ВЛИЯНИЕ ЭКСТРАКТОВ НА ОСНОВЕ ЧАЕВ ГРУЗИИ PER SE И В КОМБІНАЦИИ С ЦИСПЛАТИНОМ НА РОСТ КАРЦИНОСАРКОМЫ УОКЕР W-256 И КАРЦИНОМЫ ГЕРЕНА КРЫС
1, Л. Гулуа2, 1, 1, 1, , 1
1Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. НАН Украины; 2Институт биохимии и биотехнологии им. Дурмишидзе НАН Грузии
Журнал „Врачебное дело” Киев, Украина, 2007
Свежий экстракт зеленого чая эффективно тормозил рост карциносаркомы Уокер W-256 и в меньшей степени – карциномы Герена. При совместном применении свежего экстракта зеленого чая с Цисплатином, терапевтическая эффективность Цисплатина не повышалась, а экстракта чая – даже значительно снижалась. Экстракт зеленого чая, выдержанный 1 год в воздушно-сухом состоянии, наоборот, несколько ускорял рост карциносаркомы Уокер W-256. Экстракт черного чая значительно ускорял рост карциносаркомы Уокер W-256. Биоконцентрат, изготовленный из экстрактов зеленого чая и выжимок красного вина, сам по себе слабо тормозил рост карциномы Герена и существенно ускорял рост карциносаркомы Уокер W-256. Вместе с тем, такой биоконцентрат значительно (в 1,7 – 4 рази) увеличивал терапевтическую эффективность Цисплатину как по отношению к карциноме Герена, так и по отношению к карциносаркоме Уокер W-256.
Тезисы на съезд онкологов Украины
сентябрь 2006 - C.26.
ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ И АНТИТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ БИОКОНЦЕНТРАТОВ ИЗ ЭКСТРАКТОВ ЗЕЛЕНОГО И ЧЕРНОГО ЧАЯ
И ВЫЖИМОК КРАСНОГО ВИНА.
1, Л. Гулуа2, 1, 1, 1, , 1
1Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. НАН Украины; 2Институт биохимии и биотехнологии им. Дурмишидзе НАН Грузии
Цель работы: создание растительных биоконцентратов с противоопухолевыми и антиканцерогенными свойствами.
Методы исследований. В работе были использованы методы экспериментальной онкологии, биохимические методы, методы гель-электрофореза, Western-blotting и Surface Plasmon Resonance (SPR).
Результаты исследований. Разработаны технологии и изготовлены опытные партии биоконцентратов из экстрактов черного чая (ЭЧЧ); зеленого чая (ЭЗЧ); зеленого чая и выжимок красного вина (ЭЗЧ+В). Испытано их противоопухолевое действие по отношению к перевивным опухолям крыс - карциносаркоме Уокер (КУ) и карциноме Герена (КГ). Все биоконцентраты растворяли в питьевой воде (обычно 1 мг/мл, в некоторых опытах 2 мг/мл). ЭЧЧ значительно ускорял рост КУ и не влиял на рост КГ. ЭЗЧ существенно (вплоть до полного подавления) тормозил рост КУ (индекс торможения был обратно пропорционален десятичному логарифму числа трансплантированных клеток) и на уровне тенденции - рост КГ. ЭЗЧ+В сам по себе вдвое уменьшал выход (но не скорость роста) КУ и на уровне тенденции тормозил рост КГ. Однако в сочетании с цисплатином ЭЗЧ+В в концентрации 1 мг/мл усиливал эффект цитостатика на КГ в 1,7 раза, а в концентрации 2 мг/мл - почти в 4 раза. При этом ЭЗЧ+В резко уменьшал основной побочный эффект цисплатина - его нефротоксичность (по показателям мочевины и креатинина в сыворотке крови).
C целью выяснения молекулярных эффектов ЭЗЧ в опухолевых клетках экспериментальных животных (в рацион которых был включен экстракт зеленого чая) изучали экспрессию белков ядерного фактора транскрипции NF-kВ (p50 и р65) и белков NF-kВ-зависимых генов (iNos, cox-2, odc). Применение ЭЗЧ приводит к уменьшению экспрессии в ядерных экстрактах белков NF-kВ (р50 и р65) приблизительно в 1,5-3 раза, а также к уменьшению экспресии белков, вовлеченных в процессы пролиферации клеток (СОХ-2, INOS и ODC). Таким образом, представленные результаты свидетельствуют о том, что противоопухолевое действие изученных биоконцентратов медиируется через полиамин - и NF-κB-зависимые сигнальные пути.
Полученные данные указывают на перспективность использования ЭЗЧ и ЭЗЧ+В в лечебно-профилактическом питании онкологических больных и пациентов из групп онкологического риска и в то же время на необходимость дальнейших исследований для выбора эффективных доз и схем их применения.
Работа выполнена при поддержке УНТЦ (грант №Gr-122j).
Изучение влияния растительных биоконцентратов на рост трансплантируемых опухолей, на гематологические и биохимические параметры животных-опухоленосителей.
В связи с наличием противоопухолевых и антиканцерогенных свойств в последние годы привлекли к себе внимание полифенолы (ПФ) растительного происхождения, которые содержатся в зеленом чае, винограде, сое и других продуктах. Эти свойства выявлены у широкого круга полифенолов: у биофлавоноидов зеленого и черного чая (наиболее изучен из них – эпигаллокатехин-3-галлат); резвератроле (природном стилбене винограда), генистеине и даидзеине (наиболее изученных биофлавоноидах сои).
Эпидемиологические исследования показывают, что заболеваемость раком молочной железы и простаты ниже всего в странах, жители которых регулярно употребляют зеленый чай и в пищевой рацион которых входят соевые продукты.
Во многих работах продемонстрировано, что полифенолы из разных растений эффективно подавляют пролиферацию злокачественных клеток человека и животных, растущих в культуре: опухолевых клеток легких, кишечника, простаты, гепатомы, лейкозных клеток и др.
В мировой литературе имеются также работы, выполненные in vivo на экспериментальных животных, где продемонстрировано протиопухолевое и антиметастатическое действие ПФ. Имеются работы, в которых изучались молекулярные механизмы действия природных ПФ. Авторами этих исследований были высказаны предположения о том, что механизмы антиканцерогенного и антибластического действия природных полифенолов включают модуляцию сигнальных путей, вовлеченных в регуляцию пролиферации и трансформации клеток, индукцию апоптоза в пренеопластических и неопластических клетках, а также в ингибирование ангиогенеза и инвазии опухолей. Имеются данные о привлечении к этим механизмам полиаминов, фактора транскрипции NF-карpaB и отдельных генов: ras, jun, bcl-2. Необходимо отметить, что большинство данных касательно механизмов протиопухолевого действия полифенолов получено в экспериментах in vitro.
В мире лидирующие позиции в изучении этой проблемы занимают США (Anderson Cancer Center, Laboratory for Cancer Research, Department Chemical Biology, College Pharmacy, State University New Jersey, New Jersey, USA). Исследования механизмов действия ПФ зеленого чая проводятся также в Израиле, Германии, Корее, ПФ винограда в Италии и Испании.
Целью настоящей работы было исследование влияния экстрактов зеленого чая на рост карциносаркомы Walker (W-256), на гематологические параметры, на уровень малонового диальдегида в печени и сыворотке крови. Для выяснения молекулярных механизмов действия экстрактов зеленого чая в опухолевых клетках экспериментальных животных (в кормовой рацион которых был включен экстракт зеленого чая) изучали экспрессию белков ядерного фактора транскрипції NF-kВ (p50 и р65), ингибиторных белков NF-kВ (I-kB) и белков генов (Bcl-XL, iNOS, COX-2, ODC), регуляция которых опосредована NF-kВ.
Результаты. При исследовании влияния биокомпозитов на рост карциносаркомы Walker (W-256) установлено, что потребление крысами экстрактов зеленого чая в дозе 1 мг/мл в питьевой воде (после трансплантации опухолей) приводит к торможению опухолевого роста, причем степень торможения зависит от числа трансплантированных опухолевых клеток и от времени между трансплантацией и началом курса потребления животными экстрактов чая. Если для трансплантации использовали 1,0⋅106 клеток на животное и крысам начинали давать экстракт чая через 7 дней после прививки, опухоли возникли лишь в 20% животных (против 100% в контроле). Индекс торможения составил 55%.
При трансплантации 4,5⋅106 клеток и животным начинали давать пить экстракт чая через 3 дня после прививки, опухоли возникли в 80% животных. Индекс торможения в этом случае составил 55%.
Если же животным трансплантировали 7,7⋅106 клеток и начинали давать экстракт чая после появления первой опухоли, опухоли возникали в 80% животных; индекс торможения составил 28%.
Для выявления антиоксидантних свойств экстрактов зеленого чая проведено исследование уровней малонового диальдегида (МДА) в печени и сыворотке крови животных с карциносаркомой Walker. Установлено, что потребление крысами экстрактов зеленого чая приводит к значительному снижению уровня МДА в печени и умеренному снижению в сыворотке крови.
Установлено, что потребление животными экстрактов зеленого чая приводит к снижению уровней белков р50, р65 (субъединиц фактора транскрипции NF-карpaB) в ядрах клеток карциносаркомы Walker. Уменьшение уровней р50 и р65 в ядрах сопровождалось снижением экспрессии белков Bcl-XL, iNOS, COX-2, ODC. Вероятно, потребление животными экстрактов зеленого чая приводит к подавлению активности фактора транскрипции NF-κB, что, возможно, в свою очередь приводит к ингибированию транскрипции исследованных генов. Необходимо отметить, что снижение экспрессии ODC (ключевого фермента биосинтеза полиаминов) сопрождается значительным уменьшением концентрации путресцина, спермидина и спермина в клетках карциносаркомы.
Таким образом, представленные результаты свидетельствуют о том, что противоопухолевое действие экстрактов зеленого чая медиируется через полиамин - и NF-κB-зависимые сигнальные пути.
