Стимуляция пролиферации мезенхимальных стволовых клеток пульпы зуба человека in vitro цитрат-стабилизированными наночастицами диоксида церия и их биобезопасность.
1, 1, 1, 1 , 2
1Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино, Россия
2ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Россия
3ИПРИМ РАМ
Ключевые слова: наночастицы диоксида церия, МСК человека, пролиферация
e-mail: *****@***ru
Задача повышения пролиферактивной активности мезенхимальных стволовых клеток(МСК), используемых для клеточной терапии является актуальной. На модели МСК пульпы зуба было исследовано воздействие цитрат-стабилизированных наночастиц СеО2 на пролиферативные показатели, а так же биобезопасность этих наночастиц в МТТ-тесте. Было показано, что внесение наночастиц СеО2 в культуру МСК приводит к ускорению скорости пролиферации клеток в доз-зависимой манере. Проведенный анализ транскрипционного профиля МСК в присутствии наночастиц СеО2 подтвердил увеличения уровня транскриптов генов, ответственных за пролиферацию и клеточный цикл. Полученные результаты указывают на то, что наночастицы СеО2 можно рассматривать в качестве основы для разработки высокоэффективных и недорогих добавок для культивированием клеток in vitro Для проведения биологических исследований проводили осаждение наночастиц CeO2 доведения до pH=3 добавлением 10% соляной кислоты с последующим центрифугированием при 20оС, 11 200 g в течение 10 минут. Осадок наночастиц ресуспендировали в дистиллированной воде и повторно центрифугировали в тех же условиях. Полученный осадок снова ресуспендировали в воде и доводили путем добавления 10% раствора аммиака до рН=7,2-7,4.). Исследование метаболической активности МСК человека с использованием МТТ-теста показало достоверное увеличение сигнала при концентрации наночастиц 10-5 М. Исследование конфлюэнтности клеточной культуры через 24, 48 и 72 часа культивирования в присутствии наночастиц диоксида церия показало, что обе исследованных концентрации наночастиц поддерживают адгезию, распластывание и рост субстрат-зависимых клеток, а также оказывают стимулирующее действие на их пролиферацию при посевной плотности 15тыс/см2. Результаты анализа количества живых и мертвых клеток после инкубации с наночастицами диоксида церия показал отсутствие положительно окрашенных на йодид пропидия клеток в группах с наночастицами, что подтверждает отсутствие их токсического действия. Показано значительное превалирование в численности жизнеспособных клеток в опытных образцах по сравнению с контролем, что также служит подтверждением в пользу стимуляции пролиферативной активности клеток церием в концентрациях 10-5 и 10-7 М. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РНФ № 14-25-00179
