Тип практики: Б2.П.1.Практика по получению профессиональных умений и опыта профессиональной деятельности (стр. 6 )

Ход работы: взять примерно 1 г высечек из листьев и поместить в предварительно взвешенные абсолютно сухие бюксы, закрыть и немедленно взвесить. Затем диски поместить на поверхность воды в закрытые чашки Петри и оставить для насыщения водой на 2 часа. Далее тургесцентные высечки из листьев достать, просушить снаружи фильтровальной бумагой и взвесить. Для контроля диски поместить в воду и через 30 мин повторить взвешивание. Если масса ткани не изменится, значит, она полностью тургесцентная, т. е. полностью насыщена водой. После этого определить массу абсолютно сухой ткани.

Относительная тургесцентность – величина, показывающая, какую долю в процентах составляет наличное количество воды от ее содержания, обеспечивающего полный тургор.

На основании полученных данных вычисляют водный дефицит растений:

d = 100(b – a)/(b – c),

(1)

где a – масса бюксы с растительной пробой до насыщения; b – масса бюксы с растительной пробой после насыщения; с – масса бюксы с высушенной про-бой до абсолютно сухого веса.

Результаты опыта записать в виде табл. 1.

Таблица 1

Определение водообеспеченности растений

Масса	Масса	Количест-
Вари-	№	Масса	Содержа-	во воды,	Водный
Навеска	тургес-	абсолютно
ант	бюк-	бюксы,	ние	насыщаю-	дефи-
опыта	сы	г	листьев, г	центной	сухой	воды, г	щей	цит, %
ткани, г	ткани, г
листья, г

Лабораторная работа 7

Определение состояния устьиц и межклетников методом Молиша

Цель работы: определить влияние внешних условий на состояние устьиц и интенсивность транспирации.

Материалы и оборудование: ксилол (в капельнице), этиловый спирт (в капельнице); бензол (в капельнице), пипетки.

Растение: свежие или подвядшие листья растений, листья растений, находившихся в темноте.

Межклетники листа обычно бывают заполнены воздухом, благодаря чему при рассматривании на свет лист представляется матовым. Если произвести инфильтрацию, т. е. заполнение межклетников какой-либо жидкостью, то соответствующие участки листа становятся прозрачными.

Определение состояния устьиц методом инфильтрации основано на способности жидкостей, смачивающих клеточные оболочки, проникать в силу капиллярности через открытые устьичные щели в ближайшие межклетники, вытесняя из них воздух, в чем легко убедиться по появлению на листе прозрачных пятен. Разные жидкости способны проникать в устьичные щели, открытые в различной степени: ксилол легко проникает через слабо открытые устьица, бензол – через устьица открытые средне, а этиловый спирт способен проникать только через широко открытые устьица.

Данный метод, предложенный Молишем, очень прост и вполне применим для работы в полевых условиях.

Ход работы.

На нижнюю поверхность листа нанести отдельно маленькие капли бензола, ксилола и этилового спирта. Держать лист в горизонтальном положении до полного исчезновения капель, которые могут либо испариться, либо проникнуть внутрь листа, и рассмотреть лист на свет.

Исследовать листья, выдержанные в различных условиях (свежие и подвядшие, освещенные и затененные и т. п.). Каждый раз исследовать 2-3 листа.

Таблица 1

Влияние внешних условий на степень открытия устьиц

Листья растения	Условия опыта	Состояние устьиц
Ксилол	Спирт	Бензол

Задание: Результаты записать в таблицу 1, отмечая степень открытости устьиц: широко, средне, слабо. Сделать вывод о влиянии внешних условий на устьичные движения.

Определение состояния устьиц при помощи отпечатков по Молотковскому.

Цель работы: определение работы устьиц в зависимости от освещенности.

Материалы и оборудование: бесцветный лак для ногтей, тонкая стеклянная палочка, пинцет, микроскоп, окуляр-микрометр, объект-микрометр.

Растения: комнатные растения, листья которых за 2-3 часа до занятия закрывают светонепроницаемым чехлом.

На поверхность листа наносят тонкий мазок лака. После испарения растворителя образуется пленка, на которой отпечатывается эпидермис с устьицами. Рассматривая полученные отпечатки в микроскоп, можно определить количество и размер устьиц, измерить ширину устьичных щелей. Данный метод можно использовать не только для лабораторных, но и для полевых исследований (в последнем случае отпечатки хранят до определения в пробирках с водой). Для исследования листьев, устьица которых расположены в углублениях эпидермиса (например, у олеандра), этот метод неприменим, т. к. у таких листьев отпечатки не получаются.

Ход работы. Нанести на нижнюю сторону листа при помощи стеклянной палочки каплю раствора лака и быстро размазать тонким слоем. После высыхания снять пленку пинцетом, поместить на предметное стекло и рассмотреть при большом увеличении. Вставить в микроскоп окулярный микрометр и измерить ширину и длину устьичной щели не менее, чем у 10 устьиц и вычислить средние величины.

Определить цену деления окулярного микрометра. Для этого поместить на предметный столик микроскопа объект-микрометр, каждое деление которого равно 0,01 мм или 10 мкм. Поворачивая окуляр совместить обе шкалы так, чтобы их шкалы были параллельны и одна перекрывала другую. Определение цены деления окулярного микрометра проводится по принципу нониуса, т. е. совмещают одну из черточек шкалы окулярного и объективного микрометра и находят следующее совмещение. Найти совпадающие линии и определить, сколько делений окулярного микрометра А соответствуют делениям объект-микрометра В, находящегося между совмещенными точками. Цена деления окулярного микрометра определяется по формуле:

Цена деления = В · 10 мкм/А.

Умножив длину и ширину устьичных отверстий, выраженных в делениях окулярного микрометра, на цену одного деления, найти абсолютные размеры устьичных щелей. Вычислить площадь устьичной щели с некоторым приближением путем умножения длины на ширину.

Исследовать листья разных ярусов одного и того же растения, а также хорошо освещенные и затененные. Результаты записать в таблицу 2.

Таблица 2

Влияние освещенности на размеры устьичных отверстий

Название растения	лист	условия	Цена деления окулярного микрометра, в мкм	Размеры устьичных отверстий в мкм	Площадь устьичных отверстий
ширина	длина	ширина	длина

Задание: сделать выводы о влиянии ярусности и условий освещения на размеры устьичных отверстий.

Лабораторная работа 8

Определение водоудерживающей способности растений методом завядания (по Арланду) 

Цель работы: по величине и «потери завядания» определить степень соответствия условий произрастания требованиям растений.

Материалы и оборудование: весы, листья различных растений: ильм приземистый, полынь обыкновенная, сурепка желтая, смородина двуиглая.

Ход работы:

Опыт 1. 4 листа одного яруса и близкого возраста делят на две партии. Два листа помещают в предварительно взвешенный бюкс с крышкой и взвешивают. Определяют массу свежих листьев (Р1) и высушивают растительный материал до постоянной массы в сушильном шкафу при 1050С (первое взвешивание делают через час, а затем повторяют его каждые 40–60 мин, пока масса не перестанет уменьшаться). Масса листьев после высушивания – Р2.

По разности массы листьев до и после высушивания определяется содержание воды в них: А= Р1 – Р2.

Рассчитывают содержание воды в листьях (А1) на 1 г свежей массы ткани из пропорции:

Р1	–	А,
1 г	–	А1.

Опыт 2. Другие два листа взвешивают вместе с бюксом (предварительно взвешенным) и определяют массу листьев (Р3), затем подвяливают их в течение 2 часов при обычных условиях в помещении, разложив листья на бумаге. При наличии аналитических весов можно взвешивать только листья, не пользуясь бюксами. После этого их снова взвешивают, определяют массу листьев после подвядания (Р4). Потеря воды при подвядании будет А2 = Р3 – Р4, а потеря воды в расчете на 1 г ткани (А3) узнается из пропорции:

3	–	А2,
1г	–	А3,

где А3 – содержание воды в 1 г свежей массы ткани.

Соответственно количество воды, оставшееся в листьях при подвядании в расчете на 1 г ткани, будет равно А4 = А 1 – А3.

Водоудерживающая способность выражается количеством воды, оставшейся в листьях при подвядании в процентах, к ее исходному содержанию:

А1	–	100 %,
А4	–	Х %.

Если необходимо наряду с водоудерживающей способностью листьев определить содержание в них воды или абсолютно сухой массы, то для этого можно использовать результаты первой части работы.

Результаты опыта 1 вносят в таблицу 1.