Билет 1
1. Снижение специфичности рестриктаз и обуславливающие ее факторы.
Единица активности рестриктазы. Определение количества фермента, необходимого для гидролиза ДНК определенного размера и с известным числом рестрикционных сайтов.
2. Векторы на основе однонитевых фагов. Отбор рекомбинантных молекул. Преимущества и недостатки данного типа векторов.
Билет 2
1. Фагмиды. Клонирование в фагмидах. Отбор рекомбинантных молекул. Преимущества фагмид по сравнению с векторами на основе нитевидных фагов.
2. Метод высоточного рестрикционного картирования.
Билет 3
1. Фазмиды. Использование для клонирования кДНК и геномной ДНК. Преимущества фазмид по сравнению с другого типа векторами для конструирования геномных библиотек.
2. Амплификация фрагментов ДНК с неизвестной последовательностью нуклеотидов.
Билет 4
1. Стратегия создания библиотек генов.
2. Построение физических карт с помощью метода «прогулки по хромосоме».
Билет 5
1. Аллель-специфичная ПЦР.
2. Получение набора делеций для анализа протяженных фрагментов ДНК.
Билет 6
1. Сайт-направленный мутагенез с использованием двух олигонуклеотидных праймеров и селекцией мутантной плазмиды по утрате уникального сайта рестрикции.
2. Структура современного вектора экспрессии.
Билет 7
1. Сайт-направленный мутагенез с помощью полимеразной цепной реакции.
2. Линейные векторы или искусственные хромосомы дрожжей (YAC). Использование векторов YAC для конструирования геномных библиотек.
Билет 8
1. Сайт-направленный мутагенез с помощью двух комплементарных мутагенных праймеров.
2. Агробактерии как природные переносчики генетической информации в клетки двудольных растений. Структурная и функциональная организация Ti плазмид.
Билет 9
1. Получение трансгенных животных.
2. Синтез кДНК
Билет 10
1. Клонирование ПЦР-фрагментов.
2. Обязательные и дополнительные требования к векторам.
Билет 11
1. Принципы клонирования в космидах с одним и двумя cos-сайтами.
2. Линкеры. Использование на примере клонирования кДНК.
Билет 12
1. Адапторы. Использование на примере клонирования кДНК.
2. Ассиметричная ПЦР.
Билет 13
1. Аллель-специфичная ПЦР.
2. Получение трансгенных растений с помощью коинтегративной и бинарной векторных систем.
Билет 14
1. Инсерционная инактивация генов у мышей и ее использование в фундаментальных исследованиях.
2. Использование фагоспецифических промоторов для регулируемой экспрессии целевого белка на примере T7-регулируемой экспрессии.
Билет 15
1. Векторы для клонирования генов в клетках дрожжей.
2. Трансгенные животные как фармацевтические фабрики (биореакторы).
Билет 16
1. Векторы на основе бактериофага лябда. Методы отбора рекомбинантных молекул.
2. Стратегия создания библиотек генов. Расчет количества клонов в библиотеке генов. Определение представительности библиотеки генов.
Билет 17
1. Векторная система BAC.
2. Генотерапия, характеристика возможных подходов.
Билет 18
1. ДНК-вакцины.
2. Фаг лямбда как потенциальный вектор клонирования. Общие принципы конструирования векторов на основе фага. Векторы внедрения и векторы замещения.
Билет 19
1. Методы непрямого отбора рекомбинантных клонов. Методы отбора, основанные на фенотипическом различии рекомбинантных и нерекомбинантных клонов.
2. Упаковка фаговой ДНК in vitro.
Билет 20
1. Плазмидные векторы специального назначения. Векторы для отбора промоторов. Векторы прямой селекции рекомбинантных клонов.
2. Использование рестриктаз и нуклеаз для введение делеций в ДНК.
Билет 21
1. Методы непрямого отбора рекомбинантных клонов. Методы отбора, основанные на фенотипическом различии рекомбинантных и нерекомбинантных клонов.
2. Полимеразная цепная реакция. Оптимизация ПЦР.
