Лизиновый бульон
Lysine Decarboxylase Broth / without Peptone
Лизиновый бульон / Лизиновый бульон без пептона
| M376 / M376I
|
Эту среду используют для дифференциации сальмонелл, цитробактеров и других энтеробактерий.
Состав**:
Ингредиенты
| M376 грамм/литр
| M376I грамм/литр
| Пептический перевар животной ткани
| 5,00
| –
| Дрожжевой экстракт
| 3,00
| 3,00
| Глюкоза
| 1,00
| 1,00
| L-Лизина гидрохлорид
| 5,00
| 5,00
| Бромкрезоловый пурпурный
| 0,02
| 0,02
| Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2
| | |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 14,0 г порошка М376 или 9,0 г порошка М376I в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.
Принцип и оценка результата:
Эту среду впервые предложил Фальков (1). Затем ее модифицировал Тейлор (2), удалив из прописи пептон (пептический перевар животной ткани), за счет которого наблюдались ложноположительные результаты у Citrobacter freundii и близких микроорганизмов. Утилизация пептона приводит к выделению аммиака, имеющего щелочную реакцию, которая маскирует отрицательный результат теста (отсутствие лизиндекарбоксилазы). Недавно международный комитет (3) рекомендовал использовать модификацию Тейлора, поскольку она имеет преимущества, по сравнению с модификацией Мюллера (не требуется соблюдения специальных условий: анаэробиоз и низкие значения рН).
В начальном периоде инкубирования микроорганизмы ферментируют глюкозу с образованием кислых продуктов, что сопровождается изменением цвета индикатора на желтый. В дальнейшем если происходит декарбоксилирование лизина с образованием кадаверина, развивается щелочение среды этим амином и среда снова становится пурпурной. Если цвет среды остается желтым, это указывает на отсутствие декарбоксилазной активности у микроорганизма.
Пептический перевар животной ткани и дрожжевой экстракт служат источником необходимых питательных веществ для роста бактерий. Глюкоза – ферментируемый субстрат, бромкрезоловый пурпурный – индикатор рН. Рекомендуется использовать небольшой инокулюм и учитывать результаты не ранее 24 ч после посева, а в сомнительных случаях – в течение 4 суток.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий зеленовато-желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет лиловую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы М376 (1,4% вес/об) и М376I (0,9% вес/об) имеют рН 6,8 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
| Лизин на среде М376
| Лизин на среде М376I
| Escherichia coli (25922)
| –
| –
| Citrobacter freundii (8090)
| +*
| –
| Enterobacter aerogenes (13048)
| +
| +
| Klebsiella pneumoniae (13883)
| +
| +
| Salmonella paratyphi А
| –
| –
| Salmonella typhi (6539)
| +
| +
| Salmonella enterica ssp. arizonae
| +
| +
| Serratia marcescens (8100)
| +
| +
| Proteus vulgaris (13315)
| –
| –
| Proteus mirabilis (25933)
| –
| –
| Shigella dysenteriae (13313)
| –
| –
|
Примечания:
"+" - положительная реакция, пурпурный цвет;
"–" - отрицательная реакция, желтый цвет или цвет не изменен;
"+*" - ложноположительная реакция.
Ссылки:
1. Falkow S., 1958, Am. J. Clin. Pathol., 29:598.
2. Taylor W. I., 1961, Appl. Microbiol., 9:487.
3. International Organization For Standardization (ISO), 1993, Draft ISO/DIS 6579.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|
