Колибактерин, лиофилизат для приготовления суспензии для приема внутрь

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Колибактерин, лиофилизат                                 Вводится взамен

для приготовления суспензии для  ФС 42-3365-97

приема внутрь

Настоящая фармакопейная статья распространяется на колисодержащий пробиотик, входящий в группу биотехнологических лекарственных препаратов (БтЛП) – колибактерин, лиофилизат для приготовления суспензии для приема внутрь.

Колибактерин – представляет собой биомассу живого антагонистически активного штамма бактерий Escherichia coli M-17 (ГКПМ № 000), лиофильно высушенную в среде культивирования с добавлением защитной среды высушивания (сахарозо-желатиновой, сахарозной). В одной  дозе препарата должно содержаться не менее 10х109 живых КОЕ или на конце срока годности не менее 6х109 живых КОЕ.

ПРОИЗВОДСТВО

Производство колибактерина основано на выращивании/культивировании производственного штамма бактерий E. coli М-17 на оптимальной питательной среде в соответствующих условиях культивирования с последующей лиофилизацией биомассы в защитной среде. Используемые в процессе производства производственные штаммы должны быть охарактеризованы в объеме в соответствие с требованиями, изложенными в ОФС «Колисодержащие пробиотики», испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».

При производстве колибактерина проводят валидацию технологического процесса и методов контроля в соответствии с требованиями правил организации производства и контроля качества БтЛП. Стадии производственного процесса получения колибактерина должны быть охарактеризованы в соответствии с требованиями, изложенными в ОФС «Пробиотики» и ОФС «Колисодержащие пробиотики».

ИСПЫТАНИЯ

Описание. Кристаллическая или пористая масса желтоватого или бежевого, или беловато-серого цвета различной интенсивности. Имеет специфический запах.

Подлинность. В мазках, окрашенных по Граму, должны присутствовать грамотрицательные короткие одиночные палочки с закругленными концами, длиною 1,5-4,0 мкм. Испытание проводят микроскопически в соответствии с ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».

Препарат должен обладать антагонистической активностью, характерной для штамма E. coli M-17 (см. раздел «Специфическая активность»).

Время восстановления препарата. Не более 5 мин. При добавлении во флакон с препаратом 0,9 % раствора натрия хлорида, их расчета 1 мл на 1 дозу в течение 5 мин, содержимое должно полностью диспергироваться с образованием гомогенной непрозрачной суспензии желтоватого или бежевого, или беловато-серого цвета..

Испытание проводят визуально в соответствии с ОФС «Пробиотики».

рН. От 5,0 до 7,0. Испытание проводят после восстановления препарата, согласно разделу «Время восстановления препарата» потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия».

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,5 %. Определение проводят гравиметрическим методом в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или другим валидированным методом.

Специфическая безвредность. Препарат должен быть безвреден для белых мышей при пероральном введении одной дозы. Определение проводят в соответствии с ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo».

Отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов (микробиологическая чистота).  Категория 5.3.А:

Бактерии - контаминанты должны отсутствовать (флак.); дрожжевые и плесневые грибы должны отсутствовать (флак.);

бактериофаг не более 10 БОЕ, для препарата с содержанием E. coli не менее 1010 КОЕ (флак.).

В мазках, приготовленных из восстановленных испытуемых образцов и окрашенных по Граму должны быть только характерные для препарата грамотрицательные одиночные палочки с закругленными концами.

Определение на отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» методом прямого посева.

Специфическая активность. В одной дозе препарата должно содержаться не менее 10х109 живых КОЕ или на конце срока годности не менее 6х109 живых КОЕ. Показатель антагонистической активности при отсроченном антагонизме на среде Гаузе №2, выраженный величиной зоны роста тест-штаммов S. sonnei 5063; S. flexneri 337, 170; E. coli 0157; P. mirabilis H-237, P. vulgaris 177 препаратом должны быть не менее 15 мм.

Определение количества живых бактериальных клеток в 1 дозе проводят методом серийных разведений в 0,9 % растворе натрия хлорида с последующим высевом на агар Эндо, испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков» (метод Коха).

Производственные штаммы и штаммы для контроля. Штамм бактерий Escherichia coli М-17 (ГКПМ № 000), депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов (Россия). Штамм по биологическим и биохимических свойствам должен соответствовать требованиям ОФС «Колисодержащие пробиотики».  Испытания  проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков», ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo», ОФС «Определение специфической активности пробиотиков», ОФС «Микробиологическая чистота».

Используемые для контроля штаммы бактерий депонированные в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов, Россия (ГКПМ) - Shigella sonnei 5063 (депозит № 000); S. flexneri 337 (депозит № 000), 170 (депозит № 000); Escherichia. coli 0157 (депозит № 000); Proteus mirabilis H-237 (депозит № 000), P. vulgaris 177 (депозит № 000). Тест-штаммы должны соответствовать требованиям ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».

Контроль качества производственных пробиотических штаммов и штаммов для контроля пробиотиков проводится не реже 1 раза в год.

Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».

Транспортирование и хранение. При температуре от 2 до 8 оС  в соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».