Типовые задания к занятию №4.
физиология КРОВИ. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ, ГЕМОГЛОБИНА, ГЕМОЛИЗА И ГЕМОСТАЗА.
1.Подготовить протоколы экспериментов в рабочей тетради
Практическая работа. Определение количества эритроцитов в крови.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Овладеть техникой подсчета эритроцитов с помощью счетной камеры, определить их содержание в крови и дать заключение о соответствии полученных данных имеющимся стандартам.
ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Кровь животных или человека.
ОБОРУДОВАНИЕ: Микроскоп, счетная камера, покровные стекла, смесители, стаканчик, спирт, йод, вата, копья, 3% раствор хлорида натрия, консервированная кровь.
ХОД РАБОТЫ:
1. Приготовление пробы крови для анализа:
а) налить 3% раствор хлорида натрия в стаканчик;
б) сухим смесителем набрать кровь до отметки 0,5, насасывая ее грушей;
в) обтереть конец смесителя, набрать хлорида натрия до метки 101 для разведения в 200 раз;
г) осторожно перемешать кровь с реактивом.
2. Подготовка счетной камеры:
Рисунок. Камера Горяева
а) притереть покровное стекло к камере до появления колец Ньютона;
А 
Б
ритирка покровного стекла Б. Кольца Ньютона
б) убрать из смесителя первую каплю, представляющую реактив, не смешанный с кровью;
в) поднести конец смесителя к краю покровного стекла и выпустить небольшую каплю;
г) через 1 -2 мин начать подсчет.
Рисунок. Вид 16 малых квадратов камеры Горяева с эритроцитами через окуляр микроскопа.
3. Подсчет эритроцитов:
а) под малым увеличением микроскопа найти в камере сетку Горяева (рис. 22.1), затем перенести микроскоп на большое увеличение;
б) пользуясь правилом Егорова*, подсчитать эритроциты в 5 расположенных по диагонали больших квадратах, разделенных на 16 малых;
Рисунок. Вид 5 больших квадратов камеры Горяева в которых ведут подсчет эритроцитов.
г) данные заносить в предварительно подготовленную сетку.
*Правило Егорова - В квадрате учитываются только те клетки, которые находятся внутри квадрата и на его верхней и левой границе.
РЕЗУЛЬТАТЫ:
Данные подсчета по квадратам
Расчет содержания эритроцитов в1 мкл по формуле:
а· 4000 · в
Количество эритроцитов = -------------------- = ------------------------=
б
где а - количество эритроцитов в 5 больших квадратах;
б – число малых квадратов, в которых считались эритроциты (16 · 5=80);
в – степень разведения крови (200 или 100);
1/4000 – объем жидкости над малым квадратом (мкл).
5. Расчет содержания эритроцитов в1лкрови.
Содержание эритроцитов в 1 мкл | Содержание эритроцитов в 1 л |
ВЫВОД:
__________________________
(Подпись преподавателя, дата)
Практическая работа. Определение содержания гемоглобина в крови по методу Сали
ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Овладеть техникой определения количества гемоглобина в крови колориметрическим методом Сали, определить его содержание и дать заключение о соответствии полученных данных имеющимся нормативам.
ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Кровь животных или человека.
ОБОРУДОВАНИЕ: Гемометр Сали, спирт, йод, вата, дистиллированная вода, 0,1 Н раствор соляной кислоты, кровь.
Рисунок. Гемометр Сали | 1. Штатив гемометра Сали 2. Капсулы с раствором хлорида гематина 3. Градуированная пробирка гемометра 4. Пипетка для раствора кислоты или воды 5. Палочка для перемешивания 6. Капилляр для крови |
ХОД РАБОТЫ:
1. В градуированную пробирку гемометра пипеткой налить раствор соляной кислоты до нижней круговой метки.
2. Набрать кровь в капилляр точно до круговой метки, насасывая ее грушей.
3. Обтереть кончик капилляра ватой и осторожно выдуть кровь на дно градуированной пробирки с кислотой. Ополоснуть стенки капилляра повторными всасываниями и выдуваниями кислоты в пробирке.
4. Пробирку несколько раз встряхнуть и оставить на 5 мин.
5. Пипеткой добавлять в пробирку дистиллированную воду, доводя цвет раствора до цвета стандарта (раствор хлорида гематина соответствует 167 г/л гемоглобина). Перемешать содержимое стеклянной палочкой для однородности раствора. 6. Снять показания на мерной шкале градуированной пробирки по нижнему мениску жидкости. 7. Выразить содержание гемоглобина в исследуемой крови в абсолютных единицах (г/л, г%). 8. Заполнить таблицу с результатами. |
|
РЕЗУЛЬТАТ:
Объект исследования | Единицы измерения гемоглобина | Содержание гемоглобина в пробе | Содержание гемоглобина в норме |
г/л | |||
г% | |||
г/л | |||
г% |
ВЫВОД:
_________________________
(Подпись преподавателя, дата)
Практическая работа. Расчет цветового показателя крови и среднего содержания гемоглобина в эритроците.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ: 1. Рассчитать цветовой показатель крови (ЦП). 2. Рассчитать среднее содержания гемоглобина в эритроците (MCH). 3. Сопоставить полученные показатели с нормативными данными.
ХОД РАБОТЫ:
1. Используя данные о содержании эритроцитов и гемоглобина в исследуемой крови, рассчитать ЦП и МСН по формулам в табл.:
Таблица
Формула расчета ЦП | Формула расчета МСН |
Хгем Хэр ЦП = ------- : -------- Nгем Nэр где Хгем – найденное количество гемоглобина; Хэр – найденное количество эритроцитов (любое нормальное значение эритроцитов для мужчин); Nгем – нормальное количество гемоглобина(кол-во равное стандарту раствора хлорида гематина); Nэр - нормальное количество эритроцитов, равное 5 млн эритроцитов в 1 мкл крови | Хгем MCH = --------------------------------- Хэр где Хгем – найденное количество гемоглобина; Хэр – найденное количество эритроцитов (любое нормальное значение эритроцитов для мужчин); |
2.Сопоставить полученный результат с имеющимися нормативами.
РЕЗУЛЬТАТ:
ВЫВОД:
___________________________
(Подпись преподавателя, дата)
Практическая работа. Наблюдение осмотического гемолиза.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Выявить влияние гипотонической среды на оболочку эритроцита.
ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Кровь животных или человека.
ОБОРУДОВАНИЕ: 3 пробирки, изотонический, гипотонический растворы хлорида натрия, дистиллированная вода, кровь.
ХОД РАБОТЫ:
1. В одну пробирку налить 2 мл изотонического, во вторую – 2 мл гипотонического раствора, в третью 2 мл дистиллированной воды. В каждую добавить по капле крови.
2. Через 10 мин оценить степень прозрачности раствора.
РЕЗУЛЬТАТЫ:
Условия | Наличие или отсутствие гемолиза | Вид гемолиза |
Изотоническая среда: 0,9% NaCl | ||
Гипотоническая среда: 0,4% NaCl | ||
Дистиллированная вода |
ВЫВОД:
___________________________
(Подпись преподавателя, дата)
Практическая работа. Анализ коагулограммы.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Познакомиться с методом, позволяющим судить о ходе процесса свертывания крови. Провести анализ основных этапов свертывания крови по коагулограмме.
ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Коагулограмма человека.
ХОД РАБОТЫ:
1. Произвести анализ:
а) определить начало образования сгустка: время от начала исследования до первого колебания с уменьшенной амплитудой (Т1 ). Т1= То + Тав
б) определить конец образования сгустка: время от начала исследования до первого колебания с минимальной амплитудой(Т2 ). Т2= То + Таг
в) определить продолжительность образования сгустка (Т). Т= Т2 – Т1
Примечание: при скорости движения ленты 600 мм/час; время одного колебания 10с.
Образец коагулограммы
РЕЗУЛЬТАТЫ: (данные анализа опытной коагулограммы)
Показатели | Данные анализа опытной коагулограммы | Норма |
Мужчины | Женщины | |
Т1 | 1 мин 48 с – 4мин 40 с | 1 мин 30 с – 4 мин10 с |
Т2 | 5 мин 20 с – 10мин | 5 мин –10 мин |
Т | 3 мин – 6 мин 20 с | 3 мин 10 с – 7 мин 30 с |
ВЫВОД:
_________________________
(Подпись преподавателя, дата)
