Slanetz and Bartley Medium Среда Сланец-Бартли для энтерококков | M612 / M612I |
Эту среду используют для определения и подсчета энтерококков методом мембранных фильтров.
Состав**: |
Ингредиенты | М612 грамм/литр | М612I грамм/литр |
Триптоза Дрожжевой экстракт Глюкоза Натрия гидрофосфат Калия гидрофосфат Натрия азид Трифенилтетразолия хлорид (ТТХ) Агар-агар Конечное значение рН (при 25єС) 7,2 ± 0,2 | 20,00 5,00 2,00 4,00 – 0,40 0,10 15,00 | 20,00 5,00 2,00 – 4,00 0,40 0,10 15,00 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление: |
Размешать 46,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ И НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ. Перегревание приводит к порче среды.
Предупреждение: Азид натрия имеет тенденцию к образованию взрывчатых соединений с металлами, поэтому рекомендуется использовать много воды для удаления остатков среды.
Принцип и оценка результата: |
Эту среду разработали Slanetz и Bartley (1) для определения и подсчета энтерококков методом мембранных фильтров. Ее можно использовать также для прямого посева (2, 3). С небольшой модификацией она рекомендована международным комитетом (4): вместо гидрофосфата натрия рекомендовано использовать гидрофосфат калия.
Эта среда высокоселективна для энтерококков. Азид натрия подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов. ТТХ восстанавливается бактериями до нерастворимого формазана, который откладывается в клеточной стенке, обусловливая темно-красный цвет колоний. Все темно-бордовые колонии, появившиеся при повышенных температурах инкубирования (44-45єС) предположительно можно относить к энтерококкам (5, 6). Эта среда официально рекомендована для подсчета энтерококков в воде (7). Исследуемую воду фильтруют через фильтр, который затем помещают на поверхность данной среды в чашках и инкубируют 4 часа при 35єС, а затем 44-48 ч при 44-45єС. Подсчитывают красные или темно-бордовые колонии энтерококков. Предварительное инкубирование при 35єС помогает выделить поврежденные бактерии. Поскольку не все виды восстанавливают ТТХ, необходимо принимать во внимание и бледные колонии.
Пробы пищевых продуктов гомогенизируют и разводят физиологическим раствором так, чтобы получить 15-150 колоний на каждой чашке со средой. Гомогенаты или их разведения распределяют по поверхности агара и инкубируют среду при 35єС в течение 48 ч. Подсчитывают розовые или темно-красные колонии с узким беловатым ободком (3).
Контроль качества: |
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-желтую окраску, слегка опалесцирует, когда в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25єС водный раствор (4,65% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 44-48 ч при 44-45єС.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) Enterococcus faecalis (29212) Escherichia coli (25922) | Рост Обильный Подавляется | Цвет колоний Красный или темно-бордовый – |
Ссылки: |
Условия и сроки хранения: |
Порошок хранить при температуре ниже +25єС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8єС.
