Практическое занятие № 2

Практическое занятие № 2.

  Тема: Строение бактериальной клетки. Сложные методы окраски (по Граму).

  Цель: изучить строение бактериальной клетки; освоить сложный метод окраски бактерий по Граму.

  Вопросы для рассмотрения:

1. Строение бактериальной клетки, как результат эволюционной адаптации (конкретные примеры: капсула, споры, жгутики и др.).

2. Обязательные и необязательные компоненты бактериальной клетки: химический состав, строение и функция, методы выявления.

3. Понятие о сложных методах окраски бактерий и их назначение. Механизм окраски по Граму.

  Основные понятия темы:

- Перечислить все структурные элементы бактериальной клетки, методы обнаружения.

- Химический состав, строение и функция каждого компонента бактериальной клетки: нуклеоид, цитоплазма, цитоплазматическая мембрана, клеточная стенка, рибосомы, мезосомы, капсула, спора, жгутики, внутрибактериальные включения, пили.

- Дать определение бактериям, частично и полностью утратившие клеточную стенку, перечислить причины утраты.

- Перечислить отличительные особенности L-форм, протопластов, сферопластов.

- Дать определение сложным методам окраски бактерий, их назначение.

- Варианты микроорганизмов по отношению к окраске по Граму.

- Определить  химические особенности микробных  клеток, являющиеся основой для дифференциации бактерий на грамположительные и грамотрицательные.

- Основные этапы механизма окраски грамположительных и грамотрицательных бактерий.

  Самостоятельная работа студентов на занятии.

Работа  1. Освоить метод окраски по Граму.

Готовят препарат из смеси грамположительных кокков и грамотрицательных палочек. Окрашивают по методу Грама.

1. На фиксированный мазок наносят карболово-спиртовой раствор генцианового фиолетового  через полоску фильтровальной бумаги. Через 1-2 мин её снимают, а краситель сливают.

2. Наносят раствор Люголя на 1 мин.

3. Обесцвечивают препарат этиловым спиртом в течение 30- 60 сек. до прекращения отхождения фиолетовых струек красителя.

4. Промывают препарат водой.

5. Докрашивают мазок водным раствором фуксина в течение 1-2 мин, промывают водой и высушивают.

Рассматривают окрашенный препарат под микроскопом с масляной иммерсией. Необходимо обратить внимание на цвет, в который окрашены кокки и палочки.

Протокол исследования:

Исследуемый материал	Ингредиенты окраски по Граму и время их действия	Назначение основных ингредиентов	Результат (рисунок с обозначениями)

Вывод: (ответ на вопрос): каков механизм окраски по Граму?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________