Определение противогрибковой активности полисахаридов
некоторых растений Танзании
а, ж. b, Нгумба Дж. с
доктор химических наук, доцент кафедры химииa
Липецкий государственный технический университет, Липецк, Российская Федерация а
студент кафедры химииb
научный сотрудник кафедры биологииc
Государственный университет г. Додома, Танзанияb, c
E-mail: *****@***rua
В последние годы заметно возросло количество публикаций, связанных с изучением антимикробных свойств экстрактов различных лекарственных растений [Shanmugam A. et all, 2008 ]. Целью нашего исследования было выделение полисахаридов из некоторых лекарственных растений, произрастающих в Танзании (Solanum incanum, Calotropis procera, Cassia abbreviata and Tricodesma zeylanicum Zylanicum), и изучение их противомикробной активности.
Для извлечения полисахаридов листья и стебли растений предварительно промывали от песка, высушивали на воздухе и измельчали до однородной массы. Равные порции биомассы каждого растения обрабатывали водой при комнатной температуре и при нагревании до 90оС; а также водным раствором оксалата аммония при нагревании до 70о С. После удаления растительных клеток полученные экстракты упаривали на воздухе при 40о С, при этом в некоторых образцах выпадал осадок, который удаляли вакуумной фильтрацией через плотный капроновый фильтр. Осадок, при микроскопическом исследовании показавший отсутствие гранул крахмала, и отрицательный тест с йодом, в дальнейшем не исследовался. Полученные концентраты осаждали 3-кратным объемом этанола при охлаждении (+4о С). Образовавшиеся аморфные осадки (полисахаридные фракции) отделяли декантацией. Наличие низкомолекулярных примесей (гликозиды, танины, сапонины) определяли качественными реакциями как в полученных полисахаридах, так и в соответствующих этанольных экстрактах. Моносахаридный состав полисахаридных фракций после их гидролиза 1Н раствором серной кислоты при 100-105°С в течение 4 ч определяли методом хроматографии на бумаге FN-15 в системе н-бутанол : пиридин : вода (6 : 4 : 3). В качестве проявителя использовали раствор азотнокислого серебра и спиртового раствора NaOH, которые дают окрашивание углеводных соединений.
Противогрибковый эффект полученных полисахаридов, а также образцов свежевыжатого сока растений определяли с использованием грибковых культур Rhizopus sp, Chylamiacomia sp. и Aspergillus niger, полученных в биологической лаборатории Государственного Унивенрситета г. Додома, Танзания. В качестве стандартов использовали лекарственные фунгицидные препараты Флукан и Тербинафайн.
Тестирование на противогрибковое действие проведено методом серийных разведений исследуемых образцов (растворы одинаковых концентраций) и последующим нанесением их на агаровую питательную среду с грибковой культурой. Посевы выдерживали 5 суток в термостате при 37°С. Опыты проводили в 3-х повторах. За положительный противогрибковый результат принималась концентрация препарата в среде, при которой отсутствовал видимый рост культуры.
Все исследованные полисахариды, в отличие от образцов свежих соков, проявляли умеренную (25 и 30 % по сравнению со стандартом Флуканом и Тербинафайном соответственно) одинаковую ингибирующую активность по отношению во всем грибковым культурам. Наибольший эффект (50% по сравнению со стандартом Тербифатом) отмечен для полисахарида Cassia abbreviata по отношению к грибковой культуре Rhizopus sp.
Список литературы
Shanmugam A., Mahalakshmi T. S., Barwin A. Vino., Antimicrobial Activity of Polysaccharide Isolated from the Cuttlebone of Sepia aculeate (Orbingy, 1848) and Sepia brevimana (Steenstrup, 1875): An Approach to Selected Antimicrobial Activity for Human Pathogenic Microorganisms Journal of Fisheries and Aquatic Science, 2008. Vol. 3, P. 268-274.
