая по фармакологической эффективности не уступает оригинальной. В состав данной прописи входят корни марены красильной (Rubia tinctorum L.),  листья бадана толстолистного (Bergenia crassifolia L.) Fritsch. и надземная часть мари остистой (Teloxys aristata L.)

Препараты и извлечения из корней марены и листьев бадана в научной и народной медицине используются в качестве спазмолитических и мочегонных средств [5, 6, 8], что указывает на целесообразность применения их в данной композиции в качестве средства для профилактики и терапии заболеваний почек.

Сведения о химическом составе и фармакологической эффективности Teloxys aristata (L.) Moq. в доступной нам литературе оказались достаточно скудными. Так, известно, что извлечения из данного вида дают положительную реакцию на присутствие экдистероидов [11], сапонинов, флавоноидов и алкалоидов. Отвары и настои используются при туберкулезе легких, гипергидрозе, кашле, неврастении, маточных кровотечениях, экстракты растения обладают противотрихомонадным, противовирусным и седативным действием [5, 7].

Целью настоящего исследования стало разработка методики стандартизации мари остистой.

Экспериментальная часть

Растительный материал – надземная часть мари остистой собрана в конце вегетационного периода в окрестностях поселков Солнечный, Селенгинск, Спиртзавод Республики Бурятия в 2016 году. Наличие основных групп биологически активных веществ определяли по общепринятым методикам [4, 9]. Спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре Agilent-8453Е (США) в кварцевых кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм. Метрологическую обработку результатов проводили согласно рекомендациям [4].

Результаты и их обсуждение

В извлечениях мари остистой обнаружены углеводы (D-глюкоза), аминокислоты, полисахариды (водорастворимые в холодной и горячей воде (1.79 и 0.72%, соответственно)), пектины 5%, гемицеллюлозы 1%),  дубильные вещества 4%, сапонины тритерпеновой группы, кумарины, алкалоиды (стахидрин) 0.1%, фенолкарбоновые кислоты (хлорогеновая) 1%.

Бумажная хроматография позволила установить наличие 6 веществ по качественным реакциям отнесенных к классу флавоноидов. После кислотного гидролиза с использованием аутентичных образцов доказано наличие кверцетина и кемпферола в качестве агликонов.

При исследовании УФ-спектров спиртового извлечения из данного сырья было обнаружено, что УФ спектры близки к УФ спектрам поглощения ГСО цинарозида (лютеолин-7-О-глюкозид) (рисунок). Далее при добавлении к спиртовому извлечению раствора алюминия хлорида II-ой максимум поглощения  УФ-спектра этих раствора смещается к 409 нм и близок с максимумами поглощения стандартного образца цинарозида (405 нм), снятого в аналогичных условиях [1].

Использование реакции комплексообразования с раствором алюминия хлорида обуслов-лено тем, что полученные комплексы имеют максимумы поглощения,  которые позволяют избирательно определить количество флавоноидов, поскольку эта область спектра достаточно удалена от максимумов поглощения сопутствующих фенольных и других органических веществ, содержащихся в экстрактах сырья [2].

Относительная ошибка  методики  количественного  определения суммы флавоноидов в надземной части мари остистой не превышает 4.76% (табл. 1). В связи с этим, по предлагаемой методике достаточно проводить анализ в трех повторностях. Расчет суммарного содержания флавоноидов можно проводить также с использованием величины удельного коэффициента поглощения цинарозида (Е1%1см 145) [1]. Различия значений, рассчитанных двумя способами, не превышают 3%.

Рисунок. Дифференциальные спектры поглощения ГСО цинарозида (1) и экстракта мари остистой (2) в 95% спирте этиловом

Табл. 1. Метрологические характеристики методики количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид-cтандарт в надземной части мари остистой

n	x, %	S2	Sx	P, %	t (p, f)	±∆x, %	E, %
9	0.83	0.0151	0.123	95	2.26	0.04	4.76

Примечание: x – средняя выборка, SІ – дисперсия, Sx – стандартное отклонение,

Р – доверительная вероятность, t(p, f) – критерий Стьюдента, Дx – полуширина доверительного интервала величины, E – относительная ошибка отдельного определения.

Для проверки отсутствия систематической ошибки методики были проведены эксперименты с добавками цинарозида-стандарта, непосредственно при экстракции сырья. Полученные результаты приведены в табл. 2. Результаты опытов с добавками свидетельствуют  об  отсутствии систематических ошибок в процессе анализа.

Табл. 2. Результаты опытов с добавками цинарозида-стандарта

Найдено флавоноидов в сырье, г	Добавлено цинарозида, г	Должно быть флавоноидов и цинарозида	Найдено флавоноидов и цинарозида, г	Абсолютная ошибка, г	Относительная ошибка, %
0.00581	0.0015	0.00726	0.00735	- 0.00009	1.23
0.00574	0.0015	0.00723	0.00715	0.00008	1.10
0.00560	0.0028	0.00840	0.00839	0.00011	1.30
0.00508	0.0029	0.00802	0.00806	- 0.00004	0.62
0.00546	0.0042	0.00973	0.00976	- 0.00015	1.54
0.00570	0.0048	0.01050	0.01104	0.00043	4.09

Содержание суммы  флавоноидов в пересчете на цинарозид-стандарт в надземной части мари остистой  должно быть не менее 0.5%.

Относительная ошибка метода “введено-найдено” 4.09% не превышает относительной ошибки методики 4.43% и результаты эксперимента можно считать удовлетворительными.

Выводы

В извлечениях мари остистой обнаружены углеводы (D-глюкоза), аминокислоты, полисахариды (водорастворимые в холодной и горячей воде (1.79 и 0.72%), соответственно, пектины (5%), гемицеллюлозы (1%), дубильные вещества (4%), сапонины тритерпеновой группы, кумарины, иридоиды, алкалоиды (0.1%), фенолкарбоновые кислоты (1%), флавоноиды – гликозиды кверцетина и кемпферола (0.87%). Разработана методика количественного определения флавоноидов в пересчете на цинарозид-стандарт, которая может быть использована для определения подлинности сырья.

Литература

, Калинкина методики количественного определения флавоноидов в манжетке обыкновенной. Химия растительного сырья. 2000. №1. С.85. , Точкова комплексообразования в анализе флавоноидов. Матер. 2-го Всесоюзн.  симп.  по фен. соед. Алма-Ата: Наука. 1973. С.168-172. , словарь тибетско-латино-русских названий лекарственного растительного сырья, применяемого в тибетской медицине. Улан-Удэ. 1963. 180с. Государственная фармакопея СССР: Вып.1. Общие методы анализа, 11-е изд. М.: Медицина. 1987. Дикорастущие полезные растения России. Отв. ред. , . С-П.: Изд-во СпХфА. 2001. 663с. Машковский средства. Т.1. 11 изд-е. М.: Медицина. 1988. 624с. Растительные  ресурсы СССР. Семейства Magnoliaceae - Limoniaceae. Л.: Наука. 1984. 460с. Федосеева исследования листьев бадана толстолистного. Автореф. дис. … канд. фарм. наук. Пятигорск. 1988. 20с. Химический анализ лекарственных растений. Учебное пособие для фарм. ВУЗов. Под. Ред. проф. Гринкевич. М. 1983. 176с. “Чжуд-ши” - памятник средневековой тибетской культуры: Пер. с тиб. Предисл. , . Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние. 1989. 349с. R., Harmatha J., Marion-Poll F., Dinan L., Wilson pilation of the literature reports for the screening of vascular plants, algae, fungi and non-arthropod invertebrates for the presence of ecdysteroids. The Ecdysone Handbook, 3rd edition, Paris. 2007. http://ecdybase.org

In the English version of this article, the Reference Object Identifier – ROI: jbc-02/17-50-4-153

Teloxys aristata (L.) Moq. – plant of Tibetan medicine

© Tatiana V. Kornopoltseva,1*+ Еvgeny V. Petrov,1 and Elena A. Botoeva2

1 Laboratory of Biomedical Research. Institute of General and Experimental Biology.

Sakhyanovoy St., 6. Ulan-Ude, Russia. Phone: [phone]. E-mail: *****@***ru

2 Department of Obstetrics and Gynecology with the Course of Pediatrics. Buryat State University.

Smolin St., 24a. Ulan-Ude. Russia.

___________________________________

*Supervising author; +Corresponding author

Keywords: biologically active substances, standardization, cinaroside.

Abstract

The study is devoted to the search and development of new effective drugs intended for the treatment and prevention of kidney diseases. The source study of the Tibetan medical treatise Chzhud-shi allowed to reveal several compositions of charges, most often mentioned in the treatment of the organs of the genitourinary system, in particular with kidney diseases. One of the compositions is a three-component collection, codenamed "3 reds", consisting roots of Rubia tinctorum L., leaves Bergenia crassifolia (L.) Fritsch and ariel part Teloxys aristata (L.) Moq. From roots of Rubia and leaves of Bergenia in scientific and folk medicine are used as spasmolytic and diuretics, which indicates the expediency of using them in this composition as a means for the prevention and treatment of kidney diseases.

The chemical composition of the extracts of marinated spinach has not been adequately studied. In the extracts of Teloxys aristata (L.) Moq. Carbohydrates (D-glucose), amino acids, polysaccharides (water soluble in cold and hot water (1.79 and 0.72%, respectively)), pectins 5%, hemicellulose 1%), tannins 4%, triterpene group saponins, coumarins, alkaloids (stachidrine) 0.1%, phenol carboxylic acids (chlorogenic) 1%. Chromatographic methods have been used to establish the presence of 6 substances in qualitative reactions classified as flavonoids. After acid hydrolysis using authentic samples, the presence of quercetin and kaempferol as aglycones was proved. The UV spectra of alcohol extract of marigold are similar to UV absorption spectra of GSO cinaroside (luteolin-7-O-glucoside), taken under similar conditions. A methodology for the quantitative determination of flavonoids in terms of cinaroside-standard has been developed, which can be used to determine the authenticity of raw materials. The content of the sum of flavonoids in terms of cinaroside standard in the aerial part of marinous in terms of cinaroside standard was 0.83%. The relative error of the "introduced-found" method does not exceed the relative error of the technique and the experimental results can be considered satisfactory.